流式细胞仪检测实验用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞

实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇(不是100%乙醇)冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素(FITC)-链霉亲和素(streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机(或相当的设备)实验步骤1a)多色分析:进行免疫荧光染色。重悬染色细胞于PBS,转移含5×105个细胞的细胞液至一 12 mm×75 mm圆底离心管。必须确保用于多色染色的荧光团没有被TUNEL步骤的固定剂破坏。FITC、PE和Texas红不受影响。Duochromes (PE和Texas红的结合物,如Red 613)也不受影响,但是别藻蓝素(APC)会被固定剂破坏。1b) TUNEL检测:转移含5 ×105的细胞液至一 12 mm×75 mm圆底离心管。2)加入1〜2 ml PBS,然后 4℃,300 g (IEC 269转子则为1200 r......阅读全文

流式细胞仪检测实验用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞

实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇(不是100%乙醇)冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素(FITC)-链霉亲和素(streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机(或相当的

流式细胞仪检测实验_用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞

实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇(不是100%乙醇)冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素(FITC)-链霉亲和素(streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机(或相当的

用流式细胞仪检测细胞凋亡

  细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是c

用流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas

细胞凋亡:流式细胞仪检测实验

实验方法原理 实验材料 要分析的细胞在FACS缓冲液中试剂、试剂盒 FACS缓冲液冰冷的100%乙醇(如果细胞是抗体标记的则用70%乙醇)1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙锭(PI)的PBS仪器、耗材 流式细胞仪实验步骤 1)凋亡刺激后,从培养液中沉淀所要分析的细胞,同样沉淀一

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法             实验方法原理 主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法             实验方法原理 主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞

细胞凋亡:流式细胞仪检测实验

用次GoZG1 DNA峰值计算细胞凋亡 用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞 通过TUNEL组织切面中的凋亡细胞的原位杂交             实验方法原理

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性,主要包括以下几个方面: 1.  细胞核的改变 由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变zui具特征性,主要包括以下几个方面:1. 细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

  流式细胞仪检测细胞凋亡可以:  鉴定细胞凋亡形态;  可以准确的进行凋亡细胞的计数;  可以进行特异的定性分析和定量分析。  实验原理  细胞凋亡时,在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变,这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征

流式细胞仪检测实验_TUNEL组织切面中的凋亡细胞原位杂交

实验材料要分析的新鲜组织试剂、试剂盒 含1% (m V)多聚甲醛的PBS (低温揽拌溶解过夜用之前过滤)Tris缓冲盐(TBS)含 0.1% (V V) H2O2 的 TBSTdT反应液TdT 地高辛(digo×igenin下同)-dUTP混合液2% (V V)马血清或含FBS的TBS羊抗地高辛初级

流式细胞仪检测实验TUNEL组织切面的凋亡细胞的原位杂交

实验材料要分析的新鲜组织试剂、试剂盒 含1% (m V)多聚甲醛的PBS (低温揽拌溶解过夜用之前过滤)Tris缓冲盐(TBS)含 0.1% (V V) H2O2 的 TBSTdT反应液TdT 地高辛(digo×igenin下同)-dUTP混合液2% (V V)马血清或含FBS的TBS羊抗地高辛初级

实验时间_流式细胞仪检测细胞凋亡实验

流式细胞仪检测细胞凋亡可以:鉴定细胞凋亡形态;可以准确的进行凋亡细胞的计数;可以进行特异的定性分析和定量分析。实验原理细胞凋亡时,在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变,这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性。通过流式细胞仪检测这

流式细胞仪检测细胞凋亡实验protocol

  40年来,流式细胞术一直由多色流式主导。 尽管Fulwyler发明的初代仪器基于库尔特体积,但荧光在短短几年内成为流式细胞仪主导技术。 从20世纪80年代初到现在,技术开发人员一直致力于构建能够测量更多荧光参数(我们通常将其称为“颜色”)的仪器。  最开始,Göhde在1968年首次发表关于荧光

细胞凋亡检测实验——TUNEL法

实验方法原理脱氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以掺入到凋亡细胞双链或单链DNA的3-OH末端,与dATP形成异多聚体,并可与连接了报告酶(过氧化物酶或碱性磷酸酶)的抗地高辛抗体结合。在适合底物存在下,过氧化物酶可产生很强的颜色反应,特异准确

流式细胞仪检测细胞凋亡

细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas

流式细胞仪细胞凋亡检测

一 PI单染色法  基本原理   其原理主要是根据细胞 凋亡时在细胞、亚细胞和分子 水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性,主要包括以下几个方面:1. 细胞核的改变:由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料

流式细胞仪定量分析细胞凋亡

流式细胞仪定量分析,细胞凋亡检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常细胞与坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞核凋亡细胞。流式细胞仪定量分析细胞凋亡,应用价值流式细胞仪检测具有以下特点:1)

流式细胞仪定量分析细胞凋亡

流式细胞仪检测具有以下特点:1)、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2)、可以做许多相关性分析3)、结合被检测细胞的DNA含量的分析,可确定凋亡的细胞所处的细胞周期■检测形态学及细胞膜完整性的Hoechs-PI双染色法细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性液增加,但其程度介于正常细胞和

流式细胞仪定量分析细胞凋亡

流式细胞仪定量分析,细胞凋亡检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但是其程度介于正常细胞与坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞核凋亡细胞。流式细胞仪定量分析细胞凋亡,应用价值流式细胞仪检测具有以下特点:1)

细胞凋亡检测流式细胞仪检测技术

一、固定细胞的染色方法 1)PI单染色法 方法一 1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。 2.3ml PBS洗一次。 3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。 4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。 5.400目的筛网过滤

细胞凋亡检测:流式细胞仪检测技术

细胞调亡的流式细胞仪检测技术一、固定细胞的染色方法1)PI单染色法方法一1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。2.3ml PBS洗一次。3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。5.40

细胞凋亡检测流式细胞仪检测技术

一、固定细胞的染色方法 1)PI单染色法 方法一 1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。 2.3ml PBS洗一次。 3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。 4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。 5.400目的筛网过滤

细胞凋亡检测:流式细胞仪检测技术

细胞调亡的流式细胞仪检测技术 一、固定细胞的染色方法 1 ) PI 单染色法 方法一1. 收集细胞( 1 ~ 5 )× 106 个, 500 ~ 1000r/min 离心 5min ,弃去培养液。2. 3ml PBS 洗一次。3. 离心去 PBS ,加入冰预冷的 70 %的乙醇固定, 4 ℃, 1h

细胞凋亡(TUNEL,TUNEL染色)检测技术

细胞凋亡是指为维持内环境稳定,  生物体内细胞在特定的内源或外源信号诱导下,其死亡途径被激活,并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。细胞凋亡是程序性死亡过程的一种主要形式,它涉及染色质凝聚和外周化、细胞质减少、核片段化、细胞质致密化、与周围细胞联系中断、内质网与细胞膜融合,最终细胞片段化形成许多

流式细胞仪检测实验_用次GoZG1-DNA峰值计算细胞凋亡

实验材料要分析的细胞在FACS缓冲液中试剂、试剂盒FACS缓冲液冰冷的100%乙醇(如果细胞是抗体标记的则用70%乙醇)1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙锭(PI)的PBS仪器、耗材流式细胞仪实验步骤1)凋亡刺激后,从培养液中沉淀所要分析的细胞,同样沉淀一未处理的对照培养液。重

流式细胞仪检测实验用次GoZG1-DNA峰值计算细胞凋亡

实验材料要分析的细胞在FACS缓冲液中试剂、试剂盒FACS缓冲液冰冷的100%乙醇(如果细胞是抗体标记的则用70%乙醇)1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙锭(PI)的PBS仪器、耗材流式细胞仪实验步骤1)凋亡刺激后,从培养液中沉淀所要分析的细胞,同样沉淀一未处理的对照培养液。重

TUNEL细胞凋亡检测程序

实验概要本实验用TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒检测了组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。实验原理其原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可

流式细胞仪检测细胞凋亡的原理

一、原理在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结