筛选解离速率优化的单链抗体（scFv）
选择3~5轮后，随机挑取克隆加入96孔微量滴定板中 并诱导表达可溶性scFv.然后，在包被有相关抗原的96孔微量滴定板中，用ELISA分析含有可溶性scFv的细菌上清。此过程可以识别出那些结合了抗原的scFv.但即便采用上述严谨性选择后，ELISA阳性克隆中仅有部分克隆的亲和力比野生型高。ELISA信号强度不能很好地显示哪个克隆具有较低的 Ka值，而且更为普 遍的是它与scFv表达水平相关。因此，这就需要一种筛选ELISA阳性克隆的技术，能识别出具有较低Ka值的克隆。竞争性或抑制性ELISA就是这样的技术。或者可以利用以下事实：koff降低一般是导致高亲和力提高的主要动力学机制，因此通过测定解离速率就可以识别出那些亲和力得到提高的抗体。因为 κoff是非浓度依赖的（不同于kon,），所以无需纯化抗体片段就能测定κoff，比如采用类似BIAcore的仪器进行SRP分析。我们已发现这是鉴别高亲和力scPv的一项很......阅读全文
抗体轻链的定义
Ig轻链的分子质量约25kDa，约含210个氨基酸残基。轻链有两种：κ链和λ链，这两种轻链决定了Ig的型别。一个天然的Ig分子两条轻链总是相同的，但在同一个体内可存在分别带有κ或λ链的抗体分子。不同种属生物体内两型轻链的比例不同，正常人血清免疫球蛋白κ链：λ链约为2：1，而在小鼠的比例为20：1。
抗体重链的定义
中文名称抗体重链英文名称heavy chain of antibody定 义免疫球蛋白中分子量较大的、含440个氨基酸的肽链。根据其恒定区抗原性的不同分为μ、γ、α、δ和ε五类，相应的免疫球蛋白分别为IgM、IgG、IgA、IgD和IgE。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞免疫（二级学科）
Nature－Methods：高质量的组蛋白PTM抗体
美国芝加哥大学的研究人员开发出质量稳定的重组抗体，能特异识别组蛋白H3的三甲基赖氨酸残基，适合各种表观遗传学应用。这一成果于近日发表在《Nature Methods》在线版上。 组蛋白的翻译后修饰(PTM)在表观遗传调控中发挥重要作用。组蛋白PTM的抗体是表观遗传学研究(如染色质免疫沉
GE推出新款亲和层析介质CaptoL
用电气医疗集团(GE Healthcare)近日推出了一款新的亲和层析介质Capto L，适用于抗体和抗体片段的捕获。它结合了刚性的高流速琼脂糖基质及与免疫球蛋白结合的重组蛋白L配体，这种配体对于抗体K轻链(Kappa light chain)上的可变区有很强的亲合力。因此，Capto
噬茵体展示技术和噬菌体抗体库
噬菌体展示技术是一种强有力的基因表达筛选技术，1985年首次由美国科学家SmithMl在(Science)杂志进行了阐述。噬菌体展示技术的基本原理是将外源蛋白的基因克隆到噬菌体的基因组DNA中，从而在噬菌体的表面表达特定的外源蛋白。Ellis SEp等指出利用噬菌体展示多肽库可以筛选和确定线虫疫苗的
噬茵体展示技术和噬菌体抗体库
噬菌体展示技术是一种强有力的基因表达筛选技术，1985年首次由美国科学家SmithMl在(Science))杂志进行了阐述。噬菌体展示技术的基本原理是将外源蛋白的基因克隆到噬菌体的基因组DNA中，从而在噬菌体的表面表达特定的外源蛋白。Ellis SEp等指出利用噬菌体展示多肽库可以筛选和确定线虫
概述噬茵体展示技术和噬菌体抗体库
噬菌体展示技术是一种强有力的基因表达筛选技术，1985年首次由美国科学家SmithMl在(Science)杂志进行了阐述。噬菌体展示技术的基本原理是将外源蛋白的基因克隆到噬菌体的基因组DNA中，从而在噬菌体的表面表达特定的外源蛋白。 Ellis SEp等指出利用噬菌体展示多肽库可以筛选和确定线
单链RNA的基本信息
中文名称单链RNA英文名称single-stranded RNA;ssRNA定 义只含有一条链的RNA分子。生物体中绝大部分RNA是单链RNA，形成二级结构时，是既有单链、又有双链结构域的RNA分子；只有某些RNA病毒是由两条链互补而成的双链RNA。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与
单链突出端的定义
中文名称单链突出端英文名称overhang定 义双链核酸末端带有一个或多个未配对核苷酸的单链部分。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
科学家开发出高质量的组蛋白PTM抗体
美国芝加哥大学的研究人员开发出质量稳定的重组抗体，能特异识别组蛋白H3的三甲基赖氨酸残基，适合各种表观遗传学应用。这一成果于近日发表在《Nature Methods》在线版上。 组蛋白的翻译后修饰(PTM)在表观遗传调控中发挥重要作用。组蛋白PTM的抗体是表观遗传学研究(如染色质免疫沉
抗单链DNA(ssDNA)抗体检测的参考值及临床意义
参考值 正常人：阴性，酶标法 临床意义 抗ssDNA的测定结果缺乏疾病特异性，除SLE患者有较高检出率（50%～60%）外，其他风湿病如混合性结缔组织病（mixel connective tissue disease，MCTD）、药物诱导的狼疮、硬皮病、皮肌炎、干燥综合征，类风湿性关节炎等
单链构象多态性
单链构象多态性（signle strand conformation polymorphism,SSCP）是指单链DNA由于碱基序列的不同可引起构象差异，这种差异将造成相同或相近长度的单链DNA电泳迁移率不同，从而可用于DNA中单个碱基的替代、微小的缺失或手稿的检测。用SSCP法检查基因突变时，通常
细胞化学词汇单链DNA
中文名称：单链DNA外文名称：single－stranded DNA术语含义：单链DNA就是指以这种状态存在的DNA。单链DNA在分子流体力学性质、吸收光谱、碱基反应性质等方面都和双链DNA不同。某些噬菌体粒子内含有单链环状的DNA，这样的噬菌体DNA在细胞内增殖时则形成双链DNA。
单链DNA探针技术简介
用双链探针杂交检测另一个远缘DNA时,探针序列与被检测序列间有很多错配。而两条探针互补链之间的配对却十分稳定,即形成自身的无效杂交,结果使检测效率下降。采用单链探针则可解决这一问题。单链DNA探针的合成方法主要有下列两种:(1) 以M13载体衍生序列为模板,用Klenow片段合成单链探针; (2)
一种关于治疗手足口病的双特异性抗体的研究
手足口病（HFMD）是由肠道病毒引起的疾病，引发手足口病的肠道病毒有20多种，其中肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A16（CA16）是手足口病的主要致病因子，可导致严重的中枢神经系统并发症。最近针对EV71病毒感染的疫苗和抗体的开发取得了突破性的进展，然而，针对EV71和CA16同时感染的
噬菌体抗体库的富集筛选
实验概要用于噬菌体抗体库富集筛选的抗原至关重要，一般来说，纯化后的可溶性蛋白纯度高，含量大，可直接包被ELISA板，是筛选特异性抗体的最佳选择。在某种情况下，需要获得针对某一特殊蛋白的单克隆抗体，也可以用抗这种蛋白的单克隆抗体捕捉抗原的方法来进行筛选。实验步骤1. 将用于筛选特异性抗体的抗原用0.1
抗体药研究的渐变之路（二）
图4. 单克隆抗体结构与类型[7]Rituximab是嵌合mAb，其在临床上用于治疗非霍奇金淋巴瘤。不幸的是，小鼠可变区在许多情况下仍然被认为是外来的，这使得嵌合mAb的应用得到了一定的限制。[6-7] Alemtuzumab是人源化单克隆抗体，一种白血病抗癌新药。人源化单克隆抗体在可变区域内，
单链构象多态性的原理
单链构象多态性（Single-strand conformation polymorphism，SSCP)分析可以检测DNA序列之间的不同。SSCP首先由Lee 等[9]用于研究自然微生物群体的多样性。在低温条件下，单链DNA呈现一种由内部分子相互作用形成的三维构象，它影响了DNA在非变性凝胶中的迁
单链构象多态性的应用
单链构象多态性可用于预筛选克隆文库。可对其中的某一个条带进行测序，并与数据库中已知序列比对。
单链构象多态性的原理
单链构象多态性（Single-strand conformation polymorphism，SSCP)分析可以检测DNA序列之间的不同。SSCP首先由Lee 等[9]用于研究自然微生物群体的多样性。在低温条件下，单链DNA呈现一种由内部分子相互作用形成的三维构象，它影响了DNA在非变性凝胶中的迁
单链DNA的功概念和作用
单链DNA就是指以这种状态存在的DNA。单链DNA在分子流体力学性质、吸收光谱、碱基反应性质等方面都和双链DNA不同。某些噬菌体粒子内含有单链环状的DNA，这样的噬菌体DNA在细胞内增殖时则形成双链DNA。
单链DNA结合蛋白的功能简介
单链DNA结合蛋白（Single-stranded DNA-binding protein，缩写SSB或SSBP）又称单链结合蛋白，是专门负责与DNA单链区域结合的一种蛋白质，为DNA复制、重组和修复所必需的成分。 防止两条互补单链再次结合为双螺旋，维持单链状态。防止单链区域形成链内二级结构。
单链RNA的基本信息介绍
一般来说生物学家是根据RNA能否直接起mRNA作用而分成正链ssRNA病毒与负链ssRNA病毒两种。 (1)正链RNA病毒（如脊髓灰质炎病毒）的ssRNA可直接起mRNA作用，转译早期蛋白质，包括RNA多聚酶和抑制宿主细胞合成代谢的调控蛋白。然后在RNA多聚酶的作用下，以ssRNA（正链）为模板
抗体里的轻链和重链都是什么
一个免疫球蛋白分子包含四个肽链，俩相同的短链叫做轻链（L链），俩相同的长链叫做重链（H链），链链之间通过二硫键相连，俩链各有一个恒定部分一个变异部分，从而和各种抗原决定簇结合。
抗体里的轻链和重链都是什么
一个免疫球蛋白分子包含四个肽链，俩相同的短链叫做轻链（L链），倆相同的长链叫做重链（H链），链链之间通过二硫键相连，俩链各有一个恒定部分一个变异部分，从而和各种抗原决定簇结合。
单链构象多态性简介
单链构象多态性，在一定条件下， 单链DNA可形成特有的二级结构。不同 DNA链上单个碱基的改变可引起其二级结 构的改变，从而改变DNA链在非变性胶中 的电泳迁移率形成的多态性称作单链构象多 态性。单链DNA片段呈复杂的空间折叠构 象。这种立体结构主要是由其内部碱基配对 等分子内相互作用力来维持的
单链丝状噬菌体展示系统
一、单链丝状噬茁体展示系统 1、pIII展示系统及噬苗体抗体 丝状噬茵体是单链DNA病毒，pIII是病毒的次要外完蛋白（minor coatprotein）、位于病毒颗粒的一端，每个病毒颗粒都有3—5个拷贝pIII蛋白，pIII有两个位点可供外源序列插入，即N端和近N端可伸屈胃内。当抗体片段或蛋
半制备规模单链RNA纯化
引言寡核苷酸合成是非常高效和高产率的过程。在固相载体上进行寡核苷酸反应的典型产率为每耦合阶98～99.5%。在典型的多阶寡核苷酸合成中，杂质聚集在一起，即使是一般大小的21基体寡核苷酸的总产率也达到67～90%，较长链的寡核苷酸的产率相应较低。研究人员通常需要使用纯度高于初步合成混合物的材料。因此，
细胞化学词汇单链互补DNA
中文名称：单链互补DNA英文名称：single-strand cDNA;sscDNA定 义：在逆转录酶催化下，以信使核糖核酸(mRNA)为模板合成与mRNA序列互补的单链DNA。应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
半制备规模单链RNA纯化
寡核苷酸合成是非常高效和高产率的过程。在固相载体上进行寡核苷酸反应的典型产率为每耦合阶98～99.5%。在典型的多阶寡核苷酸合成中，杂质聚集在一起，即使是一般大小的21基体寡核苷酸的总产率也达到67～90%，较长链的寡核苷酸的产率相应较低。研究人员通常需要使用纯度高于初步合成混合物的材料。因此，