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免疫荧光操作步骤(漂片,冰冻切片)

实验概要免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。实验步骤1. 将脑片放到,6 孔板(或 12 孔板),按照二抗说明书,加 3%双氧水封闭 10min(如果是从切片保护液取出,则要用 PBS 洗一遍);(二抗不同,操作步骤有差别);2. 吸去双氧水,PBS 洗两遍,将脑片周围的水用吸水纸或卫生纸擦净,注意不要碰到脑片;3. 然后按照一抗说明书,将一抗按比例稀释,加入稀释后的一抗,一般,大鼠脑片一张需 50 微升一抗稀释液,小鼠脑片为 30 微升;注意不要让液体流到边上;如果流到边上,要重新加或者加大量,使脑片完全浸入液体;4. 然后,4℃,过夜(18h 或者 24h),不建议使用......阅读全文

免疫荧光

Immunofluorescence Technique (Spector Lab)protocol for immunofluorescence on cells  Immunofluorescence Protocol (Walter Steffen)Methanol fixationForma

间接免疫荧光

方案16.11 间接免疫荧光实验方法原理固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片产生一抗种属的二抗猪血清或其他封闭剂D-PBSA试剂、试剂盒新鲜制备的固定剂用含10%的FBS培养液封固剂实验步骤1. 用 D-PBSA 洗涤长有细胞的盖玻片,置于合适的培养皿中。如 1

直接免疫荧光

中文名称直接免疫荧光英文名称direct immunofluorescence定  义直接用荧光标记抗体来研究特异性抗原在细胞内定位的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

间接免疫荧光

实验方法原理固定细胞,顺序加入一抗和二抗,通过 UV 光观察。实验材料细胞培养在盖玻片                                                                  产生一抗种属的二抗                                

免疫荧光技术

  免疫荧光技术是标记免疫技术中发展最早的一种.它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记抗体获得成功。经过几十年的发展,该技术已相当成熟。  用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的

免疫荧光技术

免疫荧光技术1)  直接法1.标本经固定后,PBS洗涤3×3分钟。2.加荧光素标记的抗体,湿盒内37℃孵育50分钟。3.PBS洗涤3×3分钟。4.0.1%伊文氏兰复染。5.PBS洗3次,蒸馏水洗2次,每次3分钟,以除去NaCl结晶。6.缓冲甘油封片,镜检。 2)  间接法1.标本固定后,PBS洗涤3

间接免疫荧光

中文名称间接免疫荧光英文名称indirect immunofluorescence定  义直接免疫荧光技术的改进。待检细胞首先用未标记的抗体处理,使之与特异的抗原形成复合物,然后再用抗抗体的荧光标记抗体着色,即可检测出特异抗原在细胞中的存在部位,具有荧光增强效应。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞

免疫荧光概述

  免疫荧光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。  用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用

免疫荧光原理

免疫学的基本反应是抗原-抗体反应。由于抗原抗体反应具有高度的特异性,所以当抗原抗体发生反应时,只要知道其中的一个因素,就可以查出另一个因素。免疫荧光技术就是将不影响抗原抗体活性的荧光色素标记在抗体(或抗原)上,与其相应的抗原(或抗体)结合后,在荧光显微镜下呈现一种特异性荧光反应。

免疫荧光简介

  免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。