创新参选:从酵母中提取gDNA的方法改进

2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。 生物通将会陆续公布一些项目,以便大家分享这些创新技术。同时为了感谢这些分享实验技巧的参选者,生物通也准备了一些精美礼品寄出,同时近期我们还将进行抽奖,以飨读者。 参选项目:从酵母中提取gDNA的方法改进 背景: 细胞壁是快速裂解酵母细胞的主要障碍。从酵母细胞中制备gDNA的传统方法包括使用破壁酶和玻璃珠,之后通过去垢剂裂解细胞,并利用酚-氯仿提取gDNA。在分析大量样品时,这些方法相当耗时,也相对较贵。 在快速分析时,也可以通过反复冻融裂解细胞。尽管这种方法相对较快,但是在氯仿抽提之后需要将样品转移至新的管中,这对于大量样品的同时抽提就不太方便。另外,还有一种更为简单的SDS处理方法。不过,似乎产量较低,结果重复性不太......阅读全文

创新参选:从酵母中提取gDNA的方法改进

  2012实验室创新技术大奖”评选活动开展以来,生物通已经陆陆续续收到不少项目,这些项目中有的能减少实验步骤,有的能降低实验成本,还有一些改进了实验设备,让我们的实验过程更加轻松。   生物通将会陆续公布一些项目,以便大家分享这些创新技术。同时为了感谢这些分享实验技巧的参选者,生物通也准备了一些

酵母蛋白的提取方法

1 准备SD/-Leu或是YPD 培养基20ml,酵母过夜培养,30℃,230rpm。2 测OD600 约1.0。3 100ml过夜培养物,1000g,离心,5min,4℃。4 弃上清,重悬于80ul抽提buffer:0.1M Tris-Cl(PH7.5),0.2M NaCl,0.01Mβ-ME,2

从酵母中提取精氨酸的实验步骤

1、原料酸水解1kg原料加2.3升的浓盐酸回流水解24小时;减压蒸发掉盐酸后加3升的水,过滤除渣后用氢氧化钠中和到中性(刚果红)。搅拌中加入含300克的1-萘酚-2,4-二硝基-7-磺酸的1500毫升水溶液,在继续搅拌1小时。将容器在冰箱中放置几天待产物充分沉淀出来。过滤得到沉淀后用冰水洗涤沉淀物直

高通量组织gDNA提取实践手册

Part 1 —— 前 言 | 组织gDNA提取和纯化是分子生物学的基本实验技术,其原理和操作绝大数生物学相关的研究人员都有接触。困扰实验人员的是当样本量过大时,以1.5ml离心管为基本体系的组织核苷酸提取模式,同时操作20个以上的样品有非常繁琐的实验过程和样品间有错乱或者交叉污染的风险,此篇笔者介

创新参选:一种简单快速的miRNA检测新方法

  参选项目:一种简单快速的miRNA检测新方法----液相杂交显色法   背景:MicroRNAs (miRNAs)是近年来发现的在进化上高度保守的一类非编码小RNA (~22nt)。它作为转录后关键的基因表达调控子可参与几乎所有的生理和病理过程,革新了我们对基因表达调控的传统认识。miRN

食品检验实验中样品提取液浓缩方法的改进

  摘要:提取液的浓缩作为食品检验实验的重要内容,它能有效地反映出一个人的实验操作水平。但是常见的提取液浓缩方法存在耗时长、所能浓缩的提取液量少、浪费实验试剂等缺点,因此,对提取液浓缩方法进行改进就显得非常有意义。本文在分析几种常见提取液浓缩方法优缺点的基础上,对样品提取液浓缩方法进行了改进。希望本

从精子中提取DNA的方法

步骤:1、从棉签上取下有检材的棉花并置于1.5塑料离心管中。2、管中加入400微升TNE缓冲液;25%微升sarcosyl(硅鱼精);75微升水;5微升蛋白酶K溶液手混匀,37度保温2小时。3、用一新的灭菌牙签将棉花拧干后管中取出,再用12000rpm离心5分钟。4、.移上清液(内含裂解细胞或雌性片

酵母细胞中质粒的加工实验——从酵母细胞中分离质粒

利用一个假定的突变通过互补作用克隆酵母菌基因的一般方法。该突变为cdc101-1,它对酵母菌的生长来说既是隐性的又是温度敏感的。它使酵母可以很正常地在30°C生长,而不能在37°C形成菌落。如果用一个酵母菌基因组文库转化cdc101-1菌株,通过分离温度不敏感菌落,那么就可能分离到一个可以互补这种突

直接从空气中“提取”燃料将成可能

  据美国广播公司网站8月8日报道,科学家表示,利用从一种常见的土壤细菌中提取的酶,稀薄空气可以转变成汽车燃料。该方法有望实现以低成本制造出碳中立的环保燃料,同时无需对汽车发动机的原有设计进行大幅改动。   生活在大豆等粮食作物根系土壤中的名为棕色固氮菌的微生物会制造一种酶——钒固

从RNA中提取mRNA的方法步骤

从总RNA中分离mRNA采用Promega公司的PolyATract® mRNA Isolation System III。 使用该试剂盒,mRNA产量极低,因此下述方法是以Promega公司试剂盒操作手册为基础,并采用储昭晖硕士(作物遗传改良国家重点实验室植物分子生物学水稻分室)所建议的改进方

从脂肪组织提取蛋白的方法

从培养的细胞和组织中提取总蛋白是实验室非常常见的实验步骤,从大多数类型的细胞和组织中提取总蛋白比较容易,但是从脂肪组织中提取高质量和高浓度蛋白质是非常困难的。脂肪组织有白色和棕色脂肪两种类型,被称为白色脂肪组织(WAT)和棕色脂肪组织(BAT)。脂肪组织中含有许多脂滴,蛋白质含量小于细胞总数的 2%

Arabidopsis-gDNA-isolation

This is a simple and fast protocol for the extraction of genomic DNA from Arabidopsis thaliana that works fine in PCR for simple amplicons. We only us

酵母提取物、酵母浸粉和酵母粉的区别

酵母浸粉的介绍:酵母浸粉又称酵母提取物,是采用新鲜酵母经酵母自溶、过滤、 浓缩、喷雾干燥而得到的一种浅黄色至类白色 干燥粉末。有酵母自然 香味,易溶于水,水溶液呈淡黄色。酵母浸粉极具吸湿性,请放阴凉干燥处保存。酵母浸粉当中含有氨基酸类、肽类、水溶性维生素、及酵母多糖、酵母核酸组成的一种混合物,酵母浸

酵母细胞质粒提取步骤和酵母细胞破壁方法

酵母细胞的细胞壁比较厚,不容易破壁,不如大肠杆菌的质粒 容易提取,最近做了些酿酒酵母的实验,从酿酒酵母中提取质粒,现在就总结下实验的方法和步骤。酵母细胞质粒提取 步骤1. 接种单菌落(待检测酵母细胞)于25mLYNB(补加氨基酸 营养物)培养基中,30℃振荡培养过夜。2.第二天取一滴菌液于进行显微镜

酵母提取物的简介

  YE( 酵母提取物)是根据中华药典之规定采用以蛋白质含量丰富的食用酵母为原料,采用自溶、酶解、分离、浓缩等现代生物高新技术,将酵母细胞内的蛋白质、核酸等进行降解后精制而成的一种棕黄色可溶性膏状或浅黄色粉状纯天然制品。是一种优良的天然调味料,在食品行业中具有广泛的用途。也是最为理想的生物培养基原料

酵母RNA提取与分离

一、目的:学习稀碱法提RNA的原理与技术。二、原理:由于RNA的来源和种类很多,因而提取制备方法也各异,一般有苯酚法、去污剂法和盐酸胍法。其中苯酚法又是实验室最常用的。组织匀浆用苯酚处理并离心后,RNA即溶于上层被酚饱和的水相中,DNA和蛋白质则留在酚层中,向水层加入乙醇后,RNA即以白色絮状沉淀析

采用Agilent-Femto-Pulse系统对不同基因组DNA提取进...(一)

采用Agilent Femto Pulse系统对不同基因组DNA提取进行质量评估作者Chava Pocernich,Jolita Uthe,Steve Siembieda 安捷伦科技有限公司摘要Agilent Femto Pulse 系统采用革命性设计,是唯一一款能够自动进行高分子量 (HMW)

苯的制备方法介绍从石油中提取

从石油中提取在原油中含有少量的苯,从石油产品中提取苯是最广泛使用的制备方法。

从茶叶里提取茶多酚的方法是什么

在茶叶中提取茶多酚的工艺主要有以下的几种方法:1. 传统工艺:以水或乙醇为溶剂,采用水浴加热至80℃ 保温提取多次。合并提取液后用等体积的氯仿萃取,分出氯仿相后改用乙酸乙酯多次萃取,将乙酸乙酯大部回收后浓缩近干,冷冻干燥后用去离子水反复重结晶即得精品。但该法的缺点是操作费时麻烦、溶剂消耗量大、毒性大

方法三:酵母菌基因组DNA的提取

方法三:酵母菌基因组DNA的提取一:仪器:同方法一二:试剂:SE缓冲液(1M山梨醇,0.1MEDTA pH7.5);溶菌酶(50mg/ml);20%PVP;蛋白酶K缓冲液(10mM Tris pH7.6  0.5% SDS 1mM EDTA);其余同前三:操作 1.5ml  对数生长期细菌细胞   

如何区别酵母提取物、酵母浸粉、酵母粉和酵母浸膏?

  酵母浸粉的介绍:   酵母浸粉又称酵母提取物,是采用新鲜酵母经酵母自溶、过滤、 浓缩、喷雾干燥而得到的一种浅黄色至类白色 干燥粉末。有酵母自然 香味,易溶于水,水溶 液呈淡黄色。酵母浸粉极具吸湿性,请放阴凉干燥处保存。酵母浸粉当中含有氨基酸类、肽类、水溶性维生素、及酵母多糖、酵母核酸组成的一种

采用Agilent-Femto-Pulse系统对不同基因组DNA提取进...(二)

Femto Pulse 系统使用基因组 DNA 165 kb扩展法来分离大于 80 kb 的提取 gDNA(图 1)。使用 Agilent ProSize 数据分析软件上的 Smear Analysis 选项卡分析 gDNA 的分子量分布。弥散条带分子量分布包含整个弥散条带范围内的浓度分布。

酵母提取物的制备实验

基本方案             实验方法原理 酵母细胞的裂解方法有很多种,包括自溶、压力破碎(如French加压罐)、研磨(玻璃珠振荡)和酶裂解(如Zymolase)等。本方案讨论

酵母提取物的制备实验

实验方法原理 酵母细胞的裂解方法有很多种,包括自溶、压力破碎(如French加压罐)、研磨(玻璃珠振荡)和酶裂解(如Zymolase)等。本方案讨论的振荡玻璃珠研磨,是最简便的方法之一。这对于小体积(如<1mL的)和数升体积都很有效。经相差显微镜检测,细胞破碎率一般>95%。实验材料 新鲜培养的酵母

酵母提取物的制备实验

实验方法原理酵母细胞的裂解方法有很多种,包括自溶、压力破碎(如French加压罐)、研磨(玻璃珠振荡)和酶裂解(如Zymolase)等。本方案讨论的振荡玻璃珠研磨,是最简便的方法之一。这对于小体积(如<1mL的)和数升体积都很有效。经相差显微镜检测,细胞破碎率一般>95%。实验材料新鲜培养的酵母细胞

关于酵母提取物的简介

  酵母提取物(又称酵母味素,英文名称为Yeast extract),缩写为YE,是根据中华药典之规定采用以蛋白质含量丰富的食用酵母为原料,采用自溶、酶解、分离、浓缩等现代生物高新技术,将酵母细胞内的蛋白质、核酸等进行降解后精制而成的一种棕黄色可溶性膏状或浅黄色粉状纯天然制品。

酵母提取物片的特点

  新西兰十一坊酵母提取物片(富含天然维生素B) 酵母是目前已知B族维生素含量最全的天然食物之首,而且它以磷酸酯的形式存在,最适合人体吸收利用。酵母提取物同时富含蛋白质、矿物质和膳食纤维,是天然均衡的生物态营养源。  严格遵照中国营养学会《中国居民膳食营养推荐摄入量》(RNIs)标准,并充分考虑到日

葡萄藻中的酶有助从植物中提取燃料

  美国德州农工大学的科学家们在研究绿色微藻——布朗葡萄藻过程中发现了一种能够产生碳氢化合物的酶,利用这种酶可实现从植物中提取燃料。该研究发表在最新一期的《自然—通讯》杂志上。  布朗葡萄藻可产生大量的液态碳氢化合物,用于生产汽油、煤油和柴油。目前在地下储藏的石油大多也是由这些海藻产生的。  葡萄藻

豆制品中脂肪测定方法的改进措施

  食品中脂肪的测定(如豆奶等)都按GBSOOg.6一85、SB161一84中的酸水解法进行。即当加入一定量的乙醚摇动lmin后再加入等量的石油醚摇动lmin,静置3omin后,吸取一定量的醚层澄清液放入已恒重的称量瓶中。但在实践中发现,在醚层中有黑色悬浮物不下沉,当吸取醚层澄清液时难于操作,且易把

北沙参选方介绍

  1.慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎:沙参12克,玉竹、石斛、天花粉、党参各9克。每日1剂,水煎服。对症见口干舌燥,舌红少苦者有良效。  2.糖尿病:北沙参、生地各12克,石斛、麦冬、天花粉各9克。每日1剂,水煎服。适用于糖尿病,口干口渴明显者。如尿糖多者,加山药12克,黄芪9克;血糖高者,配玄参、苍术