组织免疫沉淀中染色质的制备
实验概要此步骤描述了从组织中制备染色质，以用于后续的染色质免疫沉淀反应。每个免疫沉淀/抗体反应推荐使用肝组织 30 mg，但组织使用量可根据实际进行调整。每种组织的用量依据组织蛋白丰度、抗体亲和力和交联效率而定。每个免疫沉淀反应最适染色质的量为 5-15 μg 。每次交联免疫沉淀反应之前，需根据不同组织类型确定具体的染色质需要量。应先按照下述方法制备染色质溶液，再进行交联免疫沉淀反应。所有溶液中均应添加蛋白酶抑制剂（10 μl/ml 的 PMSF，1 μl/ml 的抑肽酶和 1 μl/ml 的亮肽素，溶于 PBS 中）。实验步骤1. 交联1) 用刀片将冰冻或新鲜组织切成小块 (1-3 mm3)。2) 取一个空的 15 ml 锥形离心管，称重，放入组织后再次称重，计算组织重量。3) 在通风橱中配制交联所用溶液。每克组织加 1......阅读全文
从实体组织中制备粗微体实验
从大鼠肝脏制备微体从狗的胰脏中制备粗微体实验材料雄大鼠 试剂、试剂盒蔗糖
从实体组织中制备粗微体实验
从大鼠肝脏制备微体 从狗的胰脏中制备粗微体 实验材料 雄大鼠 试
利用－Trizol－从植物组织中制备－RNA－实验
实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态N2NaCl柠檬酸钠仪器、耗材 转子-定子均化器研钵和杵圆锥形管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇，70%，用焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的水配制DEPC 处
利用－Trizol－从植物组织中制备－RNA－实验
下述方案是经修改过的 Trizol 方案，用于从植物组织中分离 RNA，其中增加了一个高盐异丙酵沉淀步骤，以选择性地沉淀 RNA，而将多聚糖和蛋白多糖留在溶液里。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验材料植物组织试剂、试剂盒Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态
利用－Trizol－从植物组织中制备－RNA－实验
实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Trizol 氯仿 异丙醇 乙醇
从实体组织中制备粗微体实验
实验材料 雄大鼠试剂、试剂盒 蔗糖蔗糖HM仪器、耗材 玻璃板实验步骤 1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠，大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝（6 g）大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体，所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。2. 流干血液
免疫学技术专题：染色质免疫沉淀芯片（ChipChip）
该技术能够快速在目标基因组的染色体中确定特异DNA结合蛋白的准确结合位点，ChIP芯片也可以在一个基因组的任何感兴趣的区域内寻找染色体的结构改变。一、ChIP-Chip的用途（1）在基因组范围内确定基因转录因子的DNA结合位点和其他DNA结合蛋白或蛋白复合体的DNA结合位点。（2）染色体活性状态的定
从实体组织中制备粗微体实验_从狗的胰脏中制备粗微体
实验材料胰脏试剂、试剂盒HM 缓冲液蔗糖-缓冲液三乙基氨基乙酸缓冲液实验步骤1. 从动物身体切下胰脏，立即用大约 50 ml 冷 HM 缓冲液冲洗，放置于干净的纸巾上，去除结缔组织：匀浆介质（HM）0.25 mol/L 蔗糖-缓冲液A缓冲液A：50 mmol/L 三乙基氨基乙酸缓冲液（TEA），pH
组织芯片的制备——石蜡块组织芯片
实验方法原理首先制作模具蜡块（受体，recipient）。从供体蜡块（donor）上取样，取样针分别有 0.6 mm、1.0 mm、1.5 mm 和 2.0 mm 几种，在 1 个大小 45 mm×20 mm 的模具蜡块上，以 0.6 mm 取样针间隔 0.1 mm，可排列 1000 余个位点，如取
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液
从肝脏组织中制备细胞核实验
实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液（PMSF 在使用前添加），冰上放置。裂解缓冲液：0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液（RSB）0.25 mol/L 蔗糖（超级纯）10 mmol/ Tris-HCl (pH7
从组织和培养细胞中制备轻线粒体组分
试剂和器材： 1. 匀浆介质：0.25mol/L蔗糖溶液、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH，pH7.4；2. 按要求向溶液加入蛋白酶抑制剂；3. 磷酸盐缓冲液；4. 低速冷冻离心机，配有30—40ml离心管的吊桶式离心转子；5. 高速离心机，配有30—40ml离心管
北京大学Cell－Res获染色质免疫沉淀测序技术突破
生物动态光学成像中心黄岩谊课题组与汤富酬课题组合作，发展了一种基于微流控芯片的微量细胞样品处理与核酸俘获方法，成功实现了针对1000个细胞的染色质免疫沉淀测序（ChIP-Seq），大幅减少了这类实验中对样品起始量的要求，并利用这一方法研究了组蛋白H3第4位赖氨酸的3甲基化修饰（H3K4me3）在
组织芯片的制备技术
制备组织芯片的两个关键步骤是制备受体蜡块和从供体石蜡块中精确采集微量样品。虽然至今仍然有很多研究机构采用纯粹手工方法进行操作，但是各种商业化机械制备仪的制作效率和精度更高。Beecherlnstruments公司的组织阵列排布仪是目前使用较多的制备仪。制备仪包括操作平台、特殊的打孔采样装置和一个定位
组织匀浆的制备方法
1、取组织块（0.2g~1g）最少可到2～5mg，在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，放入5或10ml的小烧杯内 2、用移液管量取预冷的匀浆介质（ph7.4,0.01mol/L Tris-HCL, 0.0001MOL/LEDTA-2Na,0.01mol/L蔗糖0.8％的氯化钠溶液）
组织芯片制备仪
组织芯片技术是以形态学为基础的分子生物学新技术，应用范围涵盖了整个生命科学中各个基础研究、临床研究、应用研究以及药物开发的相关领域。凭借其省时、高效、误差小等优点，自诞生以来就获得了生命科学从业人员的热切关注。 那么组织芯片到底是如何制备出来的呢？ 简短截说，组织芯片制备就是通过组织芯片阵列
从实体组织中制备粗微体实验_从大鼠肝脏制备微体
实验材料雄大鼠试剂、试剂盒蔗糖蔗糖HM仪器、耗材玻璃板实验步骤1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠，大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝（6 g）大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体，所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。2. 流干血液后，打开
ChIP实验的四个注意事项
染色质免疫沉淀 (ChIP) 用于检测细胞核中天然染色质内的蛋白质与 DNA 之间的相互作用。ChIP 实验首先需要将细胞固定，即将蛋白质与 DNA 相互作用交联固定到位。然后将染色质打断为片段，使用抗体对目的蛋白质以及与其结合的所有 DNA 进行免疫沉淀。最后，解交联，对沉淀 DNA 进行纯化。纯
体内甲醛交联及染色质免疫沉淀研究DNA和蛋白质作用
染色质由真核基因组包装而成，它参与了转录、复制、重组、修复等许多以DNA一蛋白质相互作用为基础的生化过程。研究者感兴趣的是这些过程涉及到哪些特异的基因或DNA序列,有哪些蛋白质参与。尽管有许多人对染色质进行分类,就像Holde将其分为转录活性或非活性位点,但染色质构本身是动态的,并且DNA与非组蛋白
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料 细胞 试剂、试剂盒 环己酰亚胺 匀浆缓冲液
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料细胞试剂、试剂盒环己酰亚胺匀浆缓冲液仪器、耗材培养皿实验步骤1. 培养基中加入环己酰亚胺（溶于蒸馏水，贮存液浓度 0.1 mol/L，-20℃ 保存。如果不溶，试着加热到 40℃ 以帮助溶解）（终浓度 10 μmol/L)，37℃ 保温 5~10 分钟。2. 培养皿从 37℃ 转移到冷室，立
从组织培养细胞中制备粗微体实验
实验材料细胞 试剂、试剂盒环己酰亚胺 匀浆缓冲液
染色质提取试剂盒的原理
染色质（Chromatin）最早是1879年Flemming提出的用以描述核中染色后强烈着色的物质。现在认为染色质是细胞间期细胞核内能被碱性染料染色的物质。染色质的基本化学成分为脱氧核糖核酸核蛋白，它是由DNA、组蛋白、非组蛋白和少量RNA组成的复合物。染色质是真核生物基因组DNA存在的主要形式。因
实验技术：组织切片的制备
【目的】组织标本必须首先被制成组织切片，再经过染色处理，然后才能在显微镜下进行临床诊断和科学研究。【原理】苏木素染色结合伊红染色是常规组织学染色技术，也称为H & E染色。苏木素是碱性染色，细胞核被染成深紫或兰色，常用作核染色；伊红是酸性染色，细胞浆染呈红色，常用作胞浆染色。【材料】1.试剂和溶液（
组织和细胞RNA的制备
一、 组织和细胞总RNA提取：异硫氰酸胍法（一）试剂准备1．CSB缓冲液：42mM柠檬酸钠；0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基，N甲基甘氨酸钠)；0.2 mM β-巯基乙醇。2．变性液：异硫氰酸胍（终浓度 4 M）25g、CSB缓冲液 33ml，混合直至完全溶解，可在65℃助
石蜡包埋组织样本的制备
实验材料 组织胰蛋白酶试剂、试剂盒 二甲苯乙醇生理盐水仪器、耗材 尼龙网实验步骤 1. 把石蜡包埋组织切成 40~50 μm 厚的组织片 3~5 片，或用乳钵研成 0.5 mm 直径大小颗粒状，放入 10 ml 的试管中。2. 加入二甲苯 5~8 ml 时，在室温下脱蜡 1~2 d，视石蜡脱净与否，
石蜡包埋组织样本的制备
实验材料组织胰蛋白酶试剂、试剂盒二甲苯乙醇生理盐水仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 把石蜡包埋组织切成 40~50 μm 厚的组织片 3~5 片，或用乳钵研成 0.5 mm 直径大小颗粒状，放入 10 ml 的试管中。2. 加入二甲苯 5~8 ml 时，在室温下脱蜡 1~2 d，视石蜡脱净与否，更换 1
细胞/组织裂解液的制备
溶液准备 2×样品缓冲液：130mM Tris-HCl （ pH8.0 ） , 20% （ v/v ） 甘油 , 4.6% （ w/v ） SDS , 0.02% 溴酚蓝 , 2%DTT PBS （ pH7.4 ） :10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4 ，50
新方法：超低细胞数表观基因组研究
日本九州大学和东京理工学院的科学家们研发了一种使用非常少量的细胞，范围从100到1000的细胞，来分析DNA-蛋白质相互作用的新技术。他们的方法可以捕获前所未有的细胞内表观遗传组信息，该技术奖促进生物标记的发现并为精准医学开辟新道路。 这项被称为染色质整合标记测序（Chromatin Inte
免疫沉淀试剂使用说明
我们的HA-PrecipHen®由共价附着于琼脂糖珠上的鸡抗HA表位标签抗体制成。它设计用于在免疫沉淀（IP），染色质免疫沉淀（ChIP）和蛋白质纯化应用中与HA表位标记的蛋白质一起使用。我们的IgY-PrecipHen®由山羊抗鸡IgY制成。共价附于琼脂糖珠的抗体。它设计用于免疫沉淀（IP），染色