流式高手的养成流式细胞实验中必须注意的细枝末节...
流式高手的养成-流式细胞实验中必须注意的细枝末节总结在日常的实验室“江湖”中有很多的高手,实验结果准确,效率又高,文章高产,接下来我们就来探秘这些中的流式“高手”。 你会发现看似简单的方案设计背后,隐藏着太多问题: 我该用哪台仪器做我的实验? 这些仪器的检测通道是那些? 我需要检测那些亚群呢? 我如果想区分nTreg或者DC,我该检测那些marker呢? 回这些maker我该如何对应荧光素呢?一个CD3就这么多厂家,这么多颜色,这么多不同克隆号......完蛋了,我的选择困难症犯了。对于流式高手来说:永远都只有我们想检测哪些细胞群体。 因为他们总是能迅速的搭配好抗体,颜色设计也是那么巧妙。 而他们的配色还有一个神奇的地方,无论是哪里的仪器,都能够获得非常优秀的检......阅读全文
流式高手的养成流式细胞实验中必须注意的细枝末节...
流式高手的养成-流式细胞实验中必须注意的细枝末节总结在日常的实验室“江湖”中有很多的高手,实验结果准确,效率又高,文章高产,接下来我们就来探秘这些中的流式“高手”。 你会发现看似简单的方案设计背后,隐藏着太多问题: 我该用哪台仪器做我的实验? 这些仪器的检测通道是那些? 我需要
如何成为流式细胞高手之方案设计解析
目前已经有很多OMIP与one study的方案可以供大家所使用。直接获取经过多次优化的结果。 如果不清楚荧光素与通道的搭配关系,还可以访问:https://www.beckman.com/flow-cytometry/fluorescence-spectrum-analyzer 选择自己的仪器型号
流式细胞的具体实验步骤
一 、细胞表面标记的检测1.试剂平衡至室温。准备:消毒台面;穿戴工作服,帽子,口罩和手套,放置棉签,草纸和有盖垃圾桶(内装有消毒剂)。2.写编号纸并编号。1----IgG1/ IgG1/ IgG12----CD4/CD8/CD33----CD14/CD454----3.每管加相应的抗体10l/每种和
流式细胞的具体实验步骤
一 、细胞表面标记的检测1.试剂平衡至室温。准备:消毒台面;穿戴工作服,帽子,口罩和手套,放置棉签,草纸和有盖垃圾桶(内装有消毒剂)。2.写编号纸并编号。1----IgG1/ IgG1/ IgG12----CD4/CD8/CD33----CD14/CD454----3.每管加相应的抗体10l/每种和
流式细胞术实验步骤
流式细胞术实验:1、制备细胞悬液,计数2、分装,按照每个EP(1.5ml)管1-2*10 6个细胞分装,3500rpm,4度离心。3、用100ulPBS重悬,加入10ul大鼠血清封闭,4度避光30min。4、加入相应的荧光标记的抗体,混匀,避光,4度孵育30min。5、加入1mlPBS洗两遍。6、用
请教流式细胞的具体实验步骤
一 、细胞表面标记的检测1.试剂平衡至室温。准备:消毒台面;穿戴工作服,帽子,口罩和手套,放置棉签,草纸和有盖垃圾桶(内装有消毒剂)。2.写编号纸并编号。1----IgG1/ IgG1/ IgG12----CD4/CD8/CD33----CD14/CD454----3.每管加相应的抗体10l/每种和
流式细胞术实验抗凝剂的选择
抗凝剂的选择:外周血标本可采用EDTA、ACD或肝素抗凝。如果用同一份血标本做白细胞计数和流式分析,则应用EDTA抗凝;对于血小板分析的实验,一般不用肝素抗凝。骨髓穿刺液常用肝素或EDTA抗凝。由于相对大量的ACD会通过改变pH而影响骨髓细胞活性问题,通常不推荐用ACD作骨髓穿刺液的抗凝剂。
流式细胞仪操作和使用中的注意事项
1)光电倍增管要求稳定的工作条件,暴露的较强的光线下以后,需要较长时间的“暗适应”以消除或降低部分暗电流本底才能工作;另外还要注意磁屏蔽;2)光源不得在短时间内(一般要1h左右)关上又打开;使用光源必须预热并注意冷却系统工作是否正常;3)液流系统必需随时保持液流畅通,避免气泡栓塞,所使用的鞘流液使用
流式细胞仪操作和使用中的注意事项
1)光电倍增管要求稳定的工作条件,暴露的较强的光线下以后,需要较长时间的“ 暗适应”以消除或降低部分 暗电流本底才能工作;另外还要注意 磁屏蔽; 2)光源不得在短时间内(一般要1h左右)关上又打开;使用光源必须预热并注意冷却系统工作是否正常; 3)液流系统必需随时保持液流畅通,避免气泡栓塞,
流式细胞仪的注意事项
1. 减少非特异荧光染色 (1)细胞的活性和状态:流式细胞仪不但可探测细胞表面的荧光,也可探测细胞内的荧光。因此,如果要检测细胞表面的分子,一定要保证细胞的活性,还应尽可能保持细胞静止,通常在4度进行操作。否则,荧光抗体进入死细胞内,会产生非特异结果。 (2)封闭抗体的应用是必不可少的,因为
流式细胞术在移植中的应用
实验步骤展
流式细胞术在移植中的应用
实验步骤 展开
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关于流式细胞仪的操作和使用中的注意事项
一、流式细胞仪的操作和使用中的注意事项: 1)光电倍增管要求稳定的工作条件,暴露的较强的光线下以后,需要较长时间的“暗适应”以消除或降低部分暗电流本底才能工作;另外还要注意磁屏蔽; 2)光源不得在短时间内(一般要1h左右)关上又打开;使用光源必须预热并注意冷却系统工作是否正常; 3)液流系
流式细胞仪检测技术的实验
实验方法原理 流式细胞仪的使用一般分为三个步骤。*,是仪器前阶段,包括试剂的准备,细胞制备、细胞的荧光染色;第二,是流式细胞仪阶段,主要是仪器的操作;第三,是结果分析阶段。实验材料 淋巴细胞外周血的白细胞试剂、试剂盒 FACS缓冲液PBS叠氮钠溶液仪器缓冲液FACS清洁液FACS洗
简介流式细胞术实验样本的保存
样本的保存:理想状态下,样本应在采集后立刻进行处理和染色。肝素抗凝的血和骨髓通常可保存至48-72小时/室温(16-25);EDTA抗凝的外周血和骨髓可保存12-24小时/室温(16-25);ACD抗凝的外周血可保存至72小时/室温(16-25);对于只作胞内染色的样本,可固定细胞以长期保存。但
流式细胞仪实验安全
生物学操作技术最重要的就是安全问题,在操作流程中有诸多环节存在各种安全隐患,需要谨慎操作。 (1)电安全问题:偏振板,激光供电等都是高电压,需要特别小心。仪器内部只能由厂家人员及相关工作人员才可操作,实验人员不得冒险操作。 (2)激光安全问题:流式细胞术的激光有相应的cover保护,不得打开
流式细胞仪检测实验_用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞
实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇(不是100%乙醇)冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素(FITC)-链霉亲和素(streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机(或相当的
流式细胞仪检测实验用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞
实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇(不是100%乙醇)冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素(FITC)-链霉亲和素(streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机(或相当的
在流式细胞仪流式细胞术测量中的两种方式介绍
在流式细胞术测量中,常用的是两种散射方向的 散射光测量:①前向角(即0角)散射(FSC);②侧向散射(SSC),又称90角散射。这时所说的角度指的是激光束照射方向与收集 散射光信号的光电倍增管轴向方向之间大致所成的角度。一般说来,前向角 散射光的强度与细胞的大小有关,对同种细胞群体随着细胞截面积
流式细胞仪的仪器的操作和使用中的注意事项
1)光电倍增管要求稳定的工作条件,暴露的较强的光线下以后,需要较长时间的“ 暗适应”以消除或降低部分 暗电流本底才能工作;另外还要注意 磁屏蔽;2)光源不得在短时间内(一般要1h左右)关上又打开;使用光源必须预热并注意冷却系统工作是否正常;3)液流系统必需随时保持液流畅通,避免气泡栓塞,所使用的鞘流
流式细胞术和流式细胞分选技术的区别
这个并不是什么区别的问题。分选就是在流式分析的基础上在多加了一步而已,前面的步骤,原理都是一模一样的。分选的机器也可以用来分析。分析技术,目前绝大多数都是液滴的形式。细胞通过检测窗口以后,搜集了数据,一般的分析仪器就直接排到废液箱了。而分选仪则继续通过尺寸微小的口径,并通过振动将液体流变成不连续的小
流式细胞术和流式细胞分选技术的区别
这个并不是什么区别的问题。分选就是在流式分析的基础上在多加了一步而已,前面的步骤,原理都是一模一样的。分选的机器也可以用来分析。分析技术,目前绝大多数都是液滴的形式。细胞通过检测窗口以后,搜集了数据,一般的分析仪器就直接排到废液箱了。而分选仪则继续通过尺寸微小的口径,并通过振动将液体流变成不连续的小
流式细胞术和流式细胞分选技术的区别
这个并不是什么区别的问题。分选就是在流式分析的基础上在多加了一步而已,前面的步骤,原理都是一模一样的。分选的机器也可以用来分析。分析技术,目前绝大多数都是液滴的形式。细胞通过检测窗口以后,搜集了数据,一般的分析仪器就直接排到废液箱了。而分选仪则继续通过尺寸微小的口径,并通过振动将液体流变成不连续的小
流式细胞术和流式细胞分选技术的区别
分选就是在流式分析的基础上在多加了一步而已,前面的步骤,原理都是一模一样的。分选的机器也可以用来分析。分析技术,目前绝大多数都是液滴的形式。细胞通过检测窗口以后,搜集了数据,一般的分析仪器就直接排到废液箱了。而分选仪则继续通过尺寸微小的口径,并通过振动将液体流变成不连续的小液滴。然后根据上一步检测的
图像流式细胞仪——流式细胞术的突破
是一种台式多谱段成像流式细胞仪(Multispectral Imaging Flow Cytometry),能够同时采集6个检测通道中的细胞图像。它将流式细胞检测与荧光显微成像结合于一身,既能提供细胞群的统计数据,又可以获得单个细胞的图像,从而提供细胞形态学、细胞结构和亚细胞信号分布的信息。细胞分析
操作流式细胞仪的注意事项
1)光电倍增管要求稳定的工作条件,暴露的较强的光线下以后,需要较长时间的“暗适应”以消除或降低部分暗电流本底才能工作;另外还要注意磁屏蔽; 2)光源不得在短时间内(一般要1h左右)关上又打开;使用光源必须预热并注意冷却系统工作是否正常; 3)液流系统必需随时保持液流畅通,避免气泡栓塞,所使用
流式细胞术在生殖医学中的应用
实验步骤 展开
流式细胞术在生殖医学中的应用
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流式细胞术在生殖医学中的应用
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