细胞核与线粒体的分级分离
一、所需试剂及设备小白鼠、冰块、玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管、10ml量筒、25m1烧杯、玻璃漏斗、解剖剪、镊子、吸水纸、纱布、蜡盘、平皿、牙签。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺兰染液、0.02%詹纳斯绿B染液、0.9%NaCl溶液。附:溶液的配制：1/300詹纳斯绿染液：取詹纳斯绿1克，加Riger氏液300ml。现用现配。1/3000中性红染液：称取中性红 (Neutral red)O.1g，加蒸馏水300ml。室温保存.Ringer Solution：NaCl 0.9gKCl 0.042gCaCl2 0.025g蒸馏水 100m10.25mol/L蔗糖一0.003mom/L氯化钙溶液：蔗糖 85.5gCaCl2 0.33g蒸馏水 1000ml二、操作步骤（一）制备肝细胞匀浆将小白鼠用颈椎脱位法处死，迅速......阅读全文
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要通过细胞匀浆和离心的方法分级分离细胞的组分，以了解其原理及过程。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过
细胞核与线粒体的分级分离
一、所需试剂及设备小白鼠、冰块、玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管、10ml量筒、25m1烧杯、玻璃漏斗、解剖剪、镊子、吸水纸、纱布、蜡盘、平皿、牙签。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要掌握细胞核与线粒体的分级分离的实验技术。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究亚细胞成分的化
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究
线粒体的分级分离实验
实验材料 线粒体仪器、耗材 离心机实验步骤 1. 将装有上清液的高速离心管，从装有冰块的烧杯中取出，配平后，以17 000 rpm 离心20分钟，弃上清，留取沉淀物。2. 加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化钙液1 ml，用吸管吹打成悬液，以17 000 rpm 离心20
线粒体的分级分离实验
高速离心法实验材料线粒体 仪器、耗材离心机 实验步骤 1. 将装有上清
细胞核的分级分离实验
实验材料小白鼠试剂、试剂盒蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤1. 用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中，反复
细胞核的分级分离实验
实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材 玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤 1. 用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯
细胞核的分级分离实验
实验材料小白鼠 试剂、试剂盒蔗糖 氯化钙溶液
线粒体的分级分离实验——高速离心法
实验材料线粒体仪器、耗材离心机实验步骤1. 将装有上清液的高速离心管，从装有冰块的烧杯中取出，配平后，以17 000 rpm 离心20分钟，弃上清，留取沉淀物。2. 加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化钙液1 ml，用吸管吹打成悬液，以17 000 rpm 离心20分钟。
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验
实验材料黄化苗 试剂、试剂盒匀浆缓冲液 清洗缓冲液
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验
实验材料黄化苗试剂、试剂盒匀浆缓冲液清洗缓冲液Percoll 梯度溶液仪器、耗材分光光度计实验步骤在选好植物材料和匀浆缓冲液后，接下来关键的因素包括匀浆方法、缓冲液的 pH、使用的缓冲液与植物组织之间的比例、研磨时间及温度等（见注释 5) 。3.1 匀浆根据植物组织的不同可以采取不同的匀浆方法，或者
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验（一）
实验材料 黄化苗试剂、试剂盒 匀浆缓冲液清洗缓冲液Percoll 梯度溶液仪器、耗材 分光光度计实验步骤 在选好植物材料和匀浆缓冲液后，接下来关键的因素包括匀浆方法、缓冲液的 pH、使用的缓冲液与植物组织之间的比例、研磨时间及温度等（见注释 5) 。3.1 匀浆根据植物组织的不同可以采取不同的匀浆方
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验（二）
3.5 纯度鉴定可以通过各种细胞器标志性酶的活性来确定线粒体的污染程度。过氧化物酶体可以鉴定过氧化氢酶、羟基丙酮酸还原酶或者乙二醇氧化酶的活性；叶绿体可以用叶绿素含量，白色体可以用类胡萝卜素的含量或碱性焦磷酸酶的活性；乙二醛循环体可以用异柠檬酸裂解酶的活性；内质网可以用对抗霉素 A 不敏感的细胞
线粒体和细胞核的制备与观察
实验概要本实验介绍了线粒体和细胞核制备的基本原理及操作。对分离得到的细胞核及线粒体进行了活性鉴定，有助于掌握用差速离心技术分离制备动物细胞核及线粒体的方法。实验原理利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异，可采取分级差速离心的方法，将细胞核与线粒体逐级分离出来（差速离心技术）。线粒体是真核细胞
细胞[组分]分级分离的定义
中文名称细胞[组分]分级分离英文名称cell fractionation定 义应用不同的离心技术，将细胞匀浆中的各种细胞器或不同组成成分分离纯化的过程。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
什么是细胞[组分]分级分离？
中文名称细胞[组分]分级分离英文名称cell fractionation定 义应用不同的离心技术，将细胞匀浆中的各种细胞器或不同组成成分分离纯化的过程。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
桥粒的制备实验_分级分离桥粒
实验材料桥粒试剂、试剂盒尿素溶液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 在最终的桥粒沉淀中加 20 ml 尿素溶液，用玻璃/Teflon 匀浆器匀浆，用尿素溶液稀释匀浆物使蛋白质浓度为 0.15 mg/ml，用 1 mol/L 的 Tris-HCl 调节溶液的 pH 值到 9.0 在室温至少搅拌 1 小时。尿
亚细胞结构的分离与鉴定1
细胞由各种亚细胞结构组成。其重要的研究手段之一是分离纯化亚细胞组分，观察它们的结构或进行生化分析。离心技术是实现这一目标的基本手段。一般认为，转速为10～25Kr/min的离心机称为高速离心机；转速超过25Kr/min，离心力大于89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/mi
线粒体基质的线粒体结构
线粒体基质 线粒体基质是线粒体中由线粒体内膜包裹的内部空间，其中含有参与三羧酸循环、脂肪酸氧化、氨基酸降解等生化反应的酶等众多蛋白质，所以较细胞质基质黏稠。苹果酸脱氢酶是线粒体基质的标志酶。线粒体基质中一般还含有线粒体自身的DNA(即线粒体DNA)、RNA和核糖体(即线粒体核糖体)。 线粒体
落地式大容量冷冻离心机分离细胞器和细胞膜概述
在细胞生物学研究中，亚细胞的分级分离是zui基础也是zui关键的步骤。研究细胞和细胞结构成分需要分离特定的膜相系统和细胞器，包括细胞膜、高尔基体、内质网、细胞核、线粒体、溶酶体、过氧化物酶体和细胞骨架等，有时还需要分离高尔基体和内质网分泌的囊泡。 为了进一步研究细胞器的
落地式大容量冷冻离心机分离细胞器和细胞膜概述
在细胞生物学研究中，亚细胞的分级分离是最基础也是最关键的步骤。研究细胞和细胞结构成分需要分离特定的膜相系统和细胞器，包括细胞膜、高尔基体、内质网、细胞核、线粒体、溶酶体、过氧化物酶体和细胞骨架等，有时还需要分离高尔基体和内质网分泌的囊泡。为了进一步研究细胞器的核膜，需要将已分离的细胞器进一步破碎和分
钙调蛋白的粗分级分离实验
试剂、试剂盒 上清固体硫酸铵浓硫酸Tris 碱缓冲液 B仪器、耗材 聚丙烯烧杯磁力搅拌器与搅拌子聚碳酸酯离心管超速离心机带刻度的聚丙烯量筒粗棉布聚丙烯漏斗橡皮淀帚 刮勺透析袋实验步骤 材料与设备上清，得自实验 2(约 700~1000 ml)固体硫酸铵聚丙烯烧杯（2x4000-ml)磁力搅拌器与搅拌
钙调蛋白的粗分级分离实验
钙调蛋白的粗分级分离实验 试剂、试剂盒 上清 固体硫酸铵 浓硫酸 Tris
钙调蛋白的粗分级分离实验
为纯化钙调蛋白，对平滑肌组织提取物的粗分级分离采取了两步不同的操作：硫酸铵沉淀和等电点沉淀。这两步操作利用了钙调蛋白的两个不同的性质，即它在中性以上 pH 条件下的高溶解度和它的酸性等电点。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。试剂、试剂盒上清固体硫酸铵浓硫酸Tris 碱缓冲液 B仪器
细胞核提取
HeLa Cell Nuclei Preparation (John Garland)Prepare nuclear extract from HeLa cell · Extract Preparation (Brent Graveley)Preparation of nuclea
细胞核概述
细胞核（nucleus）是遗传信息的载体，细胞的调节中心，其形态随细胞所处的周期阶段而异，通常以间期核为准。 细胞核外被核膜。核膜由内外二层各厚约3nm的单位膜构成，中间为2～5nm宽的间隙（核周隙）；核膜上有直径约50nm的微孔，作为核浆与胞浆间交通的孔道，其数目因细胞类型和功能而异，多者可
细胞核连缀分析实验_体外细胞核连缀反应
实验材料组织试剂、试剂盒EDTASDS蛋白酶 K仪器、耗材玻璃试管实验步骤1. 融解从 1 g 组织或 5 瓶培养皿细胞制备、冻存于 NSB 中的细胞核。1000 g 离心 5 分钟，去上清，用 200 μl HRB 轻轻吹打重悬。2. 将悬液转至一个带有抗酚螺帽的硅化玻璃试管，37℃ 水浴 5 到