生物功能性外泌体制备方案(二)

近年来随着分离纯化技术的提高,关于外泌小体的研究成果颇丰;这进一步吸引了越来越多领域的课题将外泌体纳入研究对象。研究的前提是方便、高效、标准化地分离纯化外泌小体。经过近20年的探索,已经建立了超速离心法、沉淀法、色谱法、亲和纯化法等。 1经典超速离心法制备外泌体 超速离心法是制备外泌体的金标方法,但是有所局限:设备非常昂贵对经验要求较高操作时间长,有一定的安全风险100,000×g离心,操作时长超过5个半小时 在大量实践中大家逐渐认识到根据下游研究对样品的要求,以及起始样品的规模、数量,可以选择不同的外泌体制备策略。因不需要特殊的设备和试剂盒,对操作人员也没有特别的经验要求,超滤法后来居上,成为实验室中制备外泌体的通用方法。 2过滤+超滤简单两步,快捷制备外泌体 请点击查看大图 根据起始样品量选择合适规格的过滤和超滤工具 &......阅读全文

外泌体及其蛋白质组学研究

  外泌体是什么?  外泌体(Exosome),是一种能被大多数细胞分泌的微小膜泡,具有脂质双层膜结构,直径大约40-200 nm。外泌体存在于体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳等,不同组织来源的外泌体在内容物组成和功能方面存在差异,这种差异受到细胞外基质和微环境的动态调控。越来越多的证据表明,宿主

2020年自然研究热点——外泌体研究(一)

一、外泌体研究热度持续攀升外泌体(exosome)是活细胞分泌的30-200nm的囊泡,在电镜下具有非常明显单层膜结构,通常为茶托型或一侧凹陷的半球形。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体,它们广泛存在

神经细胞与外泌体研究进展

  胶质细胞与外泌体  胶质细胞占CNS细胞的90%,主要包括小胶质细胞、星形胶质细胞以及少突胶质细胞。小胶质细胞是存在于CNS的巨噬细胞,占CNS细胞总数的10%。在生理状态下,小胶质细胞主要起到免疫监视作用。脑缺血后,小胶质细胞分泌肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α

NTA用于外泌体定量的准确性

NTA可以用来外泌体定量吗?NTA可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝对浓度,但不能够以NTA所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。首先,我们必须理解NTA检测原理:该技术基于布朗运动,通过视频分析颗粒计数,可同时获取样本中颗粒的粒径和绝对浓度。因此,样本中的所有颗粒,都会被侦测并计入,而不能筛选

为什么运动可以促进外泌体的释放

长期运动后产生的外泌体,确实能够保护受损的心肌细胞。那么到底是外泌体中的哪种成分在起作用呢?研究人员对外泌体进行了NGS测序,发现游泳训练组和不运动组的小鼠外泌体miRNA有很大差别,游泳训练显著上调了一簇多个miRNA。他们将其分别在心肌细胞缺氧复氧模型中进行功能测试和筛选。发现多个miRNA,尤

细胞外泌体/微囊泡解析专题(一)

外泌体是细胞分泌的纳米囊泡(EV),其直径大小为30-150nm之间,具有闭合的脂质双分子层结构。 它几乎存在于所有体液中,并在其表面以及胞内中携带各种分子(蛋白质,脂质和RNA等物质外泌体携带大量特异性的蛋白质(如细胞因子、生长因子)以及功能性的mRNAs、miRNAs等生物活性物质,在体

NTA用于外泌体定量的准确性

  希尔博士的意见是:   NTA可以提供样本中颗粒的粒径分布和绝对浓度,但不能够以NTA所提供的浓度数值这个单一的指标来定量外泌体。   首先,我们必须理解NTA检测原理:该技术基于布朗运动,通过视频分析颗粒计数,可同时获取样本中颗粒的粒径和绝对浓度。   因此,样本中的所有颗粒,都会被侦测

梅毒螺旋体诱导巨噬细胞分泌的外泌体特征

  为了探讨梅毒螺旋体(Tp)体外诱导巨噬细胞分泌的外泌体特征及其对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖水平的影响,中国医学科学院 许卜方、王千秋等人自雄兔睾丸分离Tp。将人单核巨噬细胞(THP-1)诱导为巨噬细胞后,分为实验组(Tp刺激)和对照组(不用Tp刺激),12 h后继续培养48 h,收集巨噬

Theranostics:外泌体在生物学和转化医学中的治疗诊断作用

  近日,来自浙江大学医学院的王本、骆严课题组在Theranostics杂志上发表综述,阐述了外泌体形成和摄取的基本过程,以及阐述了外泌体在生物学中的生理学和病理学作用,并重点说明如何将外泌体改造成为转化医学中的有力工具。  外泌体是由胞吐作用释放到细胞外的纳米级细胞外脂质双层囊泡,它们几乎会由所有

血清外泌体中的miRNA作为KD诊断biomarker

研究背景皮肤粘膜淋巴结综合症(muco-cuta-meous lymph node syndrome,MCLS)又称川崎病(Kawasaki disease),是一种以全身血管炎变为主要病理的急性发热性出疹性小儿疾病。虽然已有的研究已经发现一些血来源的蛋白分子或者miRNA有潜在的诊断能力,

外泌体决定肿瘤转移的器官特异性

  一项研究表明,肿瘤细胞通过释放外泌体,使受纳器官做好准备,形成转移灶。  癌细胞通过血液由起源部位传播扩散到远处器官是癌症相关死亡的主要原因。这个过程并不随机;相反,一些种类的癌症细胞会通过一系列分子程序,优先寻找特定器官,并在该处筑巢。这种寻找目的地的行为涉及到逃避原发肿瘤的癌细胞(有时也被称

MSC来源的外泌体对骨折愈合的作用

据估计,美国每年大约有1500万新发生的骨折患者,主要是由车祸、运动伤害或工作事故引起。相当一部分的患者(10-15%)会发生延迟愈合或不愈合,这需要延长治疗或重复治疗,对治疗成本和生活质量都有很大影响。骨折的修复是一个复杂的过程,需要利用内源性的细胞再生潜力来恢复原始的骨骼结构。 间充质干细胞(M

关于外泌体的肿瘤应用研究进展

  外泌体是由多种活细胞通过内吞-融合-外排等一系列生物学机制而形成的,具有脂质双层膜结构的纳米级微小囊泡。其最早是在1983年由Johnstone RM等研究羊成熟网织红细胞过程中囊泡的形成时发现,在生理和病理条件下,都可以被一些细胞以胞吐的方式所释放,如:免疫细胞、干细胞、肿瘤细胞,且广泛分布于

外泌体与胰腺癌之间的神秘关系

  圣母大学(University of Notre Dame)研究人员表示,他们已发现了一种治疗胰腺癌的新方法。  据《合众国际社》报道,领导此次研究的是圣母大学的伊尔(Reginald Hill)教授,他的团队希望能揭示FDA批准的癌症药物中一些并不对胰腺癌产生效果的原因。研究小组发现,通过阻断

血清外泌体中的miRNA作为KD诊断biomarker

  皮肤粘膜淋巴结综合症(muco-cuta-meous lymph node syndrome,MCLS)又称川崎病(Kawasaki disease),是一种以全身血管炎变为主要病理的急性发热性出疹性小儿疾病。虽然已有的研究已经发现一些血来源的蛋白分子或者miRNA有潜在的诊断能力,但是,其有效

国自然最新热点外泌体,你-get-到了吗

1、 外泌体已成为生命科学/基础医学研究一大热点2018 年国自然基金评审结果已尘埃落定,其中医学科学部共计有 9830 项获得了基金委资助。从数据来看,热门的几个方向依然火热:外泌体、非编码 RNA、表观遗传、肠道菌群、m6A、CRISPR/Cas9 技术等,其中,涉及到外泌体的研究项目 401

外泌体与肿瘤细胞转移及恶化的关联

  肿瘤的形成和恶化过程不仅与肿瘤细胞彼此间的相互作用有关,还和肿瘤细胞和正常细胞所构成微环境的相互作用有关。例如,从很早开始科学家们就观察,在很多的肿瘤组织中浸润着正常的免疫细胞,而临床认为慢性炎症会增加产生肿瘤的风险。此外,有报告显示成纤维细胞和内皮细胞等细胞构成的肿瘤微环境,有助于肿瘤细胞的增

外泌体lncRNA介导的淋巴转移机制的揭秘

  外泌体是指包含多种RNA(环状RNA、miRNA、LncRNA和mRNA等)和蛋白质的盘状囊泡(30-200nm)。几乎所有类型的细胞均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于各种体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁等。外泌体被视为特异性分泌的膜泡,能够参与细胞间通讯。目前,有关外泌体分泌、摄取、

高效分离外泌体的方法你找到了吗

关于分离外泌体的最佳方法,仍然众说纷纭,尚无定论。在诸多方法中,尺寸排除色谱法(size exclusion chromatography,SEC)因可分离得到高纯度和浓缩的样本,被广泛用来分离生物液体样本。SEC可通过离心或重力流进行。在重力流的作用下,一个样本可以收集到多组分离组分,并可

血清外泌体中的miRNA作为KD诊断biomarker

  研究背景   皮肤粘膜淋巴结综合症(muco-cuta-meous lymph node syndrome,MCLS)又称川崎病(Kawasaki disease),是一种以全身血管炎变为主要病理的急性发热性出疹性小儿疾病。虽然已有的研究已经发现一些血来源的蛋白分子或者miRNA有潜在的诊断能

外泌体lncRNA介导的淋巴转移机制的揭秘

  外泌体是指包含多种RNA(环状RNA、miRNA、LncRNA和mRNA等)和蛋白质的盘状囊泡(30-200nm)。几乎所有类型的细胞均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于各种体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁等。外泌体被视为特异性分泌的膜泡,能够参与细胞间通讯。目前,有关外泌体分泌、摄取、

国自然最新热点外泌体,你-get-到了吗?

1、  外泌体已成为生命科学/基础医学研究一大热点2018 年国自然基金评审结果已尘埃落定,其中医学科学部共计有 9830 项获得了基金委资助。从数据来看,热门的几个方向依然火热:外泌体、非编码 RNA、表观遗传、肠道菌群、m6A、CRISPR/Cas9 技术等,其中,涉及到外泌体的研究项目

外泌体在肿瘤诊断中的研究进展

外泌体在1983年被*报道,在网织红细胞中发现,但由于早期对外泌体认识的不足,所以在起初,其仅被人们认为是细胞外的“垃圾”。在正常组织细胞中,外泌体主要参与调节免疫应答反应以及细胞的突触生理功能。在病理组织细胞中,人们主要是研究外泌体在肿瘤诊治中的作用和功能。研究表明,外泌体通过细胞间的交流通讯广泛

唾液DNA/RNA/外泌体等收集保存工具汇总

为什么有人吃东西总是那么“津津有味”,说话总能“津津乐道”?那是因为他们的唾液质量好,产生唾液的能力也好。您有仔细观察过自己舌头上的味蕾是什么样子吗?味蕾就像小触角在舌头上面飘着,如果没有唾液的滋润,舌头是干的,味蕾的功能就会退化,那么你吃什么东西都会是一个味儿:味同嚼蜡。我们吃东西觉得好吃,靠的是

外泌体吸入疗法有望治疗肺纤维化

  来自北卡罗莱纳州立大学的一项最新研究表明,通过雾化吸入的方式输送肺干细胞分泌物(包括外泌体和和其他细胞分泌因子)可修复小鼠和大鼠因肺纤维化所致的肺损伤,这项工作为肺纤维化患者提供了一种潜在的无创治疗手段。本文通讯作者程柯教授是 Randall B. Terry Jr. 再生医学杰出教授,北卡罗莱

嵌合外泌体提高肿瘤免疫治疗效果。

外泌体是细胞分泌产生的一种囊泡型天然生物颗粒,在体内具有独特的转运路径和生物学功能,以此创建的新剂型有望在体内复杂环境下实现精准递送和预期疗效,在肿瘤个体化治疗领域具有广阔的应用前景。 北京时间2021年10月14日,中国科学院过程工程研究所(以下简称过程工程所)生化工程国家重点实验室科研

从外泌体角度探讨病毒感染研究思路

  一场突如其来的疫情使得这个2020年开局显得异常不同。在这场没有硝烟的战役面前,我们广大一线医务工作者及千千万万的广大人民群众万众一心,全力抗疫,相信在不久的将来定能彻底战胜它。   自打人类出现以来,人类和病毒的战争就没有停止过。这次战役的直接敌人是新型冠状病毒,作为一个新的RNA

Nature:外泌体还能用于胰腺癌治疗

  生物探索专访过的安德森癌症中心的Raghu Kalluri教授又有了新的研究进展:对于外泌体的遗传操作,可能为胰腺癌提供一种新的治疗方法。相关文章于6月7日在Nature在线发表。  Raghu Kalluri教授之前的研究确定了外泌体可以用来诊断胰腺癌,但这些最新的发现是让基因工程修饰的外泌体

关于外泌体保存的常见问题的解答

希尔博士在接受外泌体NTA检测的技术咨询时,经常会被问到外泌体保存相关的问题。譬如:→我的外泌体已经在4度放了一周,还能做检测吗?→我是1个月前提取的外泌体,一直放在-80度冰箱,还能做粒径检测吗?→我的样本放在-80度冰箱两个月了,还能提取外泌体做检测吗?→我在沈阳,寄样本去上海做检测,可以用冰袋

外泌体NfL,轻度创伤性脑损伤后远隔症状的诊断性生物...

导读持续轻度创伤性脑损伤(mTBI)是一种复杂的、异质性的损伤,其病理机制包括神经轴索损伤和血管损伤,并伴有强烈的炎症反应。机械组织损伤后,受损细胞释放外泌体到胞外空间。外泌体可以穿过血脑屏障,并可以从外周循环系统中分离出来,因此可以很容易地从外周循环中检测其含量。外泌体所携带的物质可以使研究人员更