液相常见问题10小问
1 如何进行色谱柱的维护？ ①建议检测前样品和流动相进行过滤。 ②建议每天做完样品后及时进行清洗。 ③常规检测 测试完后直接把色谱柱反向连接采用90%有机相冲洗45min，最后保存在纯甲醇或纯乙腈中。 ④使用缓冲盐条件： a等度条件：使用缓冲盐之前和之后都用过渡流动相以1ml/min流速冲洗45min。 b梯度条件：使用缓冲盐之前与初始流动相组成相同的过渡流动相以1ml/min流速冲洗45min。 注意：过渡流动相是指有机相和水相比例与分析流动相相同比例，只是不含有缓冲盐。 c缓冲盐冲洗干净后，采用90%有机相反向冲洗60min，最后保存在纯有机溶剂中。 注意：如果使用缓冲液不能存留色谱柱中过夜。 2 氨基柱在进酸性样品时，很伤柱子，如使用一段时间后，柱效降低，峰形改变，如何恢复？ 答：用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0％NH3的乙腈-水(50:50......阅读全文
液相常见问题10小问
1 如何进行色谱柱的维护？ ①建议检测前样品和流动相进行过滤。 ②建议每天做完样品后及时进行清洗。 ③常规检测 测试完后直接把色谱柱反向连接采用90%有机相冲洗45min，最后保存在纯甲醇或纯乙腈中。 ④使用缓冲盐条件： a等度条件：使用缓冲盐之前和之后都用过
液相常见问题10小问
1 如何进行色谱柱的维护？ ①建议检测前样品和流动相进行过滤。 ②建议每天做完样品后及时进行清洗。 ③常规检测 测试完后直接把色谱柱反向连接采用90%有机相冲洗45min，最后保存在纯甲醇或纯乙腈中。 ④使用缓冲盐条件： a等度条件：使用缓冲盐之前和之后都用过渡流动相以1ml/min流速冲洗45
液相常见问题15小问！
关于漂移问题①温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定②流动相发生変化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等③柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡 关于快速变化问题①流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定②泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。③流动相不合适,解決办法为改
液相色谱小知识
高效液相经常使用粒径5um 的色谱柱，用过一段时间后，柱压会略有升高，尤其是做中药。常用来洗色谱柱的溶剂为甲醇，当色谱柱用甲醇洗过之后，再用含乙腈的流动相平衡，会使柱压迅速升高，色谱柱滴漏，这是由于甲醇和乙腈汇合产生局部高压。因此，这种情况下，应慢慢升高流速，可以从0.6ml/min开始，一步步的平
高压液相色谱常见问题
（一）涡流扩散（Eddy diffusion）流动相碰到较大的固体颗粒，就像流水碰到石头一样产生涡流。如果柱装填得不均匀，有的部分松散或有细沟，则流动相的速度就快；有的部位结块或装直紧密则流就慢，多条流路有快有慢，就使区带变宽。因此，固相载体的颗粒要小而均匀，装柱要松紧均一，这样涡流扩散小，
高效液相色谱（HPLC）常见问题
1、HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法样品量不足：解决办法为增加样品量样品未从柱子中流出：可根据样品的化学性质改变流动相或柱子样品与检测器不匹配：根据样品化学性质调整波长或改换检测器检测器衰减太多：调整衰减即可。检测器时间常数太大：解决办法为降低时间参数检测器池窗污染：解决办法为清洗池窗。检测池
高效液相色谱（HPLC）常见问题
1、HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 样品量不足：解决办法为增加样品量样品未从柱子中流出：可根据样品的化学性质改变流动相或柱子样品与检测器不匹配：根据样品化学性质调整波长或改换检测器检测器衰减太多：调整衰减即可。检测器时间常数太大：解决办法为降低时间参数检测器池窗污染：解决办法为清洗池窗。检测
液相色谱小概率故障如何排除？
【1】泵压跳动，跳动范围10bar左右。解决方法：1、原先小白头有点脏，更换后尚未解决；2、将主动阀上的阀芯取出后，发现有类似气泡存在，浸入甲醇-水溶液超声5min，以试着去除气泡，重新将其安装后再观察，仍未解决；3、更换新的阀芯，将其安装后，不再有跳动，观察一段时间后比较平稳，成功解决。【2】发生
如何应对液相色谱的小情绪？
方便快捷的分析过程固然重要，但是为了多做样品而忽略了一些必不可少的步骤，往往得不偿失。哪些操作不能做？哪些懒儿不能偷？那些小概率的故障师傅没教怎么办？液相使用过程中有哪四大关键因素要注意？流动相不过滤 因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体微
心衰与－BNP－临床－10－问
利钠肽是一个庞大的家族，包括 ANP、BNP、CNP、DNP、VNP 等多种成员，因其利钠、利尿作用而和心衰发生了千丝万缕的联系，尤以 BNP 最为著名。BNP 最初从猪脑内提取而来，曾称为脑钠肽，现规范称为 B 型利钠肽。 BNP 阴性排除心衰价值极高，BNP 明显升高，尤其伴有动态变化
液相色谱常见问题及处理办法
一、问：用HPLC进行分析时，保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？关于漂移问题：1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。关于快速变化问题：1． 流速发
液相色谱常见问题及处理办法
问:用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？答:关于漂移问题：1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡 关于快速变化问题 1． 流速发生变化
液相色谱常见问题及处理办法
一、问：用HPLC进行分析时，保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在？如何解决？ 关于漂移问题： 1． 温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定。 2． 流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等。 3． 柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡。 关于快速变化问题：
液相色谱常见问题及处理方法
HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法 1、样品量不足，解决办法为增加样品量 2、样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子 3、样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器 4、检测器衰减太多。调整衰减即可。 5、检测器时间常数太大。解决办法为降低时间
气相色谱的日常维护的10个小妙招
购买一套了气相色谱仪价格不菲，都希望使用时间能长一些，所以日常的维护和良好的使用习惯可是必不可少的，这也可以让气相色谱仪器工作正常而且能保持好的检测效果，今天小编就给大家总结10个日常维护小妙招，抛砖引玉，仅供大家日常使用的参考。 一、按仪器使用说明书的规程操作 这一点主要是针对新购置和安
气相色谱的日常维护的10个小妙招
购买一套了气相色谱仪价格不菲，都希望使用时间能长一些，所以日常的维护和良好的使用习惯可是必不可少的，这也可以让气相色谱仪器工作正常而且能保持好的检测效果，今天小编就给大家总结10个日常维护小妙招，抛砖引玉，仅供大家日常使用的参考。一、按仪器使用说明书的规程操作这一点主要是针对新购置和安装的仪器，不仅
液相色谱样品预处理的常见问题
1、色谱图中出现无关的峰，原因有可能是样品过滤器带来污染，解决方法如下： （1）将过滤器浸泡在样品溶剂中并进样试验； （2）改变过滤器类型； （3）采用交替清洗技术； 2、一些或全部化合物的峰比预期的小，尤其是低浓度的样品，原因可能是样品过滤器表面吸附下降，解决方法如下： （1）改变过
液相色谱柱的维护的8“小”误区
1.色谱柱的流向不能改变 在我们常规思维中，色谱柱上标示的流向是不可改变的，每次使用都要遵循。可是，大家有没有想过这个方向的作用是什么呢？为什么要标示一个使用方向呢？ 其实色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那么这个流入段就
液相色谱柱的维护的8“小”误区
关于标示： 1.色谱柱的流向不能改变 在我们常规思维中，色谱柱上标示的流向是不可改变的，每次使用都要遵循。可是，大家有没有想过这个方向的作用是什么呢？为什么要标示一个使用方向呢？ 其实色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那
液相色谱柱的维护的8“小”误区
大家使用的液相色谱柱最多的就是C18了，我在这里讨论的也就是这个类型的。由于使用液相很久了，听了大家的很多讨论，也咨询过很多厂家工程师，同时也听过一些讲座，于是把这个方面的知识总结了一下。也许你对这些知识很熟悉了，在平时就这么做的，但对于刚接触色谱柱的朋友也许有点小帮助。好了，进入正文。 关于标示：
液相色谱柱的维护的8“小”误区
关于标示： 1.色谱柱的流向不能改变 在我们常规思维中，色谱柱上标示的流向是不可改变的，每次使用都要遵循。可是，大家有没有想过这个方向的作用是什么呢？为什么要标示一个使用方向呢？ 其实色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那么这
液相色谱柱的维护的8“小”误区
液相色谱柱价格很合理，液相色谱柱的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸
液相色谱柱的维护的8“小”误区
关于标示： 1.色谱柱的流向不能改变 在我们常规思维中，色谱柱上标示的流向是不可改变的，每次使用都要遵循。可是，大家有没有想过这个方向的作用是什么呢？为什么要标示一个使用方向呢？ 其实色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那么这
液相色谱柱常见问题及解决方案
1.液相色谱柱柱压高 压力单位换算：1bar＝0.987大气压＝14.503psi＝0.1MPa＝1.0197kg/cm2 （1）新柱（未进过样品或只进过柱效测试标样）压力高： 以原厂报告上完全一样的条件下测试比较，若压力在报告压力值上下浮动200-300psi以内，可视为正常范围；若高于出
液相色谱柱使用中常见问题解析
1、对于一根常用的C18柱，拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护？为什么要这样做？ 答：新柱活化，实际上是一个平衡的过程，除了用流动相平衡外，有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡，特别是测定分子量比较高的多肽，尤其重要。因为分子量高的物质分子，扩散速度慢，平衡所需时间也相应较长。具体平衡方
液相色谱柱使用中常见问题解析
1、对于一根常用的C18柱，拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护？为什么要这样做？ 答：新柱活化，实际上是一个平衡的过程，除了用流动相平衡外，有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡，特别是测定分子量比较高的多肽，尤其重要。因为分子量高的物质分子，扩散速度慢，平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式
液相色谱谱图常见问题解析汇总
你在液相色谱使用过程中是不是会遇到各种各样的问题，别担心，本文针对色谱图的异常问题进行了整理，并给出解决方法，供大家参考。一个峰或几个峰是负峰解决方法：流动相吸收本底高；进样过程中进入空气；样品组分的吸收低于流动相。 所有峰均为负峰解决方法：信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒；光学装置尚未达到平衡
液相色谱前沿峰和拖尾峰常见问题分析
前沿峰 1.柱温低--－不明白 2.样品溶剂使用不当----－当样品溶剂的洗脱能力大大强于流动相时会出现前沿峰。例如，在反相色谱中用已腈做样品溶剂，而流动相的洗脱力较弱时会出现前沿峰。 3.柱过载--------超载，未被保留的样品在正常出峰时间前陆续出来，形成前沿峰 4.在大
液相色谱柱常见问题及解决方案
1.液相色谱柱柱压高 压力单位换算：1bar＝0.987大气压＝14.503psi＝0.1MPa＝1.0197kg/cm2 （1）新柱（未进过样品或只进过柱效测试标样）压力高： 以原厂报告上完全一样的条件下测试比较，若压力在报告压力值上下浮动200-300psi以内，可视为正常范围；若高于出
液相色谱柱使用中常见问题解析
1、对于一根常用的C18柱，拿到一根新柱的时候应该怎样进行活化及维护？为什么要这样做？ 答：新柱活化，实际上是一个平衡的过程，除了用流动相平衡外，有时候还必须用所测样品对新柱进行平衡，特别是测定分子量比较高的多肽，尤其重要。因为分子量高的物质分子，扩散速度慢，平衡所需时间也相应较长。具体平衡方式也