siRNA脂质体Onpattro中阳离子磷脂PEG2000CDMG的作用
Onpattro,这是首款已上市的siRNA脂质体,之前AVT小编在介绍DLin-MC3-DMA时提到过siRNA脂质体Onpattro的处方,其中除DLin-MC3-DMA外还有一个新面孔PEG2000-C-DMG。那么它又是什么,阳离子磷脂PEG2000-C-DMG在siRNA脂质体Onpattro中发挥怎样的功效?与我们熟悉的DSPE-PEG2000有什么联系和区别吗? PEG2000-C-DMG在处方中的作用一是防止粒子间聚集,二是利用PEG2000的“隐形”作用实现长循环及被动靶向。那为何不用DSPE-PEG2000而是要费劲研制一个新辅料呢?根据原研公司Alnylam的研究,处方所用PEG化脂质的类型和数量不仅决定了脂质体的粒径大小,更会强烈影响基因沉默能力,明显DSPE在这一点上相较于C-DMA是不具有任何优势的。PEG2000-C-DMG可降低脂质体与细胞间的相互作用及吸附ApoE的能力,同时,使用含有......阅读全文
脂质体2000使用说明书及特点
注意事项 推荐在混合前使用Opti-MEM I低血清培养基(Cat. No. 31985-062)稀释 Lipofectamine 2000和核酸。 转染过程中勿向培养基中添加抗生素,以免造成细胞死亡。 不同批实验请保持细胞接种条件相同。 请检测无血清培养基与Lipofectamine 20
阳离子脂质材料DOTMA和DOPE在脂质体转染实验的应用
本期AVT小编给大家分享一下DOTMA和DOPE在脂质体转染实验中的应用,在前段时间,AVT产品库新添了几款新型注射级阳离子脂质材料,包括DLin-MC3-DMA、DMG-PEG2000,DOTMA等,感兴趣的小伙伴可以去我们的产品图一睹究竟,让我们接着往下看脂质体转染的那些事!脂质体转染实验步骤脂
RNAi作用机理及药物研发进展(二)
注:有些网站暂时打不开 事实上,很多制药公司在RNAi上投入了大量的资源,以 siRNA 作为治疗手段的前景诱人,siRNA 从发现到现在短短几年的时间内,第一个 RNAi 药物 Bevasiranib ( Acuity 公司)已经诞生 , 用于治疗湿性老年性黄斑变性 (AMD) 。 据报道
分子细胞中心等研发出系统性鉴定siRNA脱靶位点新方法
12月4日,Molecular Therapy–Nucleic Acids在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)吴立刚研究组,上海市计划生育科学研究所李卫华研究组与扬州大学赵雅研究组合作的研究成果Identifying Cleaved and Noncleav
脂质体中常见注射级胆固醇辅料的特性和在药剂学中的...
脂质体中常见注射级胆固醇辅料的特性和在药剂学中的应用脂质体中常见的注射级胆固醇辅料,具体有着怎样的应用呢?本期AVT小编给你好好介绍一下。高纯注射级胆固醇CHO-HP是一款怎样的辅料产品? 1 中文名称:胆固醇(供注射用) 2 商品名:CHO-HP 3 英文名称:Cholesterol (for
研究借助磷脂表面分子手性调控淀粉样蛋白纤维化过程
近日,中国科学院大连化学物理研究所生物分离与界面分子机制研究组研究员卿光焱团队和分子模拟与设计研究组研究员李国辉团队合作,设计和制备了一对手性氨基酸修饰的磷脂分子,并以此构筑手性磷脂表面,实现了对β-淀粉样蛋白(Aβ)纤维化过程的精确调控。 阿尔茨海默病(AD)是痴呆症最常见的形式,也是全球公
关于siRNA表达框架的介绍
siRNA表达框架(siRNA expression cassettes,SECs)是一种由PCR得到的siRNA表达模版,包括一个RNA pol Ⅲ启动子,一段发夹结构siRNA,一个RNA pol Ⅲ终止位点,能够直接导入细胞进行表达而无需事前克隆到载体中。和siRNA表达载体不同的是,SE
Small-interfering-RNA(siRNA)的概念
Small interfering RNA(siRNA):是一种小RNA分子(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成。SiRNA是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默。
siRNA表达载体的技术特点
多数的siRNA表达载体依赖三种RNA聚合酶Ⅲ启动子(pol Ⅲ)中的一种,操纵一段小的发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)在哺乳动物细胞中的表达。这三类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用RNA pol Ⅲ启动子是由于它可以在哺乳动物细胞中表
关于siRNA机制的基本介绍
1.长dsRNA(可来自发夹,互补RNA和RNA依赖性RNA聚合酶)被称为Dicer的内切核糖核酸酶切割。Dicer切割长dsRNA以形成短干扰RNA或siRNA;这使得分子能够形成RNA诱导的沉默复合物(RISC)。 2.一旦siRNA进入细胞,它就会被整合到其他蛋白质中以形成RISC。
siRNA表达框架的技术特点
siRNA表达框架(siRNA expression cassettes,SECs)是一种由PCR得到的siRNA表达模版,包括一个RNA pol Ⅲ启动子,一段发夹结构siRNA,一个RNA pol Ⅲ终止位点,能够直接导入细胞进行表达而无需事前克隆到载体中。和siRNA表达载体不同的是,SECs
简述脂质体的分类
1.脂质体按照所包含类脂质双分子层的层数不同,分为单室脂质体和多室脂质体。 小单室脂质体(SUV):粒径约0.02~0.08um;大单室脂质体 (LUV)为单层大泡囊,粒径在0.1~lum。 多层双分子层的泡囊称为多室脂质体 (MIV),粒径在1~5um之间。 2.按照结构分:单室脂质体,
脂质体转染的定义
脂质体是磷脂分散在水中时形成的脂质双分子层,又称为人工生物膜。
关于脂质体的简介
脂质体(liposome)是一种人工膜。在水中磷脂分子亲水头部插入水中,脂质体疏水尾部伸向空气,搅动后形成双层脂分子的球形脂质体,直径25~1000nm不等。脂质体可用于转基因,或制备的药物,利用脂质体可以和细胞膜融合的特点,将药物送入细胞内部 生物学定义:当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时,分
关于脂质体的介绍
脂质体(liposome)是一种人工膜。在水中磷脂分子亲水头部插入水中,脂质体疏水尾部伸向空气,搅动后形成双层脂分子的球形脂质体,直径25~1000nm不等。脂质体可用于转基因,或制备的药物,利用脂质体可以和细胞膜融合的特点,将药物送入细胞内部生物学定义:当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时,分子
脂质体的化学特性
(1)磷脂氧化指数:氧化指数=A233nm/A215nm;一般规定磷脂氧化指数应小于0.2。(2)磷脂量的测定:基于每个磷脂分子中仅含1个磷原子,采用化学法将样品中磷脂转变为无机磷后测定磷摩尔量(或重量),即可推出磷脂量。
脂质体的功能特点
1、靶向性和淋巴定向性:肝、脾网状内皮系统的被动靶向性。用于肝寄生虫病、利什曼病等单核-巨噬细胞系统疾病的防治。如肝利什曼原虫药锑酸葡胺脂质体,其肝中浓度比普通制剂提高了200~700倍。2、缓释作用:缓慢释放,延缓肾排泄和代谢,从而延长作用时间。3、降低药物毒性:如两性霉素B脂质体可降低心脏毒性。
脂质体的概念简介
脂质体(liposome)是一种人工膜。在水中磷脂分子亲水头部插入水中,脂质体疏水尾部伸向空气,搅动后形成双层脂分子的球形脂质体,直径25~1000nm不等。脂质体可用于转基因,或制备的药物,利用脂质体可以和细胞膜融合的特点,将药物送入细胞内部生物学定义:当两性分子如磷脂和鞘脂分散于水相时,分子的疏
脂质体的质量研究
粒径 脂质体的粒径一般为nm级,用光学显微镜和电子显微镜粗略测量其粒径和粒径分布。 测定包封率 测定包封率的关键是把未包封的游离药物从脂质体上分离出来,常用的分离方法有柱层析法、透析法、超速离心法、超滤膜过滤法等。 渗漏率 渗漏率即为脂质体贮存期间包封率的变化情况,也就是贮存期间包封量
关于转染试剂的历史背景介绍
已有众多的文献报道,脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC(蛋白激酶C)通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30);如抑制ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):3
磷脂质依照磷脂甘油骨架的分类
依照磷脂甘油骨架的分类磷脂根据甘油骨架的不同可以分为磷酸甘油脂(glycerolphospholipid)和鞘磷脂(sphingolipid)。它们都是极性脂。极性脂由极性部分(叫做极性头)和非极性部分(叫做非极性尾)组成。其中,甘油磷脂又可以根据极性头部集团的不同区分为磷脂酰胆碱(Phosphat
脂质体介导的真核细胞转染实验——脂质体进行稳定转染
实验材料哺乳动物细胞试剂、试剂盒DMEM仪器、耗材培养箱离心管实验步骤1. 接种细胞(见“脂质体介导短暂表达”步骤1)长至50%汇片。 2. 制备DNA/脂质体混合物,转染细胞(见“脂质体介导短暂表达”步骤2和3)。3. 每孔细胞加入1 ml DMEM-20完全培养液,37℃ 培养箱培养48
碳负离子的作用
碳负离子在有机合成中有着极其重要的地位。它参与了许多重要的有机合成反应,比如:酯缩合,羟醛缩合,witting反应,麦克尔加成等。认识碳负离子有助于我们认识正确的有机合成本质。
离子交换的作用
离子交换主要用于水处理(软化和纯化);溶液(如糖液)的精制和脱色;从矿物浸出液中提取铀和稀有金属;从发酵液中提取抗生素以及从工业废水中回收贵金属等。
单分子荧光检测法实现生物膜界面的精密物理测量
膜蛋白在细胞代谢中起着至关重要的作用。研究膜蛋白特定区域在生物膜上的位置,尤其是沿垂直于膜方向的位置及其动态变化,对于理解膜蛋白的功能及相关的分子机制有重要意义。一些传统的生物物理技术如核磁共振(NMR)等可以给出时间和系综平均的数据,但如何实时追踪单个膜蛋白在约4纳米厚的膜内或膜表面几纳米范围
开发肽siRNA偶联物,向肝外组织定向递送siRNA疗法!
此次合作,将超越肝脏范畴,为多种肝外疾病开启siRNA治疗机会。 行业领先的RNAi治疗公司Alnylam与行业领先的肽基药物发现公司PeptiDream近日宣布了一项许可及合作协议,发现和开发肽-siRNA偶联药物,创造多种机会,为肝外组织递送RNAi疗法。通过这一合作,2家公司将合作选择和
深度解析|脂质纳米粒(LNP)递送RNA药物全过程+如何设计LNP!
前言 脂质纳米粒(LNP)是一种具有均匀脂质核心的脂质囊泡,广泛用于小分子和核酸药物的递送,最近因其作为COVID-19mRNA疫苗递送平台的巨大成功而备受关注。由mRNA诱导的瞬时蛋白表达的应用远不止传染病疫苗,在癌症疫苗、蛋白质替代疗法和罕见遗传病的基因编辑组件等也具有巨大的潜在应用价值。然而
脂质体的质量控制
1、形态、粒径及其分布 采用扫描电镜、激光散射法或激光扫描法测定。根据给药途径不同要求其粒径不同。如注射给药脂质体的粒径应小于200nm,且分布均匀,呈正态性,跨距宜小。 2、包封率和载药量 包封率:包封率=(脂质体中包封的药物/脂质体中药物总量)×100% 一般采用葡聚糖凝胶、超速离心
脂质体的质量控制措施
1、形态、粒径及其分布采用扫描电镜、激光散射法或激光扫描法测定。根据给药途径不同要求其粒径不同。如注射给药脂质体的粒径应小于200nm,且分布均匀,呈正态性,跨距宜小。2、包封率和载药量包封率:包封率=(脂质体中包封的药物/脂质体中药物总量)×100%一般采用葡聚糖凝胶、超速离心法、透析法等分离方法
关于脂质体的质量控制介绍
1、形态、粒径及其分布 采用扫描电镜、激光散射法或激光扫描法测定。根据给药途径不同要求其粒径不同。如注射给药脂质体的粒径应小于200nm,且分布均匀,呈正态性,跨距宜小。 2、包封率和载药量 包封率:包封率=(脂质体中包封的药物/脂质体中药物总量)×100% 一般采用葡聚糖凝胶、超速离心