细胞生长检测方法:碱性磷酸酶检测法(AKP法)

1、按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间,用PBS洗去死亡细胞,洗两次。2、向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液(0.2mol/L 硼酸,1mmol/L MgCl2 ,1.2mmol/L甲伞基磷酸)。在37℃ 5% CO2 的饱和水汽CO2 培养箱中培养3小时。3、在荧光计数仪上测定荧光的量。根据测定已知不同数目细胞的荧光量作出标准曲线,根据标准曲线可得到各孔中的活细胞数。......阅读全文

肝功能受损的诊断及鉴别

  诊断  第一步 判断是否为肝功能损害  肝脏受到损害必然会导致肝功能异常,但是目前存在的问题是,现有的肝功能试验,包括酶学和其他生化检查,并非都能够准确反映肝脏功能,有些试验的特异性也不强。比如大家最熟悉的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬氨酸氨基转移酶(AST)并不是肝脏组织内完全独特的酶,其还

非标记抗体免疫酶组织化学实验——酶桥法

由于在酶标记抗体过程中,酶与抗体的结合可损害部分抗体和酶的活性,从而降低了抗体的效价。另外,血清中的非特异性抗体也可以被酶标记,这些非特异酶标记抗体与组织中相应抗原结合,放大了非特异背景染色。为了避免酶标记抗体法的上述缺点,Sternberger(1969)在酶标抗体法的基础上,创建了非标记抗体免疫

同时性多中心骨肉瘤病例报告

多中心骨肉瘤,又称多灶性骨肉瘤、多发性骨肉瘤(MOS)。与常见的单灶性骨肉瘤不同,该病发生时,全身骨骼即出现多处病灶,不伴或极少伴有肺转移,该病较为罕见,约占骨肉瘤病例的1%~10%。Amstutz将MOS分为以下三型:Ⅰ型:年龄≤18岁,多发病灶出现间隔18岁12例;其中全身病灶达到5个以上的患者

关于胚胎干细胞的研究进展—灵长类和人类ES细胞的介绍

  Thomson等从恒河猴囊胚分离并建立了一个ES细胞系(R278.5),并证明该细胞系持续培养一年仍能维持未分化状态和正常的XY核型,表达细胞表面抗原标记AKP、SSEA-3(stage-specific embryonic antigen-3)、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81

bradford法和lowry法是什么法

  bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。  bradford法,也称考马斯蓝染色法(coomassie blue staining)。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在

bradford法和lowry法是什么法

  bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。  bradford法,也称考马斯蓝染色法(coomassie blue staining)。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在

关于法特壶腹癌的鉴别-诊断介绍

  由于本病有上腹闷胀不适、黄疸,有时并发胆道感染、血清淀粉酶升高,可误诊为胆管结石,但根据反复发作史、夏科氏三联征、波动性黄疸、影像学检查可加以区别。少数可误诊为传染性肝炎,可根据壶腹癌时AKP升高、转氨酶与血清胆红素发展不平行作出鉴别。也有误诊为胆管癌、肝癌的,可根据影像学胆管癌之胆管呈偏心性狭

毛细胞白血病实验诊断的实验室检查介绍

  1.血象  (1)大多数患者有全血细胞减少,也可仅表现为两系或一系细胞减少,单核细胞减少是其特征之一,可出现中性粒细胞缺乏或白细胞计数明显增高。外周血中可见毛细胞。  (2)患者还可见血清碱性磷酸酶(AKP)水平升高,多数患者的白细胞AKP积分升高。  2.骨髓象  多数患者有骨髓浸润,根据毛细

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含

肝功能检查的正常值

  下面是肝功能各项检查指标的正常值:  一、血清总蛋白TP60-80g/L;白蛋白A35-55g/L;球蛋白G20-30g/L。  二、谷丙转氨酶ALT5-40u/L;谷草转氨酶AST5-40u/L;γ-谷氨酰转肽酶γ-GT5-54u/L;乳酸脱氢酶LDH109-300u/L(速率法);碱性磷酸酶

碱性磷酸酶(alkaline-phosphatase,-ALP)的分离与纯化

一、实验目的1.掌握酶分离纯化的一般步骤及相关原理;2.悉碱性磷酸酶的分离纯化的方法步骤。二、实验原理有机溶剂分级沉淀是分离蛋白质的常用方法之一。有机溶剂能使许多溶于水的酌生物大分子发生沉淀,其主要作用是降低水溶液的介电常数。例如20℃时水的介电常数为80,82%的乙醇溶液的介电常数为40。溶液的介

甲旁亢性心肌病的诊断介绍

  主要根据临床表现和实验室检查。若有血钙过高,血磷过低,血清AKP增高,肾小管磷回吸收率下降,血清免疫活性甲状旁腺激素(PTH)增高等实验室证据,结合临床表现可以诊断。B超及放射性核素扫描有助于寻找病因。

使用枸橼酸莫沙必利片的不良反应

  1、用法用量  口服,一次1片,一日3次,饭前服用。  2、不良反应   主要表现为腹泻、腹痛、口干、皮疹及倦怠、头晕等。偶见嗜酸性粒细胞增多、甘油三酯升高及谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、碱性磷酸酶(AKP)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)升高。

原位杂交组织化学杂交前处理

杂交前处理的目的在于提高组织通透性。增加靶核酸的可及性以及防止RNA或DNA探针与组织细胞或载玻片之间的非特异性结合,从而增强杂交信号,降低背景。杂交前处理的具体方法和步骤因所采用的固定剂、组织标本以及探针不同而异。用温和的非交联固定剂固定的细胞培养标本和冰冻切片,不需经特殊的杂交前处理,一般均能获

SABC法亲和素与生物素系统的操作流程

实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含

解剖功能综合征的并发症及实验室检查

  解剖功能综合征的并发症  1.并发胆管炎的患者可有典型的腹痛、黄疸、高热寒战三联征。  2.并发胆总管结石/十二指肠乳头炎/狭窄可以有胆总管增宽。  3.多数患者有轻度黄疸。  实验室检查  肝功能异常,如血清胆红素、AST、AKP升高。

沉淀法、过滤法、蒸馏法的区别

一沉淀法:固液分离。有时为了加速沉淀,可以加入一些凝聚剂,如明矾、活性炭等。二过滤法:固液分离。但是固体必须是不溶于水的才行。三蒸馏法:液液分离。利用沸点不同,沸点低的先蒸馏出来,沸点高的后蒸馏出来。

关于原发性胆汁性肝硬化的检查介绍

  1.实验室检查  血脂、血清胆酸,结合胆红素,AKP及GGT等微胆管酶明显升高,转氮酶正常或轻、中度增高。血中抗线粒体抗体阳性,IgM升高,凝血酶原时间延长。尿胆红素阳性,尿胆原正常或减少。  2.影像学  超声波、ERCP、CT、PTC等了解有无肝内外胆管扩张及引起肝外梗阻性黄疸的疾病。

关于甲旁亢性心肌病的实验室检查介绍

  一、并发症  甲状旁腺功能亢进可以出现高血压、心绞痛、心律失常、肾功能衰竭、心力衰竭等并发症。  二、实验室检查  1.高血钙伴低血磷是甲旁亢诊断的最重要依据之一。多次测定血钙值>2.5mmol/L;血磷低。  2.血清AKP增高,肾小管磷回吸收率下降,血清免疫活性甲状旁腺激素(PTH)增高。

关于骨质软化的实验室检查介绍

  (1)血钙、磷:佝偻病和骨质软化症由于病因和程度不同及有无继发甲旁亢,其血钙、磷可有以下六种变化:  ①血钙降低、血磷正常或偏低,如轻度营养性维生素D缺乏性佝偻病等。  ②血钙正常或偏低、血磷明显降低,如X连锁低磷血症,肾小管和肿瘤性骨软化症等。  ③血钙、磷均明显减低,如维生素D依赖性佝偻病Ⅰ

关于骨质软化症的实验室检查介绍

  (1)血钙、磷:佝偻病和骨质软化症由于病因和程度不同及有无继发甲旁亢,其血钙、磷可有以下六种变化:  ①血钙降低、血磷正常或偏低,如轻度营养性维生素D缺乏性佝偻病等。  ②血钙正常或偏低、血磷明显降低,如X连锁低磷血症,肾小管和肿瘤性骨软化症等。  ③血钙、磷均明显减低,如维生素D依赖性佝偻病Ⅰ

免疫碱性磷酸酶组织化学实验

实验方法原理 此方法的基本原理与 HRP-抗体间接法类似,所不同的是用 AKP 代替 HRP 标记第二抗体,将其制备成酶标记抗体。实验材料 石蜡切片动物血清试剂、试剂盒 蛋白酶特异性一抗核固红二甲苯乙醇树胶PBSAKP 标记的二抗TBS(含左旋咪唑、MgCl2)仪器、耗材 滴管玻片湿盒实验步骤 1.

内标法与外标法

一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被

外标法与内标法

  一、内标法  什么叫内标法?怎样选择内标物?  内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。  内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质

Folin—酚试剂法(Lowry法)

实验概要本文介绍了Folin—酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Fol

气相法液相法固相法优缺点

气相法液相法固相法优点:分离效率高,分析速度快,样品用量少和检测灵敏度高。选择性好,可分离、分析恒沸混合物,沸点相近的物质,某些同位素,顺式与反式异构体邻、间、对位异构体,旋光异构体等。气相法液相法固相法缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。检测器气相色谱法中可以使

可见异物检查法第一法(灯检法)

取规定量供试品,除去容器标签,擦净容器外壁,必要时将药液转移至洁净透明的适宜容器内,将供试品置遮光板边缘处,在明视距离(指供试品至人眼的清晰观测距离,通常为25cm),手持容器颈部,轻轻旋转和翻转容器(但应避免产生气泡),使药液中可能存在的可见异物悬浮,分别在黑色和白色背景下目视检查,重复观察,总检

色谱定量方法:标准加入法内标法外标法

  色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是:组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了。  以内标法为例,选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组

峰面积归一法、内标法、外标法区别

色谱定量分析方法可以分为外标法、内标法、归一化法三大类。当能够精确进样量的时候,通常采用外标法进行定量。这种方法标准物质单独进样分析,从而确定待测组分的校正因子;实际样品进样分析后依据此校正因子对待测组分色谱峰进行计算得出含量。其特点是标准物质和未知样品分开进样,虽然看上去是二次进样,但实际上未知样

各显神通!浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法

  面积归一法、内标法、外标法、标准加入法。这么多定量法,用哪一种呢?每一种的适用范围是什么呢?其优缺点又是什么?其标准物又有什么要求呢?看完你就都知道了。  1、归一化法  把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法,各成分校正因子一致时可用该法。  归一化法的优点:  该法简便