体外哺乳类细胞基因突变(HGPRT)试验原理及注意事项2
三、试验步骤和观察指标贴壁生长细胞的试验步骤和观察指标:1、细胞准备:将5×105 个细胞接种于直径为10 mm平皿中,于37℃、5%二氧化碳培养箱中培养24h。2、接触受试物:吸去培养液,PBS洗两次,加人一定量的无血清培养液、一定浓度的受试物及S9混合物(无需代谢活化者用无血清培养液补足),置于培养箱中3h~6h,结束后吸去含受试物的培养液,用 PBS洗细胞两次,换入含10%血清的培养液,继续培养19h~22 h。3、表达:接触受试物的细胞继续培养19h~22 h后用胰酶-EDTA 消化,待细胞脱落后,加入含10%血清的培养液终止消化,混匀,放入离心管以800r/min~1000r/min的速度离心5min~7min,弃上清液,制成细胞悬液,计数,以5×105 个细胞接种于直径为10 mm 的平皿,3d后传代,仍接种5×105个细胞培养3d(最佳表达时间为6d~8d)。4、细胞毒性测定:将上述首次消化计数后的细胞每皿接种20......阅读全文
YYW2石灰土压力试验仪保养、注意事项及用途
1、 使用后,应将仪器擦拭干净,涂以薄层油脂,以防生锈。2、量力环在出厂时附有应力----应变曲线表,使用时应定期(一年)校验。3、仪器上的百分表,本厂一律不附,由用户单位自行配置。规格:量力环量表:10mm、0.01mm轴向位移量表:30mm、0.01mm4.使用设备时,要认真阅读技术说明书,熟悉
肿瘤细胞体外传代培养及保种
实验材料 肿瘤细胞试剂、试剂盒 液氮EDTA保种液仪器、耗材 恒温水浴锅低温离心机方瓶CO2培养箱-70度冰箱弯管显微镜离心管滤膜实验步骤 一、细胞复苏与培养 将液氮或-80℃保存的肿瘤细胞于37℃ 水浴, 快速溶化, 用8.0ml 培养基混匀已融化的肿瘤细胞悬液, 于1500 转/分, 离心3
肿瘤细胞体外传代培养及保种
肿瘤细胞体外传代培养及保种可应用于:(1)研究癌变机理;(2)抗癌药检测;(3)癌分子生物学研究。实验方法原理肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,是比较容易培养的细胞。癌细胞形态不规则,细胞界限清晰,对营养要求不高,在体外培养可无限制传代而不凋亡。体外培养的细胞一旦建立细胞系就需要进行一系列细胞生物
视神经少突胶质细胞体外培养纯化及鉴定
1.材料和方法 1.1 DMEM/F12条件培养液(亚硒酸钠40μg·L-1,腐胺16.2 mg·L-1,转铁蛋白100 mg·L-1,胰岛素234U·L-1,甲状腺素0.4μg·L-1,黄体酮0.62 mg·L-1,谷氨酰胺3g·L-1)。DMEM/F12培养基、小牛血清购自Hy
VogesProskauer(VP)-试验的原理及注意事项
一、试验原理细菌在葡萄糖代谢中生成丙酮酸,从丙酮酸开始,随细菌种类不同而有多种分解途径,有的使丙酮酸进一步分解,生成甲酸、乙酸、乳酸等终产物,有的可以使丙酮酸脱羧变为中性最终产物乙酰甲基甲醇(Acetylmethyl carbinol),亦称 3-羧基丁酮(Acetoin)。本试验即为检查某些细
体外诊断设备环境试验要求
体外诊断设备一般在其说明书或者标签中对其使用环境条件进行了限定,因此无论境内产品还是进口产品,申请产品注册的体外诊断设备和已批准产品的使用环境条件有变化提出变更或者说明书更改告知时,均需提交产品进行环境试验的相关验证资料,以证明申报产品在其声称环境条件下的安全性和有效性。 1.申报产品具有适用
单克隆抗体的制备原理简介
原理1:单克隆抗体(MAb)与抗血清(又称多克隆抗体,PAb)最主要的区别是MAb为单一种B细胞克隆所产生的一种均一的免疫球蛋白分子。所以MAb是B细胞克隆的标志,是一种独特型的抗体,它的特异性是针对一个抗原决定簇的。制备单克隆抗体不能用化学分离的方法从多克隆抗体中去分离纯化得到它,而是用分离产
Cultex细胞暴露技术建立呼吸道过敏反应的人肺体外模型-2
图3:免疫细胞化学(A-C)和流式(D)的表面标记。A,B:ECs(A)和AMs(B)DAPI染色(蓝色信号)和抗-proSP-C(红色)。在ECs上检测到ProSP-C,但是在AMs上检测不到。C:DCs DAPI染色(蓝色信号)和CD86(红色)。大部分细胞CD86呈阴性(箭头)。 D:DCs
体外异种授精实验的临床意义及注意事项
临床意义 异常结果:根据体外异种授精实验可估计精子的受精能力,判断男子生育力。 需要检查的人群:男性不育者。 注意事项 不合宜人群:暂时未明。 检查前禁忌: (1) 留精液前,病人应停止性交4-7天。检查前1周不能用丙酸睾丸酮、苯乙酸睾丸酮、苯丙酸诺龙。检查前1个月内应停止饮酒,这点
体外异种授精实验的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:暂时未明。 检查前禁忌: (1) 留精液前,病人应停止性交4-7天。检查前1周不能用丙酸睾丸酮、苯乙酸睾丸酮、苯丙酸诺龙。检查前1个月内应停止饮酒,这点必须做到。 (2) 采取精液时,可用软皂或石蜡油做阴茎按摩,将标本收集在无菌的试管中;也可用避孕套(冲洗干净,不含
溶血试验的原理及试验方法
溶血试验是国标中规定的一种对细菌进行筛选鉴定的方法。常用于链球菌、弧菌、白喉杆菌等的区分鉴定。 基本原理: 不少细菌都能产生溶血素,可以溶血平板,因此在这些细菌周围会出现溶血环。 试验方法: 由于不同细菌所产的溶血素不同,因此做溶血试验时对应的实验条件和试验方法也不一样,下面就简单的介绍
杂交瘤技术原理
单克隆是指利用在细胞融合基础上的B细胞杂交瘤技术。 杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。被特异性抗原免疫的小鼠脾细胞(B淋巴细胞)的主要特征是它的抗体分泌功能,但不能在体外连续培养,小鼠骨髓瘤细胞则可在
关于盐酸格拉司琼片的用药禁忌介绍
孕妇及哺乳期妇女用药: 多个体外或体内评估试验证实本药对哺乳类动物细胞无遗传毒性。动物试验无致畸胎性。尚无孕妇使用本品经验,也缺乏在母乳中分泌及排泄资料,因此,应当遵循以下原则: 1.孕妇除非必需外,不宜使用。 2.哺乳期妇女需慎用,若使用本品时应停止哺乳。 儿童用药:尚无儿童用药经验,
细胞计数及活力测定方法2
(三)MTT法测细胞相对数和相对活力活细胞中的琥珀酸脱氢酶可使 MTT分解产生兰色结晶状甲赞颗粒积于细胞内和细胞周围。其量与细胞数呈正比,也与细胞活力呈正比。l、细胞悬液以 1000rpm离心 10分钟,弃上清液。2、沉淀加入 0.5-1ml MTT,吹打成悬液。3、37℃下保温 2小时。4、加入
单克隆抗体技术的基本流程
单克隆抗体技术的流程为:脾细胞和骨髓瘤细胞在聚乙二醇(PEG)作用下发生细胞融合;加入HAT选择培养基(含H、A和T)后,未融合的骨髓瘤细胞因其从头合成途径被氨基蝶呤阻断,而又缺乏HGPRT不能利用补救途径合成DNA,从而死亡;未融合的脾细胞难以在体外培养而死亡;融合细胞因从脾细胞获得HGPRT,故
BV2细胞培养注意事项
BV2细胞基本信息 细胞名称:BV2(小鼠小胶质细胞) 细胞别称:BV-2 细胞货号:SNL-155 生长特性:半贴壁细胞 培养条件:DMEM+10%FBS+1%P/S 培养环境:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%;37℃ 细胞简介:BV-2细胞是由E·Blasi建立于1990
HePG2细胞培养注意事项
很好培养啊……你是想问这种细胞特殊的培养需要还是只是指培养细胞应注意的事项呀?就,正常操作就是,不要啥东西都用火烧一下。。。手不要碰任何瓶口,不要碰微量移液枪的插枪头的位置,手、胳膊不要从开口的东西上面经过,如果是用细胞培养瓶培养,放入培养箱速度快一点,别打开这培养箱的门,瓶盖不用拧得很松。如果是新
2A1细胞培养注意事项
1. 收到2A1细胞。后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读2A1细胞。说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。3
细胞重编程研究新突破:非哺乳类动物重编程
将已分化的细胞重编程,令其恢复多能性是一项重要的科学突破,这一成果也因此荣获了2012年诺贝尔生理/医学奖——两位科学家因证明“成熟细胞能被重编程恢复多能性”站在的科学的最高领奖台上。不过到目前为止,这种多能性重编程应用主要还是限制在哺乳动物中。 近期一组研究人员在9月3日的eLife杂志
中性粒细胞杀菌试验的临床意义及注意事项
临床意义 杀菌活力降低,说明机体对感染抵抗力降低,易遭受细菌的感染。多见于先天性慢性肉芽肿病及中性粒细胞功能异常症、糖尿病、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、慢性粒细胞性白血病、髓性及淋巴性增殖病、骨髓炎、某些病毒感染、类风湿性关节炎、红斑性狼疮、长期应用类固醇、秋水仙碱及长春新碱、酒精中毒及吸烟者
红细胞镰变试验的注意事项及检查过程
注意事项 不合宜人群:无。 检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天 的晚八时以后,应禁食。 检查时要求:抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。 检查过程 用末梢血主要有耳垂取血和指尖取血两个部位
红细胞渗透脆性试验的注意事项及检查过程
注意事项 检查时: (1) 地中海贫血的渗透脆性降低,应进行低浓度NaCl溶液的检查。 (2) 严重贫血者,要把RBC配成50%浓度,黄疸者要洗红细胞。 (3) 血标本在冰箱中保存不得超过6h。 检查过程 (1) 制备不同浓度的NaCl溶液。先配置1%浓度的低渗NaCl溶液100ml
T细胞花环形成试验的注意事项及相关疾病
注意事项 一、抽血前的注意事项 1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。 2、体检前一天的晚八时以后,应禁食,以免影响第二天空腹血糖等指标的检测。 3、抽血时 应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难; 有晕血史者请提前说明
红细胞镰变试验的临床意义及注意事项
临床意义 异常结果:检查结果为阳性,常见于镰状细胞性贫血(HbS),纯合子患者镰变红细胞可达100%,杂合子型可达50%左右。 需要检查的人群:有贫血症状的人群。 注意事项 不合宜人群:无。 检查前禁忌:检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结
红细胞渗透脆性试验的临床意义及注意事项
临床意义 异常现象: (1) 增高:遗传性球形红细胞增多症、自身免疫性溶血性贫血、先天性溶血性黄疸(家族性溶血性黄疸)等。 (2) 降低:镰状红细胞性贫血、阻塞性黄疸、缺铁性贫血、地中海贫血、铅中毒、恶性贫血、脾切除术后、肝脏病。 需要检查人群:贫血,铅中毒,黄疸,肝脏异常的人群。 注
狼疮细胞试验的注意事项
不合宜人群:一般无特殊人群。 检查前禁忌:避免使用可引起狼疮活动的药物,如青霉素类、避孕药、磺胺类等药物,能引起狼疮活动的药物颇多。 检查时要求:根据医生指示做好配合工作,保持正常心态。
关于盐酸左氧氟沙星滴眼液的毒理研究介绍
遗传毒性:左氧氟沙星Ames试验、CHO/HGPRT突变试验、小鼠微核试验、大鼠程序外DNA合成试验(UDS)、小鼠体内姐妹染色体交换试验结果均为阴性。体外CHL细胞株染色体畸变试验、CHL/IU细胞株姐妹染色体交换试验结果均为阳性。 生殖毒性:大鼠妊娠前、妊娠初期经口给药剂量达360mg/k
红细胞渗透脆性试验的原理
检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力。红细胞在低渗盐溶液中,当水渗透到红细胞内部达一定程度时,红细胞发生膨胀破裂。根据不同浓度的低渗盐溶液中红细胞溶血的情况,通过红细胞表面积与容积的比值,反映对低渗盐溶液的抵抗性。比值愈小,红细胞抵抗力愈小,渗透脆性增加。反之抵抗力增大。
红细胞沉降率的试验原理
红细胞的负电荷被球蛋白等大分子物质(如纤维蛋白原)中和,聚集成块,受到血浆阻滞力减小而下沉
红细胞渗透脆性试验的原理
红细胞渗透脆性试验的原理:检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液的抵抗力。红细胞在低渗盐溶液中,当水渗透其内部达一定程度时,红细胞发生膨胀破裂。根据不同浓度的低渗盐溶液中红细胞溶血的情况,通过红细胞表面积与容积的比值,反映其对低渗盐溶液的抵抗性。比值愈小,红细胞抵抗力愈小,渗透脆性增加。