毛细电泳实验常见的13个问题

一、无样品峰出现 A、检查电流是否稳定: ①没有电流。 可能原因——毛细管堵塞或断裂。 解决方法——用水冲洗毛细管,并观察是否有水流出,若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂;毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。缓冲溶液需要过滤,将样品过滤或者离心去除其中的颗粒。 ②电流波动很大,直至几乎消失。 可能原因——缓冲溶液中有气泡产生或者区带中样品析出。 解决方法——将缓冲溶液超声脱气,如果还有此现象发生,则可能是样品区带有析出,可以通过降低样品浓度/延长ramp time来试图解决这一问题;对于在缓冲溶液中溶解度不高的样品则需要在缓冲溶液中加入添加剂以解决此问题。 ③电流初始值较小,后逐渐增大。 可能原因——样品进样量过大。 解决方法——减少进样量,通常进样参数设置在0.5psi,5sec左右。 ④电流正常。 可能原因:a样品浓......阅读全文

电泳槽常见问题解析

  故障一、手工粘接电泳槽的铂金电极孔处漏液  该处可能是因为电泳槽工作时间较长所至,对此应使用堵漏胶(稠合液)进行封堵即可。  故障二、模具水平电泳槽电极孔处漏液  检查电极下的密封圈是否被螺丝拧紧在正确位置或已经损坏。如有损坏需更换密封胶圈。  故障三、电泳槽有机板粘接处漏液或开胶  有机板开胶

电泳常见问题及解决方法

一、颗粒  (1)现象  在烘干后的电泳涂膜表面上有手感粗糙的、较硬的粒子,或肉眼可见的细小痱子,往往被涂物的水平面较垂直面严重,这种漆膜病态称为颗粒。  (2)产生原因   ①CED槽液PH值偏高,碱性物质混入,造成槽液不稳定,树脂析出或凝聚。 ②槽内有沉淀“死角”和裸露金属处。  ③电泳后清洗液

电泳技术阴极电泳常见问题及解决方法

  一、颗粒  (1)现象  在烘干后的电泳涂膜表面上有手感粗糙的、较硬的粒子,或肉眼可见的细小痱子,往往被涂物的水平面较垂直面严重,这种漆膜病态称为颗粒。  (2)产生原因  ①CED槽液PH值偏高,碱性物质混入,造成槽液不稳定,树脂析出或凝聚。  ②槽内有沉淀“死角”和裸露金属处。  ③电泳后清

毛细管色谱柱分析常见问题的解决

一、峰丢失(进样后没有峰出现) 1、注射器有毛病,采用新注射器做验证 2、未接入检测器或检测器不起作用,检查设定值。 3、进样温度太低,检查温度,并根据需要调整。 4、柱温温度太低,检查温度,并根据需要调整。 5、无载气流量,检查压力调节阀,并检查泄露,验证柱样品流速。 6、柱断裂,如果柱断裂是在柱

实验室电泳仪都有哪些常见问题及处理方法

电脑控制电泳仪过压报警:(1)检查电泳仪是否空载使用。(2)电泳仪是否电泳槽未加缓冲液。(3)电泳仪是否电泳槽铂金丝断。电泳仪的输出达不到设定值答:电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意1个参数恒定,电泳

实验室电泳仪都有哪些常见问题及处理方法

电脑控制电泳仪过压报警:(1)检查电泳仪是否空载使用。(2)电泳仪是否电泳槽未加缓冲液。(3)电泳仪是否电泳槽铂金丝断。电泳仪的输出达不到设定值答:电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意1个参数恒定,电泳

实验室电泳仪都有哪些常见问题及处理方法

电脑控制电泳仪过压报警:(1)检查电泳仪是否空载使用。(2)电泳仪是否电泳槽未加缓冲液。(3)电泳仪是否电泳槽铂金丝断。电泳仪的输出达不到设定值答:电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意1个参数恒定,电泳

电泳仪常见问题和操作使用

电泳仪常见问题和操作使用 一、电泳仪的输出达不到设定值 答:电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R 电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意1个参数恒定,其他参数也随之恒定;而任意1个参数变化,其他参数也随之正比变化。 如果电泳仪的输出电压U达

电泳仪常见问题和操作使用

  电泳仪常见问题和操作使用 一、电泳仪的输出达不到设定值 答:电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”:电压U=电流I×(电泳槽)电阻R 电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意1个参数恒定,其他参数也随之恒定;而任意1个参数变化,其他参数也随之正比变化。 如果电泳仪的输出电压

双向电泳常见问题解答

随着人类基因组草图完成,蛋白质组研究全面展开。作为经典蛋白质组学分离技术,双向电泳越来越被科研人员所熟知。但要想得到漂亮的双向电泳谱图,却并不那么容易。我们将针对双向电泳过程中常出现的问题进行总结,希望能给您的实验带来帮助。 本期我们重点关注双向电泳图谱中常出现的水平条纹。双向电泳水平条纹的产生主要

核酸电泳常见问题及解决方案

核酸电泳常见问题及解决方案

双向电泳常见问题解答

1. 出现垂直拖尾是什么原因? 答:有可能是蛋白没有被SDS充分包裹,适当延长平衡时间可以解决这个问题;另外也有可能是多余的DTT或者灰尘所致。 2. 为什么出现横向条纹? 答:有可能是聚焦不完全,需要根据胶条长度和PH范围以及上样量选择合适的聚焦时间;另外也有可能是样品提取及溶解和水化不完全的缘

琼脂糖凝胶电泳常见问题

 琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些?、一、DNA带模糊、1、DNA降解:琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染2、电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多系使用后,离子强度

凝胶电泳(gel-electrophoresis)常见问题分析

琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,跑出的带后面出现拖尾现象,什么原因造成的?参考见解: DNA带模糊:1、 DNA降解??避免核酸酶污染。2、 DNA上样量过多??减少凝胶中DNA上样量。3、 所用电泳条件不合适??电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应<15℃,核查所用电泳缓

琼脂糖凝胶电泳常见问题

琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些?DNA带模糊DNA降解:琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多系使用后,离子强度降解,PH值上升,

毛细管电泳色谱仪分析的关键问题

毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。由于CE溶质区带

毛细电泳仪毛细管的特点

毛细管电泳通常使用内径为25-100 μm 的弹性(聚酰亚胺)涂层熔融石英管。标准毛细管的外径为375 μm,有些管的外径为160 μm。毛细管的特点是:容积小(一根100 cm×75 μm 管子的容积仅4.4 μL);侧面/截面积比大,因而散热快、可承受高电场(100-1000 V/cm);可使用

毛细管电泳芯片毛细管凝胶电泳

芯片毛细管凝胶电泳在蛋白质组学和蛋白质分离研究中,凝胶电泳是广泛使用的分离技术。它是以凝胶等聚合物作为分离介质,利用其网络结构并依据被测组分的分子体积不同而进行分离的一种分离模式。在芯片上采用凝胶电泳模式分离蛋白质,更有利于实现分离操作的高速度和高效率。Yao等采用十二烷基磺酸钠(SDS)凝胶电泳分

毛细管柱分析常见问题的解决(1.1)

一 峰丢失(进样后没峰出现)可能的原因及采用的排除方法注射器有毛病,采用新注射器验证。

毛细管柱分析常见问题的解决(1.2)

2 未接入检测器,或检测器不起作用,检查设定值。

毛细管柱分析常见问题的解决(1.4)

4 柱温温度太低,检查温度,并根据需要调整。

毛细管柱分析常见问题的解决(1.5)

无载气流量,检查压力调节阀,并检查泄露,验证柱样品流速。

毛细管柱分析常见问题的解决(2.1-)

二 前沿峰1. 柱超载,减少进样量。

毛细管柱分析常见问题的解决(2.2)

1. 两个化合物共洗脱,提高灵敏度和减少进样量,使温度降低10~20度,以使峰分开。

毛细管柱分析常见问题的解决(2.3)

3 样品冷凝,检查进样口和柱温,如有必要可升温。

毛细管柱分析常见问题的解决(3.2)

2 柱或进样器温度太低:升温(不要超过柱最高温度)。进样器温度应比样品最高沸点高25℃.

毛细管柱分析常见问题的解决(3.3)

3 两个化合物共洗脱:提高灵敏度和减少进样量,使温度降低10~20度,以使峰分开。

毛细管柱分析常见问题的解决(3.4)

1. 柱已损坏:请更换柱。

毛细管柱分析常见问题的解决(3.5)

1. 柱污染:将柱进样端截去1~50px,再重新安装。

毛细管柱分析常见问题的解决(4.1)

四 只有溶剂峰 1. 注射器有毛病:采用新注射器验证。