间接ELISA中试剂的配制及反应流程

实验概要间接ELISA是一种很实用而常用的免疫分析方法,本文将对反应中所用到的试剂的配制方法和反应的流程进行阐述。主要试剂1. 包被缓冲液:(0.05 mol/L,pH 9.6的碳酸盐缓冲液) Na2CO3 1.59g NaHCO3 2.93g 蒸馏水 1000ml4℃保存,一周内用完。2. 磷酸盐缓冲液(PBS,PH 7.4) NaCl 8.0g KH2PO4 0.2g KCl 0.2g Na2HPO4.12H2O 3.65g 蒸馏水 1000ml3. 洗涤液(0.01 mol/L,pH7.4的PBST) 1L PBS中加入0.5ml Tween-204. 封闭液(5% 脱脂奶粉) 5g 脱脂奶粉加入100ml PBS......阅读全文

间接ELISA中试剂的配制及反应流程

实验概要间接ELISA是一种很实用而常用的免疫分析方法,本文将对反应中所用到的试剂的配制方法和反应的流程进行阐述。主要试剂1. 包被缓冲液:(0.05 mol/L,pH 9.6的碳酸盐缓冲液)   Na2CO3 1.59g   NaHCO3 2.93g 蒸馏水 1000ml4℃保存,一周内用完。2.

间接ELISA中试剂的配制及反应流程

实验概要间接ELISA是一种很实用而常用的免疫分析方法,本文将对反应中所用到的试剂的配制方法和反应的流程进行阐述。主要试剂1. 包被缓冲液:(0.05 mol/L,pH 9.6的碳酸盐缓冲液)   Na2CO3 1.59g   NaHCO3 2.93g 蒸馏水 1000ml4℃保存,一周内用完。2.

间接炭凝反应原理、材料试剂及操作方法

一、原理 间接炭凝集反应简称炭凝。它是以炭粉微粒作为载体,将已知的抗体球蛋白吸附于这种载体上,形成炭粉抗体复合物,当炭血清与相应的抗原相遇时,二者发生特异性结合,形成肉眼可见的炭微粒凝集块。 目前炭凝反应已用于炭疽、鼠疫和马副伤寒性流产等病的诊断。 二、材料与试剂 1、炭粉 炭粉

间接法操作elisa试剂盒的方法介绍

  1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜;  2、次日洗涤3次;  3、加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤;  4、(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1

ELISA试剂盒实验技术中抗原抗体的反应

一、抗体的结构抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白 (immunoglobulin,Ig)。Ig 分五类,即IgG、IgA 、IgM、IgD 和IgE。与免疫测定有关的Ig 主要为 IgG 和IgM。Ig 由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig 的轻链是相同的,有κ(kappa)和

间接-ELISA法

实验概要Enzyme  linked immunosorbent  assay,ELISA。指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van  Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测

间接-ELISA法

实验概要Enzyme  linked immunosorbent  assay,ELISA。指将可溶性的抗原或抗体吸附到聚苯乙烯等固相载体上,进行免疫反应的定性和定量方法。1971年瑞典学者Engvail和Perlmann,荷兰学者Van  Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测

间接ELISA实验

实验概要需要偶联二抗的 ELISA 测定的一般程序。实验步骤1. 将抗原包被到微孔板    1) 将抗原在 PBS 或其它碳酸盐缓冲液中稀释至 20 μg/ml 的最终浓度。移取 50 μl 抗原稀释液到 PVC 微量滴定板的第一排微孔中,使该微量滴定板的微孔上包被抗原。按需要在微量滴定板上进行梯度

间接ELISA与间接竞争ELISA有什么区别

一般间接Elisa法用于检测抗体(比如免疫血清的效价)而间接竞争Elisa法用于检测小分子抗原

间接ELISA与间接竞争ELISA有什么区别

一般间接Elisa法用于检测抗体(比如免疫血清的效价)而间接竞争Elisa法用于检测小分子抗原

ELISA试剂盒生产流程及注意事项

1.ELISA试剂盒生产流程2.包被2.1 将包被抗原用包被缓冲液配制包被液,每孔取100 mL加入酶标板,盖好盖板膜,包被条件如下表,4℃ 16-20h包被时酶标板可以叠放,而37℃ 2h包被时酶标板之间的间距应保持一致(一般为5cm)。根据培养箱的设计调节酶标板间的间距,如培养箱从底部产热,则应

检测elisa试剂盒组成技术原理与间接法

  组成结构   1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。   2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。   3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗

组织培养中培养基配制灭菌及保存操作流程

培养基的配制 1、根据配方要求,用量筒或移液管从每种母液中分别取出所需的用量,放入同一烧杯中,并用粗天平称取蔗糖、琼脂  放在一边备用。 2、将1中称好的琼脂  加蒸馏水300~400毫升,加热并不断搅拌,直至煮沸溶解呈透明状,再停止加热。 3、将1中所取的各种物质(包括蔗糖),加入

elisa间接法原理

在运用ELISA方法测定抗体方面,通常所用的方法称为间接法,也是目前zui常用的方法,其原理:间接法首先用抗原包被于固相载体,这些包被的抗原必须是可溶性的,或者至少是极微小的颗粒,经洗涤,加入含有被测抗体之标本,再经孵育洗涤后,加入酶标记抗抗体,(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM),再

elisa间接法原理

在运用ELISA方法测定抗体方面,通常所用的方法称为间接法,也是目前zui常用的方法,其原理:间接法首先用抗原包被于固相载体,这些包被的抗原必须是可溶性的,或者至少是极微小的颗粒,经洗涤,加入含有被测抗体之标本,再经孵育洗涤后,加入酶标记抗抗体,(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM),再

elisa间接法原理

在运用ELISA方法测定抗体方面,通常所用的方法称为间接法,也是目前zui常用的方法,其原理:间接法首先用抗原包被于固相载体,这些包被的抗原必须是可溶性的,或者至少是极微小的颗粒,经洗涤,加入含有被测抗体之标本,再经孵育洗涤后,加入酶标记抗抗体,(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM),再

elisa间接法原理

在运用ELISA方法测定抗体方面,通常所用的方法称为间接法,也是目前zui常用的方法,其原理:间接法首先用抗原包被于固相载体,这些包被的抗原必须是可溶性的,或者至少是极微小的颗粒,经洗涤,加入含有被测抗体之标本,再经孵育洗涤后,加入酶标记抗抗体,(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM),再

elisa间接法原理

在运用ELISA方法测定抗体方面,通常所用的方法称为间接法,也是目前zui常用的方法,其原理:间接法首先用抗原包被于固相载体,这些包被的抗原必须是可溶性的,或者至少是极微小的颗粒,经洗涤,加入含有被测抗体之标本,再经孵育洗涤后,加入酶标记抗抗体,(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM),再

ELISA试剂盒进口大鼠实验的技术流程

ELISA试剂盒进口大鼠的技术流程是在抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶符号的基础上。在实验室运用的对比老练,是全世界科研人士较为认可的查看方法。针对不一样工作的需求,不断完善、更新其技术和方法。在从前看来一些难以进行质量测定的微量生物活性物质,如受体、细胞因子以及酶等均可运用酶联免疫测定技术来测定

Elisa加血清样及反应试剂操作技术要点

elisa实验方法操作标准,用于ELISA测定的标本zui为常用的是血清(浆),有时因为特定的检测目的,也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。在处理和保存方面要考虑以下几个方面: 1.要注意避免出现严重溶血。 2.样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染。 3.血清标本如是以无

间接凝集反应的定义及载体介绍

间接凝集反应是将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶联与免 疫无关的,大小合适的颗粒状载体表面,使 之形成致敏颗粒,然后与相应抗体反应(抗 原)作用,在适宜的电解质存在条件下,出 现特异性的凝集现象,称为间接凝集反应。 常用的载体颗粒有人o型红细胞、绵羊红 细胞、乳胶颗粒等。如载体颗粒是红细胞,称间接血凝

农药酶试剂500次/盒的试剂组及配制

试剂组成:酶5瓶,底物2瓶,显色剂2瓶,缓冲液9包。 配制 ① 缓冲液:将缓冲液试剂袋中的试剂倒出,溶于500mL蒸馏水中,溶解,混匀,即可。 ② 显色剂:向标有“显色剂”的滴瓶中添加5mL缓冲液,摇匀。在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷冻结冰。 ③ 底物:向标有“底物”的滴瓶中添加5mL蒸

农药酶试剂200次/盒的试剂组及配制

试剂组成:酶2瓶,底物1瓶,显色剂1瓶,缓冲液4包。配制① 缓冲液:将缓冲液试剂袋中的试剂倒出,溶于500mL蒸馏水中,溶解,混匀,即可。② 显色剂:向标有“显色剂”的滴瓶中添加5mL缓冲液,摇匀。在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷冻结冰。③ 底物:向标有“底物”的滴瓶中添加5mL蒸馏水,摇匀。在冰箱

农药酶试剂1250次/盒的试剂组及配制

试剂组成:酶5瓶,底物2瓶,显色剂2瓶,缓冲液20包。配制① 缓冲液:将缓冲液试剂袋中的试剂倒出,溶于500mL蒸馏水中,溶解,混匀,即可。② 显色剂:向标有“显色剂”的滴瓶中添加5mL缓冲液,摇匀。在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷冻结冰。③ 底物:向标有“底物”的滴瓶中添加5mL蒸馏水,摇匀。在冰

间接ELISA的操作程序

    本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎(DVH)抗体的ELISA为例,间接ELISA的操作程序如下:  ⑴ 材料  ① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液;  ② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清;待检鸭血清;  ③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。  ⑵ 方

ELISA中的试剂(2)-结合物

3.2  结合物 结合物即酶标记的抗体(或抗原),是ELISA中最关键的试剂。良好的结合物应该是既保有酶的催化活性,也保持了抗体(或抗原)的免疫活性。结合物中酶与抗体(或抗原)之间有恰当的分子比例,在结合试剂中应尽量不含有或少含有游离的(未结合的)酶或游离的抗体(或抗原)。此外,结合物尚要有良好的稳

间接-ELISA-实验方案

实验概要需要偶联二抗的 ELISA 测定的一般程序。实验步骤1. 将抗原包被到微孔板    1) 将抗原在 PBS 或其它碳酸盐缓冲液中稀释至 20 μg/ml 的最终浓度。移取 50 μl 抗原稀释液到 PVC 微量滴定板的第一排微孔中,使该微量滴定板的微孔上包被抗原。按需要在微量滴定板上进行梯度

间接凝集反应实验——间接血球凝集

实验方法原理间接血球凝集试验是根据红血球表面的吸附作用而建立起来的。将细菌可溶性抗原提出使之吸附于红血球表面,此时红血球即称为“致敏红血球”。这种致敏的红血球具有细菌的抗原性,与相应的抗血清相遇可产生凝集现象。间接血凝抗原的制备可用加碱或加热的方法使菌体中的多糖物质浸出,去除类脂以免干扰红血球的吸附

间接凝集反应实验——间接凝集抑制

实验方法原理若使可溶性抗原与相应抗体先混合,充分作用后再加入有关的免疫微球,因抗体已被可溶性抗原结合,不再出现免疫微球的被动凝集现象,叫间接凝集抑制试验,临床化验检查中常用的免疫妊娠试验就是一种间接凝集抑制试验。实验材料孕妇尿试剂、试剂盒胶乳抗原仪器、耗材滴管实验步骤1.  用清洁滴管在反应板上滴加

间接凝集反应

实验概要将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒载体上,然后与相应的抗体结合,也可出现颗粒载体的凝集现象,称为间接凝集反应。间接凝集反应比直接凝集反应敏感性为高,可用于微量抗体或抗原的检查。本实验介绍了间接凝集反应两种主要方法:间接血球凝集试验、间接凝集抑制试验和协同凝集试验。实验原理1. 间接血球凝