关于多聚赖氨酸的配制、保存、使用总结与问题3
十六、各位老师，有几个关于多聚赖氨酸包被培养板的问题请教1、pll到底溶于硼酸缓冲液还是溶于三蒸水或双蒸水2、使用前是用灭菌的去离子水稀释吗，可不可以用双蒸水或别的答：多聚赖氨酸溶于硼酸缓冲液或者无菌培养用水；多聚赖氨酸包被培养板使用前是用灭菌的去离子水稀释，最好不要用双蒸水或别的，因为多聚赖氨酸包被的原理是通过改变器皿表面的电荷而促进细胞的黏附。十七、请问：多聚赖氨酸包被培养板和培养瓶时，该注意什么问题？答：我的方法是：浓度为50ng/1ml的多聚赖氨酸，加入培养板或培养瓶能均匀覆盖底部就可，放置在无菌操作台中过夜。第二天早上用时先用双蒸水冲洗三遍再用。十八、我的问题是多聚赖氨酸可以在培养瓶中放多长时间，太长了会有影响吗？答：我曾用过多聚赖氨酸包被培养瓶,但浓度是0.1mg/ml,我都是放一夜,第二天吸掉晾干就用,当然要紫外消一下.我觉得时间长点没什么大碍。我们这里的老师说，多聚赖氨酸不能用紫外线照射。1.用赖氨酸包被培养板和......阅读全文
组织培养培养基配制、灭菌及保存
培养基的配制1、根据配方要求，用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量，放入同一烧杯中，并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。2、将1中称好的琼脂加蒸馏水300～400毫升，加热并不断搅拌，直至煮沸溶解呈透明状，再停止加热。3、将1中所取的各种物质（包括蔗糖），加入煮好的琼脂中，再加水至1000
在使用水分测定仪过程中常见的问题总结
在使用水分测定仪过程中常见的问题总结能够检测各类有机及无机固体、液体、气体等样品中含水率的的仪器叫做水分测定仪，按测定原理可以分类物理测定法和化学测定法两大类。物理测定法常用的用失重法、蒸馏分层法、气相色谱分析法等，化学测定方法主要有卡尔费休法（Karl Fischer）、甲苯法等，标准化组织把卡尔
简述菌株的保存使用
1、新引进的菌种经形态、染色、培养性状、生化特性等的鉴别确定后作记录，并进行保存。 2、长期保存的储存菌株以冷冻干燥保藏为主，特殊要求的菌种可用其它方法进行保存，保存期可长达几年至几十年。 3、半储存菌株以含20%甘油的肉汤或液体石腊封存的半固体琼脂为主，在0℃以下保存，保存期为3－6个月。
标本的收集与保存
一、血液标本 有些生理因素，如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化，有些甚至还有昼夜变化。因此血液标本的采集应尽量避免生理因素干扰，以条件一致为宜，如无法避免，应在标本上注明该因素。 1．外周血 一般选取左手无名指内侧采血，该部位应无冻疮，炎症，水肿，破损。
标本的收集与保存
一、血液标本有些生理因素，如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化，有些甚至还有昼夜变化。因此血液标本的采集应尽量避免生理因素干扰，以条件一致为宜，如无法避免，应在标本上注明该因素。1．外周血一般选取左手无名指内侧采血，该部位应无冻疮，炎症，水肿，破损。如该部位不符合要
高速离心机－PCR问题的总结
pcr产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些zui好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带 pcr反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及活性 ④pcr循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质
总结几个液相色谱柱的问题
色谱柱是液相色谱仪的核心，在我们使用液相色谱仪的时候，保证液相色谱柱的柱效，延长色谱柱的使用寿命是很重要的事情，当我们使用的时候色谱柱如果出息压力过高或者过低等问题都是属于柱压问题。液相色谱柱如果压力过高是因为柱子里面产生了杂质，造成液体的流动力加大而所造成。下面为大家总结的几个液相色谱柱的问题
关于抗原抗体反应的抗血清的纯化与保存
（1）采血：加强免疫的动物2—3次后，可通过耳静脉或眼球（小鼠）采血，进行抗血清效价测定。当效价达到理想的高度后，可以采血。采血方式可以从心脏直接取血，也可通过动脉放血。待血液凝固后用针筒或吸管吸取血清。 （2）抗血清的纯化与保存：除抗体外血清中含有多种其他蛋白成分。为了避免这些蛋白质干扰抗体
常用缓冲溶液的配制方法3
9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃） pH 0.04M巴比妥钠溶液
在使用后，菌种保存管的保存环境要求
菌种保存管采用的是低温冷冻保存法，因此，使用后，需放置低温环境，如-20℃、-80℃或液氮中保存，而且温度越低，保存效果越好。用户需根据菌种的保存要求选择具体保存温度。
多聚赖氨酸的产品特点介绍
1)抑菌谱广 ε-PL对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌、霉菌均有很好的抑菌效果，并且对一些耐热性芽孢杆菌和病毒也有一定抑制作用。 2)安全性能高 当人体食用后，可降解为L-赖氨酸这一人体必需氨基酸，进一步用于蛋白质合成或继续代谢，无任何毒性，并于2003年通过了美国食品和医药管理(FD
多聚赖氨酸的应用范围介绍
ε-多聚赖氨酸添加于食品中仅需微量就能奏效，且不会影响食品口味感，可做食品的天然保存剂。它天然安全，符合消费者的健康需求。在日本已经得到广泛应用。ε-多聚赖氨酸应用于糕点、面包食品中，能有效的抑制耐热性芽孢杆菌的增殖，延长保存期；应用于低糖低热量食品，如乳蛋白冰淇淋、奶油制品等，可改善其保存性；
Transwell侵袭实验总结－（3）－操作步骤
．步骤2．1 Transwell小室制备2．1．1 无基质胶Transwell小室制备① 包被基底膜：用50mg/LMatrigel 1:8稀释液包被Transwell小室底部膜的上室面，4℃风干。如果需要在下室面铺FN的话，可将200ul枪头的尖端剪掉,吸取FN均匀涂抹在小室的下面。用胶原（col
生物样品保存需要了解的问题
1、生物样本保存应该在什么样的温度条件下? 生物样本的保存温度与样本的处理方式、样本特性、用途和保存时间直接相关，但科学界统一的共识是，如要长期保持生物样本的离体时的状态，必须保存在-135度玻璃化温度以下，只有在此温度以下，生物分子的微观移动才会完全停止，达到“时间停止运行”的状态，所以
PCR实验指导与常见问题分析3
Influence of annealing temperature and number of loci amplifiedLike any other PCR, multiplex reactions should be done at a stringent enough temperatur
细胞培养常见问题与解答3
15.如何检测内毒素(热源)水平？ LAL（Limulus Amebocyte Lysate）试验是可用的最敏感和特异的检测细菌内毒素的方法。Levin和Bang 发现细菌可引起鲎（Limulus polyphemus）血管内的凝集作用。内毒素启动一个细胞内酶原系统（丝氨酸蛋白酶级
紫外线灭菌相关问题总结
1.紫外线灭菌是用紫外线管照射进行的。波长在220-300纳米的紫外线称为"杀生命区"，其中以260钠米的杀菌力最强。紫外线作用于细胞DNA，使DNA链上相邻的嘧啶碱形成嘧啶二聚体（如胸腺嘧啶二聚体），抑制了DNA复制。另外，空气在紫外线照射下可以产生臭氧，臭氧也有一定的杀菌作用。紫外线透过物质的能
蛋白纯化常见问题总结（二）
3)Sephadex G-25(medium)柱脱盐时，盐浓度太高对柱效有影响吗?若有，一般对盐浓度限度如何?大家别客气，除盐对于浓度应该也是有一定的限制的，同样的样品盐浓度高的自然要比浓度低的要在柱子上走的峰要宽些，相对需要的柱子的分辨率也要高点，但是在正常的范围如1-2M应该影响不大，不过要除得
蛋白纯化常见问题总结（一）
蛋白纯化过程中常遇见一些问题，这里整理了以下几个蛋白纯化实验中遇见的问题及其解决方案。1)我现在手头有个融合蛋白，纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析，之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列，没有问题。细胞破碎后，融合蛋白在沉淀里，我用助
紫外线灭菌相关问题总结
1.紫外线灭菌是用紫外线管照射进行的。波长在220-300纳米的紫外线称为"杀生命区"，其中以260钠米的杀菌力最强。紫外线作用于细胞DNA，使DNA 链上相邻的嘧啶碱形成嘧啶二聚体（如胸腺嘧啶二聚体），抑制了DNA复制。另外，空气在紫外线照射下可以产生臭氧，臭氧也有一定的杀菌作用。紫外线透
引物合成及各种问题总结（2）
1.如何测定引物的OD值？ 用紫外分光光度计在260nm波长测定溶液的吸光度来定量，请注意紫外分光光度计的使用，测定时溶液的吸光度最好稀释到0.2-0.8之间(吸光度太高或太低会有较大的误差)。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后，取部分溶液稀释到1ml并在1ml标准比色皿中测定其吸光度，即为所
免疫荧光常见问题总结
1、问：免疫荧光：用免疫荧光方法做同样的内容，组织切片和培养细胞，两者操作过程中有哪些不同？参考见解：只是固定方法不同，细胞固定用甲醇，切片固定用多聚甲醛，而染色方法是一样的。2、问：近期要做免疫荧光双标，不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤以及注意事项？参考见解：我正在做冰冻组织切片的免疫荧光的双
安捷伦气质联用仪的使用与保存要怎么做
安捷伦气质联用仪以气相色谱作为试样分离、制备的手段，将质谱作为气相色谱的在线检测手段进行定性、定量分析，辅以相应的数据收集与控制系统构建而成的一种色谱-质谱联用技术。 安捷伦气质联用仪的使用与保存： 1、色谱柱使用时应注意说明书中标明的较低和较高温度，不能超过色谱柱的温度上限使用
免疫组化实验防脱片的处理方法
脱片是免疫组织化学中经常遇到的问题(尤其是脑组织冰冻切片)，一般来说脱片主要有以下几种原因：1. 组织固定、脱水、透明不充分2．组织切片过厚3．组织切片有折叠4．过度的热抗原修复(高压、微波、水煮)处理或抗原修复液的pH偏高5．操作过程中，冲洗方法不正确等在实际操作的过程中，除了要注意以上几点之外，
细胞培养用液的配制与消毒以及细胞传代培养与复苏3
三.细胞的复苏细胞复苏的原则－快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。具体操作(1)实验前准备：1.将水浴锅预热至37℃2.用75％酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。3.在超净工作台
关于白细胞的总结
白细胞正常参考值： 白细胞计数 新生儿 婴儿（两周岁内） 成人 白细胞计数 15～20×109/L 11～12×109/L 4～10 ×109/L
原子荧光hg曲线配制问题
问：我今天做hg,发现预热的时间短了的话荧光一直是负的.还有一直曲线配不好,我是自动配置,配了1ppb,然后设置了0.1,0.2,0.5,1.0四个点.后来配置1ppm还是不行.不知道怎么回事.还有荧光老是负值怎么回事 （仪器北京吉天AFS9230的荧光） 答：检查下看元素灯是否打开，光电系统是否
菌种保存常见问题问答汇总
1.菌株保存的是第三代，-80℃保存，再取出来活化的话属于第几代？答：保存的是第三代复活出来后，如果采用平板或肉汤活化相当于转接了一代，就是第四代了，如果还在瓷珠里的话就还是原来的代数。如果是保存在斜面上，这一支斜面一直就是第三代，如果转接到另一支斜面就是第四代了。传代原则，菌株活化复苏不论以任何形
菌种保存常见问题答问汇总
1.菌株保存的是第三代，-80℃保存，再取出来活化的话属于第几代？答：保存的是第三代复活出来后，如果采用平板或肉汤活化相当于转接了一代，就是第四代了，如果还在瓷珠里的话就还是原来的代数。如果是保存在斜面上，这一支斜面一直就是第三代，如果转接到另一支斜面就是第四代了。传代原则，菌株活化复苏不论以任何形
抚生试剂免疫组织化学组织细胞的组织切片
一、载玻片的处理 免疫组化染色时间长，特别是双PAP、免疫金银染色等方法，所需时间更长，并要反复洗涤，切片在试剂中长时间浸泡，经多次洗涤，极易造成脱片而影响实验的结果。需采用以下方法处理：载玻片先置于洗洁液(或洗衣粉溶液)中煮沸30min，清水洗干净后放人清洁液中浸泡12—24h，漂洗，用蒸馏