线粒体的活体染色及电镜照片观察

【实验目的】掌握一种活体染色方法,了解光学显微镜和电子显微镜下线粒体基本形态结构。【实验用品】一、材料和标本兔子一只、线粒体的电镜照片。二、器材和仪器显微镜、手术器材一套、解剖盘、小平皿、载片、盖片、吸水纸、10ml注射器、吸管。三、试剂l/300 詹纳斯绿B 染液、Ringer 氏液(哺乳类用)。【实验内容】一、兔肝细胞线粒体的活体染色(一)原理线粒体是细胞内一种重要细胞器,是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量,主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿B 是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。(二)方法用空气栓塞处死兔子,置于解剖盘内,迅速打开腹腔,取兔肝边缘较薄的肝组织一小块(2~3mm3),放入盛有Ringer 氏......阅读全文

皮肤表面细菌“化身”活体疫苗

想象一下,有一款新型疫苗,接种时不需要用针扎进肌肉注射,只需在皮肤上涂抹一种乳膏,使用起来毫无痛感,不会引起发热、肿胀、发红或手臂疼痛。人们无需排队等待接种,而且其价格低廉。据最新一期《自然》杂志报道,得益于美国斯坦福大学医学院研究人员对存在于人体皮肤上一种常见细菌的改进,这一愿景有望成为现实。斯坦

活体电穿孔法介绍1

1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~1

精诺真活体成像系统

1、【仪器名称】:精诺真活体成像系统。 2、【仪器型号】:IVIS 200。 3、【生产厂家】:美国精诺真(Xenogen,Inc.)公司(龙脉得生物技术有限公司代理)。 4、【检测适用范围】:用于提供LPTA动物模型靶基因在体内的实时表达和对候选药物的准确反应,还可以用来评估候选药物和其他化

要不要动物活体实验

  我在带学生做动物实验.每个纲都有一种代表动物.虽然是老师,但我的心中很沉重.由于人类自身的需要,有时候不得不利用动物做活体实验或活体解剖.从某个角度来说,这是残忍的,但是为了人类自身,不得不做.一番悲天悯人后,不得不承认,人类的医学、药物学和生物学等诸多学科的发展离不开活体实验.这个残酷的现实似

活体器官再生:小鼠胸腺重建

      爱丁堡大学的一个科学家小组首次成功实现活体器官再生。   科学家们对小白鼠胸腺进行重建。胸腺是位于心脏旁边的器官,功能是产生重要的免疫细胞。   免疫修复   此次研究将为免疫系统功能受损以及影响胸腺发育的遗传疾病的治疗开辟新的途径。   该小组重新激活了一个老龄鼠因年老而关闭的

活体GFP绿色荧光成像系统

  系统提供动物活体绿色荧光蛋白的实时观察与成像等一系列的荧光检测。能够应用在像深度肿瘤,大动物等活体肿瘤追踪观察成像研究。    该设备是一个高灵敏度的图像成像工作系统,主要利用特定波长的激光进行激发后,通过高灵敏度的致冷CCD进行实时检测后,获得所需的各类 特性的图像,有利于进一步的分析作用 。

活体电穿孔法介绍3

肝 脏由于肝脏的生理代谢十分旺盛,因此外源基因在肝脏中的表达时间往往很短暂,而且表达产物的水平也较低。为减少出血,可从小静脉注入,然后在肝脏上施加电场,能显著增强基因的表达。睾 丸相对于其他的转基因方法,活体电穿孔法可使外源基因在睾丸中产生大量和持久的表达。此外,很多研究人员希望利用活体电穿孔法将外

Nature:活体实时追踪干细胞

  来自耶鲁医学院的研究人员首次在未受损伤的动物体内观察和操纵了组织再生过程中干细胞的行为。相关论文发布在7月1日的《自然》(Nature)杂志上。   组织发育与再生依赖于细胞与细胞间的相互作用和靶向干细胞及直系后代的信号。然而,目前对于导致适当组织再生的细胞行为还不是很理解。   在这篇文章

小动物活体成像技术

1、背景和原理1999年,美国哈佛大学Weissleder等人提出了分子影像学(molecular imaging)的概念——应用影像学方法,对活体状态下的生物过程进行细胞和分子水平的定性和定量研究。传统成像大多依赖于肉眼可见的身体、生理和代谢过程在疾病状态下的变化,而不是了解疾病的特异性分子事件。

小动物活体成像原理

体动物体内光学成像主要采用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶基因(Luciferase)标记细胞或 DNA,而荧光技术则采用绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白等荧光报告基因和 FITC、Cy5、Cy7 等荧光素及量子点 (quantumdot,QD) 进行标记。小动物活体成像技术是采用高灵敏度制冷

活体电穿孔法介绍(二)

电 压电穿孔时在能量导入一定的情况下设计施加电压的值。电压过低或过高都会影响外源基因的表达。电压过低时,无法造成细胞膜表面状态的改变,因而外源D不能进入细胞内。电压过高时,局部组织积聚过多热量,造成细胞的死亡或组织失去功能,即使外源基因导入细胞,也无法进行正常的表达。哺乳动物常用的活体电压大多为20

活体电穿孔法介绍(一)

1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~1

微透析活体取样技术介绍

一. 微透析技术的基本原理和方法    微透析(Microdialysis)技 术是从上世纪八十年代发展起来的一种微量生物化学采样、检测技术,其基本原理是采用具有一定截留分子量的纤维半透膜制成极细的微透析探头(Microdialysis Probe,MDP),将探头埋入待测的组织区域内,

-Nature:iPS细胞的活体生成

  Manuel Serrano 及同事首次发现,体细胞被经典“Yamanaka因子”Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc重新编程为具有多能性的过程可以在活体中实现。对从小鼠的胃、小肠、胰腺和肾脏细胞在活体中诱导生成的“诱导多能干”(iPS) 细胞所做分析显示,它们比在体外生成的iPS细

活体荧光成像系统介绍(一)

一、  技术简介活体生物荧光成像技术(in vivo bioluminescence imaging)是近年来发展起来的一项分子、基因表达的分析检测系统。它由敏感的CCD及其分析软件和作为报告子的荧光素酶(luciferase)以及荧光素(luciferin)组成。利用灵敏的检测方法,让研究人员

活体成像技术原理及应用

  活体成像技术主要是利用一套非常灵敏的光学检测仪器,能够直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。通过这个系统,可以观测活体动物体内肿瘤的生长及转移,感染性疾病发展过程、特定基因的表达等生物学过程。其优点为较传统屠宰动物相比,该技术能够对同一种实验对象在不同时间点进行记录,跟踪同一观察目标(标记细

活体流式细胞仪

活体流式细胞仪(In vivo Flow Cytometer, IVFC)是一种新的生物医学光学仪器,结合活体(近红外)实时高速影像方法和体外流式细胞仪的概念,可实时检测活体CTC并可以进行定量分析与检/监测,可用于实验室对肿瘤治疗效果的早期实时监测及评估,药物的早期筛选等。IVFC技术原理是:带有

精诺真活体成像系统

1、【仪器名称】:精诺真活体成像系统。2、【仪器型号】:IVIS 200。3、【生产厂家】:美国精诺真(Xenogen,Inc.)公司(龙脉得生物技术有限公司代理)。4、【检测适用范围】:用于提供LPTA动物模型靶基因在体内的实时表达和对候选药物的准确反应,还可以用来评估候选药物和其他化合物的毒性。

活体电穿孔法介绍2

电 压电穿孔时在能量导入一定的情况下设计施加电压的值。电压过低或过高都会影响外源基因的表达。电压过低时,无法造成细胞膜表面状态的改变,因而外源D 不能进入细胞内。电压过高时,局部组织积聚过多热量,造成细胞的死亡或组织失去功能,即使外源基因导入细胞,也无法进行正常的表达。哺乳动物常用的活体电压大多

小动物活体成像原理

体动物体内光学成像主要采用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶基因(Luciferase)标记细胞或 DNA,而荧光技术则采用绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白等荧光报告基因和 FITC、Cy5、Cy7 等荧光素及量子点 (quantumdot,QD) 进行标记。小动物活体成像技术是采用高灵敏度制冷

活体成像——APIR-MALDI/LAESI技术

了解细胞的内部成分是理解健康细胞不同于病变细胞的关键,但是,直到目前为止,唯一的方法是观察单个细胞的内部,然后将其从动物或植物中移除,或者改变细胞的生存环境。但是这么做的话,会使细胞发生变化。科学家还不是很清楚一个细胞在病变时与健康细胞的差别,或者当它们从一个环境移到另一个环境中产生的变化。来自华盛

活体荧光成像系统介绍(二)

五、生产厂家1.美国KODAKImage Station In-Vivo FX多功能活体成像系统1.1简介:该系统采用了Kodak公司科研级的超高灵敏度4百万象素冷CCD,高安全标准的X-光模块,以及ZL的放射性同位素磷屏等技术,实现了化学发光、全波长范围荧光、放射性同位素以及X-光等的多功能检测功

细胞荧光化学实验

荧光法较一般光学方法具有灵敏度高、特异性强、方法简便等优点,因此近年来荧光组织化学特别是免疫荧光技术有了很大的发展。利用荧光技术可研究细胞内化学成分的分布与定位,研究细胞与组织中物质的吸收与转运,进行病理鉴别以及细胞免疫等方面的研究。 当用一种波长的光(如紫外光)照射某种物质时,这种物质会在极短的时

活体叶面积仪在蔬菜作物叶面积活体测算中的应用

    以往,叶面积的测算方法大多需离体测量,对植株伤害大,影响产量和品质指标,且不宜作连续性动态调查。而现在应用活体叶面积仪进行测算则可以完美解决这个问题。    叶片是蔬菜作物制造营养物质的器官, 光合面积的多少、叶片的分布及光合效能的高低是产量形成的基础,有的蔬菜作物其叶片本身就是产品器官。因

活体光学成像技术之光学活体成像前动物脱毛的必要性

在上几期的文章中,我们分别介绍了荧光成像与生物发光成像的比较、荧光蛋白、荧光染料的挑选方法。当大家选择了合适的标记方法并建立成像模型(药物注射、肿瘤注射等)后,需要对实验动物进行活体成像观察。在成像前,对实验动物进行完全脱毛是非常重要的步骤,直接关系能否获得高质量的成像数据。今天将为大家详细介绍成像

Science:干细胞维持“干”性的秘诀

  Whitehead研究所的科学家们发现,干细胞在分裂的时候能够区分衰老和年轻的线粒体,并将它们不对称的分配给子细胞。继续保持“干”性的子细胞主要分到年轻的线粒体,而分化的子细胞主要分到衰老的线粒体。这项研究发表在本周的Science杂志上。  这种细胞内容物的不对称分配,可能是干细胞防止损伤累积

差速离心分离植物(动物)细胞核

线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来。(差速离心技术)线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆,在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中(选用离心机的一定转

植物(动物)细胞核差速离心分离

线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来。(差速离心技术)线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆,在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中(选用离心机的一定转

差速离心分离植物(动物)细胞核

线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异,可采取分级差速离心的方法,将细胞核与线粒体逐级分离出来。(差速离心技术)线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆,在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中(选用离心机的一定转

线粒体翻译损伤通过激活线粒体UPR延长线虫寿命

近日,《氧化还原生物学》(Redox Biology)在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心研究员周小龙研究组与中国科学院生物物理研究所研究员陈畅研究组的合作研究成果Mitochondrial translational defect extends lifespan in C. elegan