常用多肽修饰方法及过程综述

多肽是一种由两个或多个氨基酸通过肽键(酰胺键)连接而形成的化合物。多肽在调节机体各系统、器官、组织和细胞的功能活动以及在生命活动中发挥重要作用,并且常被应用于功能分析、抗体研究、药物研发等领域。而通过对多肽进行修饰进而改变多肽的理化性质也是多肽研究中一种常用的手段。多肽修饰种类繁多,从修饰位点不同则可分为N端修饰、C端修饰、侧链修饰、氨基酸修饰、骨架修饰等(图1)。作为一种改变肽链主链结构或侧链基团的重要手段,多肽修饰可有效改变肽类化合物的理化性质、增加水溶性、改变其生物分布状况、延长体内作用时间、降低毒副作用、消除免疫原性等。今天我们来介绍几种最主要的多肽修饰及特点。 1、环化在自然界中,许多具有生物活性的多肽都是环状多肽,因此环肽在现代生物医学中有主多应用。环肽相较于线性肽,具有更好的刚性,对消化系统具有极强的抵抗力,因此可以在消化道中存货,并且对靶受体表现出更强的亲和力。环状多肽通常都是通过环化来实现的,根据环化......阅读全文

多肽合成的研究及应用现状

一、前言    多肽类化合物是一类重要的生物活性分子。20世纪70年代生物技术在生命科学领域的应用,使多肽等生物技术药物的研究进展迅速;与此同时,随着多肽固相合成技术及高效液相色谱(HPLC)纯化、分析技术等的发展,合成多肽药物的开发也成为药物研究中的一个活跃领域。    采用化学合成方法制备多肽,

多肽合成的研究及应用现状

  多肽合成的研究及应用现状   多肽是一种与生物体内各种细胞功能都相关的生物活性物质,它的分子结构介于氨基酸和蛋白质之间,是由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键结合而成的化合物。到现在,人们已在人体中发现和分离出一百多种肽类,关于多肽的研究与应用,也取得了巨大的进步,引发了空前的研究热潮。

用ETD线性离子阱质谱成功鉴定蛋白和翻译后修饰

 在翻译后修饰和/或极碱肽的序列分析方面,电子转移裂解( ETD )线性离子阱质谱是很有优势的工具。传统的诱导活化裂解(CAD)常用来鉴定蛋白,并试图确定和找到他们修饰的位点,但这种技术有其本身固有的缺点,下面将详细叙述。与线性离子阱的结合使用的ETD是蛋白质组学研究的一个可靠的技术,可以很容易

用ETD线性离子阱质谱成功鉴定蛋白和翻译后修饰

    在翻译后修饰和/或极碱肽的序列分析方面,电子转移裂解( ETD )线性离子阱质谱是很有优势的工具。传统的诱导活化裂解(CAD)常用来鉴定蛋白,并试图确定和找到他们修饰的位点,但这种技术有其本身固有的缺点,下面将详细叙述。与线性离子阱的结合使用的ETD是蛋白质组学研究的一个可靠的技术,可以很容

关于多肽的合成方法介绍

  1、固相合成法、液相合成法  以氨基酸为原料定向合成某种单肽,属医药原料中间体,主要用于西药配方,以增强药效、增强人体对药的吸收速度和吸收率。  2、酸解法或碱解法  这种肽主要出现在日本。用酸解法生产的“大豆多肽”,属“食品添加剂”,主要用于老人和儿童食品,其目的是增强这两种人群对食品营养的吸

多肽合成仪的操作方法

1、准备1mTU/HOBt溶液1)配制0.5mol/LHOBt的DMF溶液:称量13.5g无水HOBt(相对分子质量135.1),置于250ml烧杯中,加入DMF至200ml。2)配制0.45mol/LHBTU/HOBt溶液:将上述溶液倒人装有37.9gHBTU(0.1mM)的烧杯或烧瓶中。3)利用

多肽的合成方法有哪些?

  1、固相合成法、液相合成法  以氨基酸为原料定向合成某种单肽,属医药原料中间体,主要用于西药配方,以增强药效、增强人体对药的吸收速度和吸收率。  2、酸解法或碱解法  这种肽主要出现在日本。用酸解法生产的“大豆多肽”,属“食品添加剂”,主要用于老人和儿童食品,其目的是增强这两种人群对食品营养的吸

介绍多肽合成仪的检测方法

  a)UV Monitor  在多肽合成仪中,在线检测耦合效果的装置,如UV Monitor往往是选配装置,客户可根据实验的需要选购。其功能是让操作者直观的看到多肽合成的每一部氨基酸偶联效果,从而针对特定的序列做合成设置的调整,最终达到最佳合成效果。  对于不熟悉多肽合成仪操作的用户来说,UV M

多肽含量的测定有哪些方法

多肽含量的测定方法与有些蛋白质含量的测定方法相同,但并非所有蛋白质含量的测定方法都适用于多肽的含量测定,本文介绍了几种常见的多肽含量测定的方法:①双缩脲法;②Folin—酚试剂法;③OPA法(邻苯二甲醛法);④紫外吸收法,并且进行了比较。

关于多肽药物的检测方法介绍

  1、多肽药物的检测方法— 反相高效液相色谱法  高效液相色谱法已经成为药物质量分析中最常用的方法,具有灵敏、准确、快速的特点,多肽类物质是由多个氨基酸通过肽键连接而成,有一定的疏水性,在反相色谱柱上有一定的保留,在反相高效液相色谱中能有效分离,现在多肽类药物的有关物质分析大多采用高效液相色谱法。

引物修饰的常见类型及应用

  脱氧次黄嘌呤(deoxyInosine,dI):    脱氧次黄嘌呤是一个自然存在的碱基, 虽然不是真正意义上的通用碱基但当与其它碱基结合时会比其它碱基错配相对更稳定。 脱氧次黄嘌呤与其它碱基的结合能力为dI:dC > dI:dA > dI:dG > dI:dT. 在DNA聚合酶的催化下,脱氧

引物修饰的常见类型及应用

脱氧次黄嘌呤(deoxyInosine,dI):脱氧次黄嘌呤是一个自然存在的碱基, 虽然不是真正意义上的通用碱基但当与其它碱基结合时会比其它碱基错配相对更稳定。 脱氧次黄嘌呤与其它碱基的结合能力为dI:dC > dI:dA > dI:dG > dI:dT. 在DNA聚合酶的催化下,脱氧次黄嘌

昆明动物所发表两栖动物活性多肽发掘与利用的综述文章

  两栖动物皮肤裸露,他们常常受到生物因子或者非生物因子的浸袭(如微生物、寄生虫、猎食者、辐射及其他物理伤害),两栖动物皮肤中含有大量的活性多肽对应对环境威胁具有重要作用。  中国科学院昆明动物研究所研究员赖仞领导的天然药物功能蛋白质组学学科组长期从事两栖动物与环境相互作用的分子机制及两栖动物活性多

常用气相色谱柱使用过程中的保护方法

1、最好用预柱。(但要注意,若有时出峰异常,要先看看是不是它有问题了) 2、每次做完分析,都要进行冲洗,    A、分析用流动相中若无酸、碱、盐类物质,建议用90%甲醇冲洗30~60min;    B、若分析用流动相中含以上物质,要先用10%甲醇(或用与分析用流动相同比例,把含酸、碱、盐溶液换成水)

常用气相色谱柱使用过程中的保护方法

常用气相色谱柱使用过程中的保护方法1、最好用预柱。(但要注意,若有时出峰异常,要先看看是不是它有问题了)2、每次做完分析,都要进行冲洗,    A、分析用流动相中若无酸、碱、盐类物质,建议用90%甲醇冲洗30~60min;    B、若分析用流动相中含以上物质,要先用10%甲醇(或用与分析用流动相同

常用气相色谱柱使用过程中的保护方法

1、用预柱。(但要注意,若有时出峰异常,要先看看是不是它有问题了) 2、每次做完分析,都要进行冲洗,    A、分析用流动相中若无酸、碱、盐类物质,建议用90%甲醇冲洗30~60min;    B、若分析用流动相中含以上物质,要先用10%甲醇(或用与分析用流动相同比例,把含酸、碱、盐溶液换成水)冲洗

多磷酸化肽标记技术

蛋白质磷酸化是生物界最普遍,也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰,20世纪50年代以来一直被生物学家看作是一种动态的生物调节过程。在细胞中,大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关,如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质及多

混凝土恒温养护箱的常用故障及排除方法

  一、混凝土恒温养护箱的常用故障及排除方法:   1、仪器不显示或显示不工作:电源示接通,检查保险丝及插头。电源开关已坏,更换新开关:仪表输出、输入线脱落,插头未插紧。   2、仪器不制冷:温控仪给定值是否正确,温控仪未输出信号调定给定值或检查温控仪保险丝。温控仪输出信号,但接触器不工作,更换

常用免疫检验方法的影响因素及评价

1、免疫浊度法(免疫透射比浊法、免疫散射比浊法):(1)带现象(由于抗原或抗体极度过剩,而无沉淀物形成。如抗体过量称为前带现象,如抗原过量称为后带现象)可使结果偏低,甚至假阴性结果;(2)血脂过高,可使结果假性偏高。2、ELISA:(1)钩状效应(类似于后带现象,出现于双位点一步法中,当待测抗原浓度

常用免疫检验方法的影响因素及评价

1、免疫浊度法(免疫透射比浊法、免疫散射比浊法):(1)带现象(由于抗原或抗体极度过剩,而无沉淀物形成。如抗体过量称为前带现象,如抗原过量称为后带现象)可使结果偏低,甚至假阴性结果;(2)血脂过高,可使结果假性偏高。2、ELISA:(1)钩状效应(类似于后带现象,出现于双位点一步法中,当待测抗原浓度

混凝土恒温养护箱的常用故障及排除方法

  一、混凝土恒温养护箱的常用故障及排除方法:   1、仪器不显示或显示不工作:电源示接通,检查保险丝及插头。电源开关已坏,更换新开关:仪表输出、输入线脱落,插头未插紧。   2、仪器不制冷:温控仪给定值是否正确,温控仪未输出信号调定给定值或检查温控仪保险丝。温控仪输出信号,但接触器不工作,更换

细胞凋亡的检测方法综述1

一、形态学检测(一)光学显微镜和倒置显微镜  1、未染色细胞凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。  2、染色细胞常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。  

细胞凋亡的检测方法综述5

4、检测细胞膜成分变化的Annexin V 联合PI法原理:磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂

细胞凋亡的检测方法综述4

DNA聚合酶或Klenow大片段介导的原位缺口平移(ISNT)切片常规脱蜡,梯度乙醇复水化。将切片组织浸入2×SSC液中,80℃,20min,然后蒸馏水冲尽。0.5%胃蛋白酶(pH2.0)37℃消化0~20min,PBS洗尽。用滤纸擦干组织块周边液体放入湿盒组织切片上滴加缓冲液A,5min。缓冲液A

细胞凋亡的检测方法综述3

4、DNA 5’末端32P标记(1)将脱磷酸样品DNA置冰浴上,再加双蒸水10μl,10×缓冲液2μl,T4多核苷酸激酶10U,32P-ATP 740kBq(20μCi),双蒸水加至20μl。(2)混合后,37℃水浴60min。(3)加入1μl的0.5mol/L EDTA,90℃灭活5min。5、观

细胞凋亡的检测方法综述2

方法三(1)收集细胞悬液(106细胞),低速离心(1000r/min,离心5min)。(2)去上清,沉淀加0.4ml低渗缓冲液作用1h。(3)13 000r/min,离心10min,将上清转移至另一Eppendorf管中,加等量50%异丙醇和0.5mol/L NaCl混匀,置液氮5min。(4)12

食品中甲醛的检测方法综述

  据了解,甲醛对人体有毒有害,被列入国家卫生计生委《食品中可能违法添加的非食用物质名单》中,在蔬菜中使用属违法添加。专家建议,在购买蔬菜的时候,不要盲目的追求蔬菜水果的外观、品相,要对选购的蔬菜进行彻底的清洗、浸泡。  在此综述了食品中的甲醛的检测方法,以供将来开发我们更便捷的甲醛检测方法提供依据

常用分离法蒸馏的过程介绍

纯粹的液体有机化合物在一定的压力下具有一定的沸点,但是具有固定沸点的液体不一定都是纯粹的化合物,因为某些有机化合物常和其它组分形成二元或三元共沸混和物,它们也有一定的沸点。不纯物质的沸点则要取决于杂质的物理性质以及它和纯物质间的相互作用。假如杂质是不挥发的,则溶液的沸点比纯物质的沸点略有提高(但在蒸

硝酸根检验具体方法及过程

1,往试管里注入3毫升1mol/L的硝酸钾溶液和3mL1mol/L的硫酸亚铁溶液,振荡试管,混和均匀。2,斜持试管,沿试管壁慢慢注入浓硫酸3mL,使密度较大的浓硫酸沉入试管的底部,跟硝酸钾和硫酸亚铁的混和溶液分成两层。3,稍待片刻,把试管慢慢竖直,不久,两层液体间就有一个棕色的环生成。

植物总RNA提取方法及过程介绍

目的:用于 Northern 杂交、纯化 mRNA、RT-PCR 及 DDRT-PCR 等。材料:植物油嫩组织器官或种子萌发的幼苗。1、异硫氰酸胍法(1)试剂①异硫氰酸胍溶液:4mol/L 二异硫氰酸胍,25mmol/L 柠檬酸钠(pH7.0),0.5%十二烷基肌氨酸钠,0.1mol/L 巯基乙醇。