小鼠原代小胶质细胞吞噬功能的分析

实验概要本实验主要介绍从小鼠大脑分离的神经胶质细胞的吞噬功能。实验步骤为了检测小胶质细胞的吞噬功能,利用凋亡的神经祖细胞作为目标,因为在体外环境下它能最模拟自然条件下小胶质细胞的吞噬目标。1. 将神经祖细胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中进行分离,37ºC作用30min。2. 将分离的NPC 在紫外光下处理15-20min。注:此步应该在一个很薄的塑料培养皿中进行,厚的塑料(如15或50毫升锥形管)将阻止很大部分紫外线光,导致细胞凋亡不理想。3. 用含40mL PBS(RT)的50 mL锥形管中洗NPC,室温离心(1200 转/min,7min),缓慢减速,弃掉上清液。4. 室温条件下在5 mL 0 .1 M PBS溶液中重悬NPC。5. 向NPC中加入5mL sta 5(6)-TAMRA,SE(Invitrogen公司),立即涡旋, 37ºC避光孵育15min。6. 用40......阅读全文

小鼠原代小胶质细胞吞噬功能的分析

实验概要本实验主要介绍从小鼠大脑分离的神经胶质细胞的吞噬功能。实验步骤为了检测小胶质细胞的吞噬功能,利用凋亡的神经祖细胞作为目标,因为在体外环境下它能最模拟自然条件下小胶质细胞的吞噬目标。1. 将神经祖细胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中进行分离

小鼠原代小胶质细胞吞噬功能的分析

实验概要本实验主要介绍从小鼠大脑分离的神经胶质细胞的吞噬功能。实验步骤为了检测小胶质细胞的吞噬功能,利用凋亡的神经祖细胞作为目标,因为在体外环境下它能最模拟自然条件下小胶质细胞的吞噬目标。1. 将神经祖细胞(NPC)置于0.1M PBS 2mg/ml木瓜蛋白酶(Worthington)溶液中进行分离

小胶质细胞原代培养

实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料 新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒 含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋

小胶质细胞原代培养实验

实验方法原理利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下来继续培养,达到分离和纯化小胶质细胞的目的。实验材料新生1-3d的仔鼠试剂、试剂盒含10%胎牛血清的DMEM培养基D-PBS液消化液(0.25%胰蛋白酶+

小胶质细胞原代培养实验

基本方案             实验方法原理 利用混合胶质细胞培养物分层生长,以及小胶质细胞半悬浮生长的原理,通过摇床震荡法,将皮层来源的混合胶质细胞培养物最上层的小胶质细胞震摇下

吞噬功能实验_小鼠巨噬细胞吞噬功能测定

实验材料小鼠试剂、试剂盒生理盐水淀粉溶液鸡红细胞肝素瑞士-姬姆萨染液仪器、耗材注射器毛细管显微镜离心机实验步骤一、操作过程小鼠腹腔注射10 g/L 淀粉溶液2 ml↓ 24 h 后,小鼠腹腔注射2%鸡红细胞1 ml↓30 min 后,小鼠脱臼处死,腹腔内注射0.2 ml 肝素注射液,揉动腹部↓毛细管

正常小鼠原代脑星形胶质细胞培养

一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液

流式细胞术急性分离小鼠小胶质细胞

实验步骤1. 小鼠用pH值7.4,0.1M PBS彻底穿心灌注。2. 用剪刀去头。3. 剥开头骨的软组织。4. 除去下颌骨。5. 除去头骨延髓到上颌骨之间的组织。6. 手术剪刀,取出头骨顶部,顺时针方向切割,开始和结束于右后鼓膜钩。7. 舀出大脑,维持组织的完整性。8. 立即将脑组织置于预冷的流式细

流式细胞术急性分离小鼠小胶质细胞

实验概要本文主要讲述了:从成年小鼠脑中分离单细胞,制成单细胞悬液,我们一个单细胞分离成单细胞悬液,除去髓鞘碎片,然后染色标记,以确定小胶质细胞的成分。细胞被固定,在多色流式细胞仪上读取。实验步骤1. 小鼠用pH值7.4,0.1M PBS彻底穿心灌注。 2. 用剪刀去头。 3. 剥开头骨的软组织。 4

科学家成功在小鼠大脑中研究人类小胶质细胞的功能

  一直以来,人类大脑都是一个非常复杂的研究对象,大脑扫描的分辨率和其所能提供的信息也非常有限,而且研究者也无法利用体外方法来完全复制脑细胞中重要的微环境;近日,一项刊登在国际杂志Nature Neuroscience上的研究报告中,来自Flanders生物技术研究所的科学家们通过研究开发了一种新方

概述小胶质细胞的生物学功能

  小胶质细胞具有多突触及可塑性的特点,为中枢神经系统内固有的免疫效应细胞,在中枢神经系统的生理过程中发挥着极其重要的作用。首先,小胶质细胞对于神经系统的正常发育是必需的。在大脑发育的早期阶段,约20%~80%具有长投射轴突的神经元发生凋亡并迅速被清除,激素、神经递质或分泌的蛋白质等细胞外信号可与神

小胶质细胞和星形胶质细胞的区别

小胶质细胞(microglia)是神经胶质细胞的一种,相当于脑和脊髓中的巨噬细胞,是中枢神经系统(CNS)中的第一道也是最主要的一道免疫防线。小胶质细胞大约占大脑中的神经胶质细胞的20%。小胶质细胞不停地清除着中枢神经系统中的损坏的神经,斑块及感染性物质。无数临床上和神经病理学研究表明激活的小胶质细

小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验

目的要求1.了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程基本原理细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式,在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨

小胶质细胞的介绍

小胶质细胞(microglia)是神经胶质细胞的一种,相当于脑和脊髓中的巨噬细胞,是中枢神经系统(CNS)中的第一道也是最主要的一道免疫防线。小胶质细胞大约占大脑中的神经胶质细胞的20%。小胶质细胞不停地清除着中枢神经系统中的损坏的神经,斑块及感染性物质。无数临床上和神经病理学研究表明激活的小胶质细

小胶质细胞的活化

是CNS在许多病理条件见下,有时甚至是非常微弱刺激作用下的常见反应,表现为小胶质细胞在局部不同程度的增生与聚集,同时常伴有细胞形态,免疫表型与功能等一系列变化。细胞形态上,活化的小胶质细胞常表现为突起回缩,胞体相对增大乃至呈巨噬细胞样,免疫学表型的改变多为一些免疫分子如主要组织相容性抗原(MHC)等

小胶质细胞的简介

  1、神经胶质中具有吞噬功能的细胞。主要分布于大脑、小脑的皮质及脊髓的灰质,具有运动和吞噬神经组织废物的功能。  2、神经胶质细胞中最小的一种。胞体细长或椭圆。核小,扁平或呈三角形,染色深。细胞的突起细长,有分支,表面有许多小棘突。小胶质细胞的数量少,仅占全部胶质细胞的5%左右。中枢神经系统损伤时

小胶质细胞的活化

是CNS在许多病理条件见下,有时甚至是非常微弱刺激作用下的常见反应,表现为小胶质细胞在局部不同程度的增生与聚集,同时常伴有细胞形态,免疫表型与功能等一系列变化。细胞形态上,活化的小胶质细胞常表现为突起回缩,胞体相对增大乃至呈巨噬细胞样,免疫学表型的改变多为一些免疫分子如主要组织相容性抗原(MHC)等

星形胶质细胞(astrocyte)原代培养

星形胶质细胞来源于2天的大鼠。断头后的大鼠大脑收集在含有11mM 碳酸氢钠,71mM葡萄糖和1%抗菌素的DMEM溶液中。移除脑膜,血管和白质。大脑皮层用机械分裂法进行匀浆,然后将细胞悬液经230μm,104μm 和73.3μm孔的铁丝网依次过滤。然后用700g 速度10分钟离心收集细胞,

少突胶质细胞原代培养

少突胶质细胞来源于1-2 天的大鼠。断头后大鼠大脑收集到Ham’s F-12培养液中,移除脑膜和血管。皮质用机械匀浆进行匀浆然后将细胞悬液依次通过230μm和104μm尼龙网进行过滤。细胞通过1000rpm 7分钟离心进行收集,用添加12.5%胎牛血清的DMEM进行重悬细胞。最后以2.0×1

皮层星形胶质细胞的原代培养

实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的皮层来源的混合胶质细胞中去除少突胶质细胞和小胶质细胞,其中星形胶质细胞的贴附力最强。用这种方法获得的星形胶质细胞纯度很高(95%以上),且细胞具有较好的增

吞噬细胞吞噬功能检测

一、基本原理吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能,在机体非特异性免疫中发挥重要作用。小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠,可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液,一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞,染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定

吞噬细胞吞噬功能检测

实验方法原理 吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能,在机体非特异性免疫中发挥重要作用。小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠,可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液,一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞,染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测

小鼠肝细胞原代培养

实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 小鼠试剂、试剂盒 DMEM无血清DMEM培养基胰酶PBS仪器、耗材 饭盒纱布剪子镊子烧杯平皿研磨玻片滤网离心管6孔培养板吸管移液管手套微量加样器实验

神经所研究揭示小胶质细胞生理功能

  11月29日,Developmental Cell在线发表了中科院上海生科院神经所杜久林研究组题为《静息态小胶质细胞与神经元之间的双向功能调节》的研究论文。该工作由博士生李莹和杜旭飞在杜久林研究员的指导下共同完成。  小胶质细胞是中枢神经系统中重要的免疫效应细胞。在病理状态下,小

吞噬功能实验——人巨噬细胞吞噬功能测定

实验方法原理巨噬细胞是人体重要细胞。 巨噬细胞吞噬功能测定就是测定巨噬细胞吞噬功能。人巨噬细胞可从经斑蝥激发的皮疱液中获取。实验材料人巨噬细胞试剂、试剂盒乙醇瑞士-姬姆萨染色液仪器、耗材离心机培养箱实验步骤一、材料准备 1.  斑蟊浸液制备:斑蟊以95%乙醇溶液制成10%酊剂,室温下浸泡2周后使用。

吞噬功能实验_中性粒细胞吞噬功能测定

吞噬功能实验在生物体内发挥着重要作用(1)对机体的非特异性免疫功能的检测;(2)对吞噬细胞活性和聚集能力的测定。实验方法原理中性粒细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMN)的功能包括粘附、移动、吞噬杀菌等,是机体天然免疫力的重要组成部分。吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细

吞噬细胞吞噬功能检测实验

实验概要本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测(Assay of the Phagocytic Function of Phagocyte)实验的基本原理、操作步骤及注意事项等。实验原理吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能,在机体非特异性免疫中发挥重要作用。小鼠腹腔内注射硫代乙

皮层星形胶质细胞的原代培养实验

贴附差异法             实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的

皮层星形胶质细胞的原代培养实验

贴附差异法             实验方法原理 利用星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞生长存在时间上的差异、细胞生长方式及细胞对培养层黏附性不同等特性,用37℃恒温摇床从培养的

小鼠肝细胞原代培养实验

胰酶消化法             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。