酶免疫测定的酶—大分子蛋白结合物的制备

酶结合物可以说是酶免疫测定试剂盒的核心组成部分。通常酶免疫测定试剂盒的有效使用期限即是根据酶结合物的稳定性而定的。因为在酶免疫测定试剂盒中,最易受外环境影响的组成试剂即是酶结合物。此外,酶结合物的质量亦是影响试剂盒质量的很重要的因素之一,可见酶结合物的制备对于酶免疫测定来说,是非常关键的一个环节。 酶—抗体(或其他大分子蛋白)结合物是酶免疫测定的有机组成部分,也是其测定基础之所在。通常,酶结合物(酶标抗体或抗原)一般均是通过化学交联而得到的。一个理想的化学交联方法应能得到分子组成明确、酶及抗体或抗原不失活、连接键稳定且经济的完全耦合的结合物。 酶—蛋白的耦合方法可分为三大类,即①酶与蛋白的随机共价交联方法;如戊二醛方法;②通过特定化学基团进行共价交联的方法,如过碘酸钠方法及采用各种均一和非均一双功能交联剂的方法;③通过非共价键交联的方法,如酶—抗酶免疫复合物方法。这些方法各有其优缺点,如戊二醛方法,由于交联的随机性,所得......阅读全文

酶免疫测定方法

ACA(抗心磷脂抗体)主要通过抑制血管内皮细胞合成PGI2,干扰血栓调节素、纤溶酶原激活剂和蛋白质C系统的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝状态,与复发性动静脉血栓形成、反复自然流产及血小板减少症关系密切。其主要程序为用纯心磷脂的无水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封闭后分别于标本孔和对照孔中加

异相酶免疫测定

异相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类标记免疫测定技术。异相液相酶免疫测定主要用于检测样品中极微量的短肽激素和某些药物等小分子半抗原。酶标志物具有更好的稳定性,且无放射性污染。1.平衡法:将待测样品抗原、酶标抗原及特异性抗体进行一次性温育,待反应达平衡后,测定离心沉淀物(酶标抗原抗体复合物)中加入酶底

什么叫-酶免疫测定

  酶免法是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA),它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。用酶与指示剂的反应来放大信号便于检测。  就是用酶标记抗原或抗体,抗原抗体反应后加入酶的指示剂(酶的底物反应后会显色),颜色的

酶免疫测定的应用

  酶免疫测定具有高度的敏感性和特异性,几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用以检测。它的最小可测值达ng甚至pg水平。与放射免疫分析相比,酶免疫测定的优点是标记试剂比较稳定,且无放射性危害。因此,酶免疫测定的应用日新月异,酶免疫测定的新方法、新技术不断发展。但酶免疫测定在医学检验中的普及应归功于商品试

酶免疫测定的应用

几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用酶免疫测定检测。均相酶免疫测定主要用于药物和小分子物质的检测。非均相免疫测定中的ELISA在多种物质的检测中被广泛的使用。

均相酶免疫测定

1.酶增强免疫测定技术(EMIT):EMIT的基本原理是半抗原与酶结合成酶标半抗原,保留半抗原和酶的活性。当酶标半抗原与抗体结合后,所标的酶与抗体密切接触,使酶的活性中心受到影响而活性被抑制。反应后酶活力大小与标本中的半抗原量呈一定的比例,从酶活力的测定结果就可推算出标本中半抗原的量。2.克隆酶供体

酶免疫测定的应用

  几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用酶免疫测定检测。  均相酶免疫测定主要用于药物和小分子物质的检测。  非均相免疫测定中的ELISA在多种物质的检测中被广泛的使用。

酶免疫测定的应用

  酶免疫测定具有高度的敏感性和特异性,几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用以检测。它的最小可测值达ng甚至pg水平。与放射免疫分析相比,酶免疫测定的优点是标记试剂比较稳定,且无放射性危害。因此,酶免疫测定的应用日新月异,酶免疫测定的新方法、新技术不断发展。但酶免疫测定在医学检验中的普及应归功于商品试

酶免疫测定的概述

  酶免疫测定(enzyme immunoassay,EIA),是将酶催化作用的高效性与抗原抗体反应的特异性相结合的一种微量分析技术。酶标记抗原抗体后形成的酶标记物,既保留抗原或抗体的免疫活性,又保留酶的催化活性。当酶标记物与待测样品中相应的抗原或抗体相互作用时,可形成酶标记抗原抗体复合物。利用复合

异相酶免疫测定介绍

  异相酶免疫测定:又分为液相和固相酶免疫测定。www.med66.com  液相酶免疫测定:医学教|育网其测定灵敏度与放射免疫方法相近,近年有取代放射免疫方法的趋势。  固相酶免疫测定:如常用的酶联免疫吸附试验(ELISA)。

酶联免疫测定的原则

  EIA本身是以酶[辣根过氧化物酶(HRP)、 碱性磷酸酶(AP)等]作标记物的,因此,EIA的测定放大始终是围绕着 标记酶来作文章的,不外乎三种可能的方式:①增加标记酶的量;②非显色底物的应用;③附加一个受标记酶催化的反应系统。  一、增加标记酶的量 通过生物素/亲合素—酶或酶/抗酶复合物的间接

酶免疫测定的技术原理

免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物,与抗体或抗原联结,与相应的抗原或抗体作用后,通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量,亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究,即酶免疫组织化学技术。目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA),它是使抗

异相酶免疫测定的简介

  异相酶免疫测定是目前应用最广泛的一类标记免疫测定技术。  异相液相酶免疫测定主要用于检测样品中极微量的短肽激素和某些药物等小分子半抗原。酶标志物具有更好的稳定性,且无放射性污染。  1.平衡法:将待测样品抗原、酶标抗原及特异性抗体进行一次性温育,待反应达平衡后,测定离心沉淀物(酶标抗原抗体复合物

酶免疫测定的技术原理

免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物,与抗体或抗原联结,与相应的抗原或抗体作用后,通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量,亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究,即酶免疫组织化学技术。目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA),它是使抗

关于酶免疫测定的基本介绍

  免疫酶技术(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫测定,是通过酶标记抗体或抗原来检测抗原或抗体的方法,其应用范围极广。显示方法是用酶的特殊底物来处理反应后的标本,通过酶催化底物的显色反应来测定抗原或抗体的存在,以酶标作定量或定性分析。标记酶有辣根过氧化物酶(HRP) 和碱

关于酶免疫测定的方法介绍

  ACA(抗心磷脂抗体)主要通过抑制血管内皮细胞合成PGI2,干扰血栓调节素、纤溶酶原激活剂和蛋白质C系统的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝状态,与复发性动静脉血栓形成、反复自然流产及血小板减少症关系密切。  其主要程序为用纯心磷脂的无水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封闭后分别于标本孔和对

酶免疫测定技术的测定方法

ACA(抗心磷脂抗体)主要通过抑制血管内皮细胞合成PGI2,干扰血栓调节素、纤溶酶原激活剂和蛋白质C系统的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝状态,与复发性动静脉血栓形成、反复自然流产及血小板减少症关系密切。其主要程序为用纯心磷脂的无水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封闭后分别于标本孔和对照孔中加

关于酶免疫测定的方法介绍

  ACA(抗心磷脂抗体)主要通过抑制血管内皮细胞合成PGI2,干扰血栓调节素、纤溶酶原激活剂和蛋白质C系统的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝状态,与复发性动静脉血栓形成、反复自然流产及血小板减少症关系密切。  其主要程序为用纯心磷脂的无水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封闭后分别于标本孔和对

酶免疫测定的应用有哪些?

  酶免疫测定具有高度的敏感性和特异性,几乎所有的可溶性抗原抗体系统均可用以检测。它的最小可测值达ng甚至pg水平。与放射免疫分析相比,酶免疫测定的优点是标记试剂比较稳定,且无放射性危害。因此,酶免疫测定的应用日新月异,酶免疫测定的新方法、新技术不断发展。但酶免疫测定在医学检验中的普及应归功于商品试

荧光酶免疫测定的方法评价

  固相荧光酶免疫测定法,避免了血清和其他生物样品的背景荧光会干扰。

酶免疫测定的概念和方法

酶免疫测定(enzyme immunoassay,EIA),是将酶催化作用的高效性与抗原抗体反应的特异性相结合的一种微量分析技术。酶标记抗原抗体后形成的酶标记物,既保留抗原或抗体的免疫活性,又保留酶的催化活性。当酶标记物与待测样品中相应的抗原或抗体相互作用时,可形成酶标记抗原抗体复合物。利用复合物上

用于酶联免疫测定(ELISA)酶的色原底物

辣根过氧化物酶的色原底物 HRP最常用的色原底物有邻苯二胺(OPD)、2,2’—吖嗪—(3—乙酰苯基噻唑磺酸—6)[2,2’—azino-di(3—ethylben2thiazolinesulphonicacid-6),ABTS](杂环吖嗪)、四甲基联苯胺(TMB)和4—氨基安替比林:苯酚耦联底

固相酶免疫测定技术的概述

  固相酶免疫测定主要是指ELISA,其基本原理是:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面(包被),并保持其免疫活性;用酶标记(另一种)抗原或抗体,保留其免疫活性和酶活性;在测定时,把待测标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应;用洗涤的方法使固相载体上形

异相液相酶免疫测定的方法

  主要用于检测样品中极微量的短肽激素和某些药物等小分子半抗原。酶标志物具有更好的稳定性,且无放射性污染。  1.平衡法:将待测样品抗原、酶标抗原及特异性抗体进行一次性温育,待反应达平衡后,测定离心沉淀物(酶标抗原抗体复合物)中加入酶底物液后的呈色吸光度值。  2.非平衡法:先将样品(或标准品)与抗

关于酶免疫测定的衍生方法介绍

  由于酶免疫测定无需特殊仪器和试剂,且操作简便,利于普及。因此,在免疫标记技术中,该法应用最为广泛,并在原有方法基础上加以改良,使得众多新的,更敏感的方法应运而生。  ①生物素-亲和素放大系统(biotin-avidin system,BAS),建立于70年代后期,通过将酶标记在生物素或亲和素上,

关于酶免疫测定的技术原理介绍

  免疫酶技术是将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有机结合的一种方法。它以酶作为标记物,与抗体或抗原联结,与相应的抗原或抗体作用后,通过底物的颜色反应作抗原抗体的定性和定量,亦可用于组织中抗原或抗体的定位研究,即酶免疫组织化学技术。  目前应用最多的免疫酶技术是酶联免疫吸附实验(ELISA),

异相酶免疫测定是什么呢

  是目前应用最广泛的一类标记免疫测定技术。  (一)异相液相酶免疫测定  主要用于检测样品中极微量的短肽激素和某些药物等小分子半抗原。酶标志物具有更好的稳定性,且无放射性污染。  1.平衡法:将待测样品抗原、酶标抗原及特异性抗体进行一次性温育,待反应达平衡后,测定离心沉淀物(酶标抗原抗体复合物)中

酶联免疫测定技术的多酶级联放大系统

一、AP底物放大系统(sutrate ampiification system)AP可催化底物NADP+脱磷酸而生成NAD+(辅酶1),以乙醇作还原剂,在醇脱氧酶催比下,乙醇脱氢,NAD+还原为NADH,NADH在黄递酶的催化下脱氢,同时四唑盐(tetrazoliim)被还原成有色的甲蜡(fo

均相酶免疫测定的内容有什么?

  1.酶增强免疫测定技术(EMIT):  EMIT的基本原理是半抗原与酶结合成酶标半抗原,保留半抗原和酶的活性。当酶标半抗原与抗体结合后,所标的酶与抗体密切接触,使酶的活性中心受到影响而活性被抑制。反应后酶活力大小与标本中的半抗原量呈一定的比例,从酶活力的测定结果就可推算出标本中半抗原的量。  2

均相酶免疫测定的种类有哪些

  1.酶增强免疫测定技术(EMIT):EMIT的基本原理是半抗原与酶结合成酶标半抗原,保留半抗原和酶的活性。当酶标半抗原与抗体结合后,所标的酶与抗体密切接触,使酶的活性中心受到影响而活性被抑制。反应后酶活力大小与标本中的半抗原量呈一定的比例,从酶活力的测定结果就可推算出标本中半抗原的量。  2.克