HINT快速检测和评价冠状病毒药物的方法实例(二)

选择DPP4高表达细胞类型用于抗体结合和抑制分析二肽基肽酶-4 (DPP4)是MERS-CoV进入宿主细胞的受体。为了更好地在细胞水平研究MERS-CoV,研究者们需先建立DPP4高表达株。A549, BHK21和VeroE6细胞被转染了不同浓度的DPP4 质粒。两天后,细胞被固定和染色。Celigo对所有样本进行全孔成像并识别单个细胞的荧光强度。数据以FCS文件导出至FlowJo 10软件进行转染效率分析。BHK-21在0.1 µg质粒浓度显示出了最高表达,因而被选择用于后续分析。优化用于抗体结合和抑制检测的细胞数优化细胞接种密度对于基于荧光的细胞分析至关重要。细胞数太少会降低数据的可重复性,细胞数太高可能会造成细胞堆叠,影响分析。研究者们将不同密度的BHK-21细胞接种过夜并转染DPP4, 通过Celigo的明场通道查看和分析细胞形态和融合率,最终选择5×10^3个细胞/孔作为最佳接种密度。开发基于图像分......阅读全文

HINT快速检测和评价冠状病毒药物的方法实例(二)

选择DPP4高表达细胞类型用于抗体结合和抑制分析二肽基肽酶-4 (DPP4)是MERS-CoV进入宿主细胞的受体。为了更好地在细胞水平研究MERS-CoV,研究者们需先建立DPP4高表达株。A549, BHK21和VeroE6细胞被转染了不同浓度的DPP4 质粒。两天后,细胞被固定和染色

HINT快速检测和评价冠状病毒药物的方法实例(一)

COVID-19 的出现,使全球的公共卫生面临了严峻的挑战。尽快开发针对SARS-CoV-2的药物和疫苗是科学家们的当务之急。根据以往的经验,具有病毒中和能力的单克隆抗体在这两方面应用都具有很好的潜力。本文将为大家介绍由美国国立卫生研究院(NIH), 美国疾病预防控制中心(CDC), Med

HINT快速检测和评价冠状病毒药物的方法实例(三)

开发基于图像分析的病毒蛋白结合抑制检测方法RBD特异性抗体通过阻断S蛋白和DPP4的结合,从而主导了MERS-CoV的宿主免疫原性反应。抗体也可以作用于其他表位,包括NTD和S2区域。研究者们测定了结合MERS-CoV S不同区域的单克隆抗体抑制MERS-CoV S与DPP4表达细胞的结合能力。

快速检测采样的具体方法和采样实例

具体的取样方法,因分析对象性质的不同而异。  (1)均匀固体物料(如粮食、粉状食品)  ① 有完整包装(袋、桶、箱等)的物料  可先按(总件数/2)1/2确定采样件数,然后从样品堆放的不同部位,按采样件数确定具体采样袋(桶、箱),再用双套回转取样管插入包装容器中采样,回转一百八十度取出样品;再用“四

砷的快速检测原理和快速检测方法

砷的快速检测原理:三氧化二砷与锌粒和酸产生的新形态氢生成AsH3,其与氯化金相遇产生反应,可使氯化金硅胶柱变成紫红或灰紫色,在装有氯化金硅胶的柱中砷含量与变色的长度成正比,以次可达到半定量的目的。砷 锑 铋 汞 银化物的快速检测方法: “雷因须氏法”。

多种细胞快速检测的方法(二)

荧光染料增殖试验 CFSE检测法CFSE是一种可穿透细胞膜的荧光染料,具有细胞膜通透性,能够自由进入细胞;当CFSE扩散穿过细胞膜,会与细胞内源酯酶产生水解反应而被激发,发出绿色荧光,这些带荧光的CFSE会进一步与细胞骨架蛋白结合,形成稳定的胞内荧光蛋白。每当细胞进行分裂增殖,胞内荧光蛋白会被平均分

快速检测采样数量和方法

    采样数量应能反映该食品的卫生质量和满足检验项目对试样量的需要,一式三份,供检验、复验、备查或仲裁,一般散装样品每份不少于0.5Kg。     鉴于采样的数量和规则各有不同,一般可按下述方法进行。 (1)液体、半流体饮食品。如植物油、鲜乳、酒或其它饮料,如用大桶或大罐盛装者,应先行充分混匀后采

实例教你评价测量不确定度

因为每个实验室的项目不一样,所以评价不确定度的方法也不一样,本文选取溶液体积这个大家都比较熟悉的实例来评估不确定度,希望需从这个例子中大家能够明白如何评估不确定度的一些思路。 一、确定不确定来源:溶液体积测量主要存在三个不确定度因素即容量器皿体积校准、温度和测量重复性。 二、对各个不确定度的分量进行

急性中毒物质的快速筛选和检测(二)

  方法一速测卡法(纸片法)   2.1范围   本标准规定了由酶抑制法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检验方法。本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速筛选测定。   2.2原理   胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷

食品安全快速检测产品评价

  摘 要:快速检测方法及产品在保证食品质量安全方面发挥着重要作用,然而我国快检市场鱼龙混杂,快检产品质量参差不齐,缺乏有效的管理,市场迫切需求切实有效的快检产品。本文对比研究了国内外快检产品的管理及评价方法,从多项评价指标分析了各组织/机构的评价规范及优势,以期为我国快检产品评价的实施及研究提供技

使用表面增强拉曼光谱技术快速检测毒品实例

技术背景毒品的快速检测对于推断毒品来源、抑制毒品传播和打击毒品犯罪都起着重要作用。如今公安以及海关等部门通常采用先快速筛查、再确证的方法查毒,也就是先用试剂盒或试纸条等快速判断毒品是否存在,然后用气相色谱-质谱联用技术进行最终的确认。试剂盒或试纸条一般基于胶体金免疫层析技术,具有简便和低

美国快速检测冠状病毒技术技术有哪些?

  近期,美国食品和药物管理局(FDA)批准了一项由总部位于加利福尼亚的造父变星公司(Cepheid)研制新的冠状病毒快速检测技术。  该检测可以在45分钟内诊断出新型冠状病毒,在公司遍布全国的5000台机器上不需要经过医生培训就可以处理。  3月13日,FDA还批准了罗氏公司(Roche)的一项检

细胞的离心分离基础和分离实例(二)

ⅰ. 差分离心:  在不存在密度梯度条件下分离细胞是这种方法的主要特点,差分离心可以是利用地球重力(1g),也可以是利用低速离心分离组织匀浆。在重力或离心力作用下一些比较大的细胞沉降速度较快,当它们已变成沉淀时,大部分比较小的的细胞由于沉降速度慢而仍留在上清液中。很明显在大的细胞变成沉淀时一部分接近

尿糖检测的检测方法及评价

1.试带法 用葡萄糖氧化酶法。大多数试带法不与乳糖、半乳糖、果糖及还原物质发生反应。本法检测葡萄糖的特异性强、灵敏度高、简便快速,适用于自动化分析。2.薄层层析法 操作复杂、费时、成本高,多用于基础研究,临床上一般情况少用。3.班氏法(Benedict法)利用葡萄糖的还原性而设计,是传统尿糖定性试验

几种有效降低输出纹波噪声方法实例(二)

  如图7所示是比较好的PCB布局,调整了变压器的位置,将变压器输出地通过两个电容后,再回到地平面和输出引脚相连。实测在相同5V/2A输出的负载下,噪声已降到60mV VP-P,差别显着。图7 好的PCB布局  五、输出滤波电容的影响  输出滤波电容的容值、ESR对模块输出的纹波噪声也有直接

泛冠状病毒药物开发的基础知识(二)

泛抗冠状病毒药物三类靶点 非结构型蛋白:3c样蛋白酶(3CLpro)、木瓜蛋白酶(PLpro)和RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)。结构性蛋白:Spike(S)糖蛋白、包膜(E)蛋白、膜(M)蛋白和核帽(N)蛋白辅助蛋白:病毒间变异太大,不是很好的药物靶点靶向CoV非结构性蛋白(nonstruct

检测限测定方法的评价

  检测限(limit of detection,LOD)是指分析方法能够从背景信号中区分出药物时,所需样品中药物的最低浓度,无需定量测定。   LOD是一种限度检验效能指标,它既反映方法与仪器的灵敏度和噪音的大小,也表明样品经处理后空白(本底)值的高低。要根据采用的方法来确定检测限。当用仪器分析方

重金属污染的快速分析实例

案例背景:2007年3月,某电镀厂区外的河道发生大面积死鱼,怀疑有重金属污染。采集样品验证。为了保证数据的可靠性,采用He碰撞模式及ICP-MS半定量技术直接进行元素分析。 用户信息:某市环境监测中心 样品信息:河水,土壤样品 待测元素:Li、Be、B、Na、

肺炎的治疗实例分析(二)

  患者,男,75岁。发热、咳嗽、咳痰1周就诊。曾用青霉素静脉滴注5天,症状无减轻。痰细菌培养为肺炎链球菌,对青霉素耐药。查体:体温39.3℃,急性病容,呼吸急促,右下肺呼吸音减低,闻及湿性啰音。血白细胞16.0×109/L,中性粒细胞0.88。胸部X线片示:右肺下叶片状影。患者2个月前曾患“左

川崎病的药物疗法和临床评价

  川崎病(Kawasaki Disease,KD)又称皮肤黏膜淋巴结综合征(mucocutaneous lymphnode syndrome,MCLS),因由日本人川崎富作于1967年首次完整描述和报道而得名,其病因不明,多见于婴幼儿期,病理改变为全身非特异性、自身免疫损害性中小血管炎。临

小儿疾病药物疗法的原则和临床评价

  治疗是一门以病人为对象的医学技能,其目的是为了消除致病因子、提高机体抗病能力和代偿能力,减轻或解除病人的痛苦,维持机体内环境的稳定性,缓解或治愈疾病,恢复其正常的生理功能。药物疗法是临床医生治疗疾病常用的一种手段,是通过应用药物的方法治疗疾病。    小儿时期由于解剖、生理、病理及病理生理学

自身免疫疾病药物评价动物模型的应用(二)

基于 B-hIL4/hIL4RA 小鼠的AD模型第0天,OXZ作用于小鼠背侧和耳侧皮肤,第7-26天,对同一部位皮肤进行10次刺激。抗人IL4RA抗体(in house)于第6-23天进行腹腔注射,每周2次。(n=5)抗人IL4RA抗体的体内疗效 抗人 IL4RA 抗体在 B-hIL4/hIL4

2023年第二批食品补充检验方法和食品快速检测方法征集

  为打击食品非法添加、掺杂掺假等行为,强化食品安全监管技术支撑,现公开征集食品补充检验方法和食品快速检测方法。此次公开征集的有关事项和要求如下:  一、征集内容  食品补充检验方法主要包括食品掺假掺杂、非法添加物质检验方法;食品快速检测方法主要包括食品安全日常监管中应用广泛的农兽药残留等物质检测方

水分含量快速检测在生产过程控制中应用实例

    在食品、饲料等行业中,水分含量是衡量其产品质量的一项重要指标。实现产品水分含量的快速在线检测,对于企业质量控制和节约成本有重要意义。     以下是一家饲料公司技术开发的实例:    该公司在研究产品质量过程中发现:实验室分析报告统计结果,水分的变异最大。客户投诉统计结果,发霉变质是最严重的

【盘点】新型冠状病毒快速检测有哪些新科技?

   新型冠状病毒(2019-nCoV)引发的疫情引起了全国乃至全世界人民的关注。其中,有一个问题引发了广泛讨论:为什么确诊人数在2020年1月18日之后出现了爆发性增长?中国为什么能快速检测新冠病毒?图片来源于网络  作为生物检测技术的研究者,笔者希望借此机会跟大家探讨一下,如何诊断一个新发病原体

手持ATP荧光检测仪的ATP方法使用和评价

ATP荧光检测法能在十几秒内实现检测,它大大提升了传统细菌培养法24-48小时的工作效率,ATP方法的实现包括仪器、试剂和如何使用三大要素。 是影响准确性和一致性的关键之一,可按照等规范要求再参照手持式ATP仪说明书采样、检测、计算得出结果并记录报告。采样:(面积类)将ATP拭子采样棒一支在物体表面

白细胞分类计数(DC)的检测原理和方法学评价

  【检测原理】  制片→染色→油镜分类  求得各种白细胞的比值(百分率)  各类白细胞的绝对值 (白细胞计数值×白细胞分类计数%)   【方法学评价】  1.显微镜分类法  能准确地根据细胞形态特征进行分类,是白细胞分类计数参考方法,但耗时、精确性和重复性较差。  2.血液分析仪分类法  有三分群

白细胞分类计数(DC)的检测原理和方法学评价

【检测原理】制片→染色→油镜分类 求得各种白细胞的比值(百分率)各类白细胞的绝对值 (白细胞计数值×白细胞分类计数%)

手持ATP荧光检测仪的ATP方法使用和评价

ATP荧光检测法能在十几秒内实现检测,它大大提升了传统细菌培养法24-48小时的工作效率,ATP方法的实现包括仪器、试剂和如何使用三大要素。 是影响准确性和一致性的关键之一,可按照等规范要求再参照手持式ATP仪说明书采样、检测、计算得出结果并记录报告。采样:(面积类)将ATP拭子采样棒一支在物体表面

衣原体的检测方法及评价

1. 衣原体培养分离法本法可靠但技术难度大,特异性、敏感性均不理想,且费时费钱,目前临床上已很少应用。2. 衣原体细胞学检查本法虽操作简便,但特异性和敏感性较差,阳性率较低。3. 衣原体抗原的检测包括酶免疫反应(EIA)和直接荧光抗体检测(DFA)。目前国内已有上述方法试剂盒供应。需要有经验的实验室