组织免疫沉淀中染色质的制备
实验概要此步骤描述了从组织中制备染色质，以用于后续的染色质免疫沉淀反应。每个免疫沉淀/抗体反应推荐使用肝组织 30 mg，但组织使用量可根据实际进行调整。每种组织的用量依据组织蛋白丰度、抗体亲和力和交联效率而定。每个免疫沉淀反应最适染色质的量为 5-15 μg 。每次交联免疫沉淀反应之前，需根据不同组织类型确定具体的染色质需要量。应先按照下述方法制备染色质溶液，再进行交联免疫沉淀反应。所有溶液中均应添加蛋白酶抑制剂（10 μl/ml 的 PMSF，1 μl/ml 的抑肽酶和 1 μl/ml 的亮肽素，溶于 PBS 中）。实验步骤1. 交联1) 用刀片将冰冻或新鲜组织切成小块 (1-3 mm3)。2) 取一个空的 15 ml 锥形离心管，称重，放入组织后再次称重，计算组织重量。3) 在通风橱中配制交联所用溶液。每克组织加 1......阅读全文
新方法：超低细胞数表观基因组研究
日本九州大学和东京理工学院的科学家们研发了一种使用非常少量的细胞，范围从100到1000的细胞，来分析DNA-蛋白质相互作用的新技术。他们的方法可以捕获前所未有的细胞内表观遗传组信息，该技术奖促进生物标记的发现并为精准医学开辟新道路。 这项被称为染色质整合标记测序（Chromatin Inte
实验动物组织标本的制备实验
实验材料 家兔豚鼠白鼠试剂、试剂盒 营养液仪器、耗材 注射器线浴槽实验步骤 通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物，禁食24 小时。击头致昏，以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔，取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧（或95%O2+5%CO2
细胞核连缀分析实验_从组织中制备细胞核
实验材料动物组织试剂、试剂盒PBS蔗糖仪器、耗材电动匀浆器特氟隆研杵实验步骤一、用超速离心法从组织中分离细胞核1. 切下动物组织，放入置于冰上的平皿中，用冰冷的 PBS 冲洗。2. 加少量蔗糖Ⅰ溶液，用剪刀或剃须刀片将组织切碎，转入一个干净试管中，加蔗糖Ⅰ溶液至终体积为每克组织 10 ml。3. 用
－Nature：庄小威团队实现染色质组织的直接成像
后生动物基因组在空间的多个尺度上，通过DNA围绕着核小体将整条染色体分为不同的区域隔离包装。染色质在细胞核中是怎样折叠的对从基因表达的调控到DNA复制的很多生物过程都有重要意义。从千碱基到兆碱基的规模，其中包括基因的大小，基因簇和调控域，三维DNA的组织方式在多基因调控机制被涉及到，但了解这个组
冰冻组织制备及切片实验
实验材料冰冻组织试剂、试剂盒异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰冻，烧杯中加CryoKwik（或异戊烷）。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签，用镊子将样品放于另一端。 3. 保证C
冰冻组织制备及切片实验
实验材料 冰冻组织试剂、试剂盒 异戊烷OCT多聚-L-赖氨酸仪器、耗材 滤纸切片机加热槽冰冻机细毛刷实验步骤 1. 将一个50 ml 硬质玻璃烧杯浸入盛有液氮的烧瓶（或敞口聚苯乙烯盒）中冰冻，烧杯中加CryoKwik（或异戊烷）。2. 在滤纸条一端以铅笔注明标签，用镊子将样品放于另一端。 3.
用于PCR的模板DNA制备实验——酚氯仿法提取石蜡组织中DNA
模板 DNA 质量直接影响 PCR 结果，是 PCR 成功的关键之一。根据其检测对象（组织细胞材料）的不同，有不同的制备方法，常用的材料有石蜡切片、冰冻切片、血细胞、胸腹水等。实验步骤1. 10 mm 厚石蜡切片 10～15 张，置入消毒后的 1.5 ml Eppendorf 管中。2. 脱蜡 二甲
新鲜实体组织样本的制备（机械法）
剪碎法网搓法研磨法实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆，再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液；采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块，所以常与其他方法配合使用。实验材料组织
免疫沉淀实验
基本方案 制备抗体Sepharose 偶联物 抗Ig血清免疫沉淀放射性标记抗原 免疫沉淀放射性标记抗原 实验材料
免疫沉淀－(IP)
实验概要免疫沉淀是一种纯化蛋白质的方法。将我们感兴趣的一种蛋白质的抗体与细胞提取液孵育，以使抗体和蛋白质在溶液中结合。然后用protein A/G 耦合的琼脂糖凝胶，从样品中将抗体/抗原复合物提取出来。这种物理方法可将所需蛋白质从样品中分离。然后样品可以通过SDS-PAGE 进行分离并做 Wes
免疫沉淀实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 裂解缓冲液稀释缓冲液SDSTrisTSA仪器、耗材 转子离心机实验步骤 1. 表面标记或生物合成标记的细胞在裂解缓冲液中于4℃放置1 h 后，再于4℃3 000 g 离心10 min 除去细胞核，然后将所得上清在10000 g 离心1 min。 2. 一次性对上清进
免疫沉淀－(IP)
实验概要免疫沉淀是一种纯化蛋白质的方法。将我们感兴趣的一种蛋白质的抗体与细胞提取液孵育，以使抗体和蛋白质在溶液中结合。然后用protein A/G 耦合的琼脂糖凝胶，从样品中将抗体/抗原复合物提取出来。这种物理方法可将所需蛋白质从样品中分离。然后样品可以通过SDS-PAGE 进行分离并做 Wes
果蝇－S190－染色质重组抽提物的制备实验
实验方法原理 实验材料 0～6 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒 脱色洗液胚胎洗液盐洗液缓冲液 RMgCl2 液氮仪器、耗材 细尼龙网玻璃烧杯锥形管玻璃棒塑料注射器真空吸气机Wheaton 杜恩斯匀浆器 Sorvall Superspeed 离心机Beckman 超速离心机实验步骤 1. 试剂准备：脱色洗液
果蝇－S190－染色质重组抽提物的制备实验
实验材料0～6 h 果蜗胚胎试剂、试剂盒脱色洗液胚胎洗液盐洗液缓冲液 RMgCl2液氮仪器、耗材细尼龙网玻璃烧杯锥形管玻璃棒塑料注射器真空吸气机Wheaton 杜恩斯匀浆器Sorvall Superspeed 离心机Beckman 超速离心机实验步骤1. 试剂准备：脱色洗液：50％（V/V）家用漂白
包被组织培养板制备实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 刀豆蛋白A
包被组织培养板制备实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 刀豆蛋白A
包被组织培养板制备实验
实验材料刀豆蛋白A试剂、试剂盒磷酸缓冲液（PBS）仪器、耗材6 孔 35 mm 组织培养板无菌塑料袋（用于保存包被板）实验步骤1. 将 12 mg 刀豆蛋白 A 加入 120 ml 无菌的 PBS 中，至终浓度为 100 μg/ml。2. 在组织培养板的每孔中加入 1 ml PBS/刀豆蛋白 A 混
免疫沉淀的实验步骤
（1）收获细胞，加入适量细胞IP裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上或者4℃裂解30min, 12,000g离心30 min后取上清；（2） 取少量裂解液以备Western blot分析，剩余裂解液将1μg相应的抗体和10-50 μl protein A/G-beads加入到细胞裂解液，4°C缓慢摇晃
免疫沉淀的方法步骤
说到实验，毕竟是“说”，重要的是动手“做”。其实我们所发布的一些过程步骤等相当于说明书，我们能够给出的是一些知识与提醒注意，一个实验是不能看会的，所以朋友们可通过来了解，需要的朋友们可以自己动手来实践的。我们今天说的这个实验呢是免疫沉淀的实验，过程还是比较简单的。 免疫沉淀一般用于分析抗
关于核小体的检测技术的介绍
许多不同的技术已被用于检测AnuA，除了LE细胞试验以外，还有染色质包被的串珠乳胶凝集试验，以及免疫沉淀（用天然组织蛋白重组酸萃取的组织部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脱氧核苷蛋白”作抗原研制出一种孵育在1M生理盐水中的染色质中的预备品，但未得到明确鉴定。后期报道已有更好的方法来鉴定
核小体的监测方法
许多不同的技术已被用于检测AnuA，除了LE细胞试验以外，还有染色质包被的串珠乳胶凝集试验，以及免疫沉淀（用天然组织蛋白重组酸萃取的组织部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脱氧核苷蛋白”作抗原研制出一种孵育在1M生理盐水中的染色质中的预备品，但未得到明确鉴定。后期报道已有更好的方法来鉴定该预
核小体的监测方法
许多不同的技术已被用于检测AnuA，除了LE细胞试验以外，还有染色质包被的串珠乳胶凝集试验，以及免疫沉淀（用天然组织蛋白重组酸萃取的组织部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脱氧核苷蛋白”作抗原研制出一种孵育在1M生理盐水中的染色质中的预备品，但未得到明确鉴定。后期报道已有更好的方法来鉴定该预
核小体的监测方法
许多不同的技术已被用于检测AnuA，除了LE细胞试验以外，还有染色质包被的串珠乳胶凝集试验，以及免疫沉淀（用天然组织蛋白重组酸萃取的组织部分和ELISA法都已被使用。早期的研究用“脱氧核苷蛋白”作抗原研制出一种孵育在1M生理盐水中的染色质中的预备品，但未得到明确鉴定。后期报道已有更好的方法来鉴定该预
北京基因组所单细胞中识别染色质类染色质拓扑的算法
基因组DNA和组蛋白以特定的形式高度折叠在细胞核中，这一高级结构即三维基因组学，对细胞核内的诸多生命活动至关重要。基于染色质构象捕获（3C），尤其是高通量技术（Hi-C，ChIA-PET）的发展推动了三维基因组的研究，发现了包括染色质拓扑相关结构域（TAD），染色质环等一系列层次化的结构特征。近
染色质免疫共沉淀研究
真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在，研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。与传统的EMSA技术相比，染色质免疫沉淀技术（ChIP）能真实完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白，是目前研究体内DNA与蛋白质相互作用的最佳方法。染色质免疫沉淀技术（chro
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结...
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构实验实验材料 细胞试剂、试剂盒 Tritron X-100抽提缓冲液仪器、耗材 电子显微镜实验步骤 1. 在 4℃ 用 PBS 洗细胞一次。2. 在 4℃ 用含 0.5% Tritron X-100 的细胞骨架缓冲液抽提细胞 3 到 5 分钟。直到消
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构细胞核的预先分离实验材料细胞 试剂、试剂盒Tritron X-100
从培养细胞或组织中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构
从培养细胞中制备细胞核基质/中间纤维骨架结构 从组织中分离制备细胞核基质/中间纤维支架结构 细胞核的预先分离 实验材料
免疫沉淀实验——免疫沉淀放射性标记抗原
实验材料蛋白质试剂、试剂盒SDS仪器、耗材离心机实验步骤1. 按基本方案进行，但以下说明的操作步骤已经修改：（2b）按所需选用步骤4b所提供的其中之一备择物（①，②，③）预澄清放射性抗原溶液。（4b）加入1 μl 抗原特异性抗血清，或3 μg 抗原特异性单抗，或抗质特异性杂交瘤培养上 清（克隆化细
新鲜实体组织样本的制备（酶消化法）
实验方法原理对实体组织分散的作用原理主要有3个方面：① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等；② 可以水解组织间的黏多糖等物质；③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料组织