如何清洁移液器以减少移液污染造成的PCR检测假阳性风险

对于大量进行PCR的实验室来说,移液器的污染造成的假阳性并不是一个罕见的情况。 PCR尤其是RT-PCR技术已经逐渐成为疾病诊断的标准方法。如近期流行的新冠(COVID-19)疫情,RT-PCR结果即为诊断标准之一。对于PCR检测,由于实验室设备的污染造成的假阳性结果也不容忽视。尤其是在样本量极大,PCR仪连续工作期间,检测间往往都是封闭环境,气溶胶弥漫,仪器极易污染。而移液器往往是离样品最近,使用最频繁的仪器,不论是吸液过程中,还是在操作环境中,都非常容易被污染。污染的移液器可能会将污染的样品或核酸引入后续样品或者PCR反应体系中导致检出信号而出现假阳性结果。 我们以德国BRAND 的Transferpette® S移液器为例,介绍如何清洁移液器以减少移液器污染造成的假阳性风险。德国BRAND 的Transferpette® S移液器具有易于拆卸维护的优点,配件更换容易,并具有易校准技术,无需工具即......阅读全文

如何清洁移液器以减少移液污染造成的PCR检测假阳性风险

对于大量进行PCR的实验室来说,移液器的污染造成的假阳性并不是一个罕见的情况。 PCR尤其是RT-PCR技术已经逐渐成为疾病诊断的标准方法。如近期流行的新冠(COVID-19)疫情,RT-PCR结果即为诊断标准之一。对于PCR检测,由于实验室设备的污染造成的假阳性结果也不容忽视。尤其是在样本量极大,

造成移液器移液误差的因素大全

可能造成移液误差的因素→确定影响因素的方法→避免误差的方法1、气压变化对移液器调节影响→观察测试环境中气压计→按照制造商建议的方法操作2、被移取液体与水的密度不同对移液的影响→比较被移取液体与水的密度→观察用户相关信息,采用不同的移液方式3、被移取液体与水的水汽压力不同对移液的影响→移液过程中,液体

导致PCR假阳性的污染源

 PCR反应的特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。一、标本交叉污染源:收集标本的容器:标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;吸样枪:标本核酸模板在提取过程中,由于污染导致标本间污染;气溶胶:zui可能

PCR的假阳性和假阴性如何解释

假阳性假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。产生的原因有:①引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行 PCR 扩增时,扩增出的 PCR 产物为非目的序列;②靶序列太短或引物太短;③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有:操作轻柔

高白细胞计数造成hCG检测假阳性

hCG是妇科最常见的检查项目,由于其对妊娠状况以及妇科肿瘤的诊治具有极为重要的价值,因此临床对其检测准确程度要求较高。然而,现实的情况是hCG的检测性能并不尽如人意。近两年来的Clinical Chemistry刊登了多篇关于hCG检测假阳性和假阴性的论文,提醒广大实验室医学工作者注意hCG检测

造成HBsAg检测出现假阳性的几种原因

造成HBsAg检测出现假阳性的原因可能会有以下几种:  1. 待测标本溶血或含有血细胞。  2. 待测标本长菌或其它原因混浊。  3. 洗板时洗涤液溢出,污染其它孔。  4. 洗板机内部管道有真菌生长。  5. 洗板机设置不当。  6. 手工洗板时,拍干用纸未更换。  7. 实验中,实际孵育时间过长

如何选购优质的移液器(移液枪)

移液器的选择,一般注意从以下几个方面进行考虑:1.产品性能,即移液器的准确性和重复性对于绝大多数用户而言,购买之前检测产品性能既有难度又无必要。因此,主要还是依据制造厂商提供的技术数据。但在这里还是要说明两点:其一,不要轻易相信卖家的口头承诺,一定要查阅制造商提供的书面材料;其二,在全球移液器市场上

造成PCR假阴性的原因

PCR的假阴性在检验工作中仍很严重,并且用些因素经常 被人忽略,严重的影响了PCR的使用。可以想象一种假阳性和假阴性都很高的项目,有什么样的诊断价值。造成PCR假阴性的原因是复杂 的,也是多样的。主要有:1.PCR仪本身的质量问题。PCR仪设计原理上的差异和经常出现的质量问题(如:温控不准等)给临床

造成PCR假阴性的原因

PCR的假阴性在检验工作中仍很严重,并且用些因素经常 被人忽略,严重的影响了PCR的使用。可以想象一种假阳性和假阴性都很高的项目,有什么样的诊断价值。造成PCR假阴性的原因是复杂 的,也是多样的。主要有:1.PCR仪本身的质量问题。PCR仪设计原理上的差异和经常出现的质量问题(如:温控不准等)给临床

什么是PCR假阳性?

假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。产生的原因有:①引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行 PCR 扩增时,扩增出的 PCR 产物为非目的序列;②靶序列太短或引物太短;③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有:操作轻柔,防止

移液器的移液模式

  1)样品混匀模式,(PIPmix Mode)   2)反向吸液模式(revPIP Mode)该模式专为吸高黏度,高蒸汽压或发泡液体所设计。   3)电泳上样模式(GEL Mode) 以设定的移液量会以较快可调的速度进行吸液,然后以较慢的速度进行排液,以免扩散。该模式在1000ul量程移液器时。 

PCR实验室的污染来源

1、样本间交叉污染:收集样本的容器被污染或样本密封不严外溢;不同样本移液时忘记更换枪尖或未使用带滤芯枪尖;移液器等实验器具及耗材未及时消毒灭菌;不同样本同时开盖或样本剧烈震荡、反复吹吸导致气溶胶形成扩散,相互交叉污染。2、实验试剂污染:主要是在 PCR 组分试剂加样过程中,由于移液器、容器、阴性对照

PCR假阳性产生原因分析

假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。产生的原因有:①引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行 PCR 扩增时,扩增出的 PCR 产物为非目的序列;②靶序列太短或引物太短;③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有:操作轻柔,防止

什么是菌落pcr假阳性

利用菌落作为模板进行PCR扩增,验证该菌落里是否带有目标片段。但是由于PCR是一个级联放大的过程,所以即使菌落中不含有目标片段,而是菌落表面沾有一部分之前连接,转化中用的目标DNA,也会导致PCR获得扩增条带,从而误认为这个菌落已经带有了目标片段,称之为假阳性。可以通过提质粒酶切,或者测序验证,排除

PCR实验中假阳性和假阴性的防治

1,标本采集必须合格,否则不做。2,严格按照操作规程,避免人为实验误差。3,用于操作的各种仪器,加样器,必须通过审核验收,仪器选贵的,进口的!4,最主要的就是试剂,选择公认的,优质试剂

移液器移液技法—入水时间和移液速率

相信每一个在实验室工作人员都有使用移液器的经验,也要求移液器能有高准确度跟精确度,但是其实除了移液器本身的准确度和精确度会影响到我们的移液结果之外,移液器的使用技法也会对我们的移液结果产生影响。为了能获得最佳结果,确保实验的准确性,我们需要采用良好的移液技法。莱贝将向您介绍关于获得最佳移液效果的技巧

移液器的移液的方法介绍

  移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。这时可以采取两种移液方法。  一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接

移液器的移液的方法介绍

  移液之前,要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。吸取液体时,移液器保持竖直状态,将枪头插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放几次液体以润湿吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时)。这时可以采取两种移液方法。  一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至第一停点,然后慢慢松开按钮回原点。接

移液器种类与移液操作

正确的移液是实验成功的保障,在实验室工作的每一个人都需要移液操作,但是你知道关于移液器一共有多少种类吗?都是如何应用的呢?在实验室中,几乎没有一项工作像移液一样普通了。也许正是因为如此普通、简单,所以,没有得到人们的关注吧。但就是这样一个最为普通、简单工作却对检测实验的结果有着至关重要的影响,那么了

电子移液器不同的移液方式

电子移液器是最新研发出来的产品,目前已推出单道电子移液器。独特的设计符合人体工程学原理。多种移液模式,可以由客户根据实验的要求来选择。样品混匀模式反向吸液模式:该模式专为吸高黏度,高蒸汽压或发泡液体所设计。电泳上样模式:以设定的移液量会以较快可调的速度进行吸液,然后以较慢的速度进行排液,以免扩散。该

电子移液器不同的移液方式

电子移液器是最新研发出来的产品,目前已推出单道电子移液器。独特的设计符合人体工程学原理。多种移液模式,可以由客户根据实验的要求来选择。样品混匀模式反向吸液模式:该模式专为吸高黏度,高蒸汽压或发泡液体所设计。电泳上样模式:以设定的移液量会以较快可调的速度进行吸液,然后以较慢的速度进行排液,以免扩散。该

电子移液器不同的移液方式

电子移液器是最新研发出来的产品,目前已推出单道电子移液器。独特的设计符合人体工程学原理。多种移液模式,可以由客户根据实验的要求来选择。样品混匀模式反向吸液模式:该模式专为吸高黏度,高蒸汽压或发泡液体所设计。电泳上样模式:以设定的移液量会以较快可调的速度进行吸液,然后以较慢的速度进行排液,以免扩散。该

如何彻底清洁移液器呢?

如何彻底清洁移液器呢?(1)首先是移液器外部清洁基本的外部清洁可以使用柔软的布蘸取消毒液擦拭。消毒液的可选的类型有:1.84消毒液(原液按照提供的指导进行稀释)2.70%的酒精3.对于附着性的污渍,如染色性实验试剂的残留可以使用60%的异丙醇擦拭;使用消毒液或清洁剂擦拭后,需要用布再蘸取水擦拭。(2

核酸检测常态化,遇到“假阳性”该怎么办?

新型冠状病毒感染引起的肺炎疫情至今仍在全球肆虐,且感染病例数在突破2000万后仍在继续攀升。经过全国上下艰苦努力,我国新冠肺炎疫情防控向好态势进一步巩固,为全面落实“外防输入、内防反弹”的总体防控策略,防控工作已从应急状态转为常态化。随着各地新建符合安全级别的PCR实验室与核酸检测技术的普及,病毒核

实验室移液从移液管到移液器的升级之旅

在遥远的一百多年前,实验室里的精英们开始用移液管来转移液体。所谓移液管,就是一根空心的玻璃管,上面标着一到N个刻度。把这根玻璃管插到液体里面,在管子的另一头用嘴(刚开始,我们的精英们只能用他们宝贵的嘴巴来干这个活)或洗耳球把液体吸到管子里,而上面的刻度则告诉我们里面有多少液体了。在吸满我们需要的量之

如何进行移液器(移液控制器)的维护保养

 移液器是生物\化学实验室常用的工具,特别在生物实验室中微量移液器应用更为广泛,因为使用方便,度高,成为实验室*的仪器。        因为技术的发展,目前市场上移液器品牌繁多,鱼目混杂,常用的主要以进口品牌为主:eppendorf(艾本德)、brand(普兰德)、axygen(爱思进)、corni

PCR产物的假阳性的相关问题介绍

  出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。  引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。  靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:

注意:异嗜性抗体造成血hCG假阳性

所谓异嗜性抗体,就是指体内存在的可以识别动物抗体的抗体。尽管其在人体内并不会引起任何不适,但其却是免疫学检测的一块“心病”:因为其可以干扰很多免疫学检测过程,造成结果假阳性或假阴性。最近,Clinical Biochemistry就刊登了一则异嗜性抗体干扰HCG检测的病例,笔者进行了一些概括和总结,

PCR-反应出现假阳性结果原因

1 ) 引物设计不合适: 选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而,在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 2 ) 靶序列或扩增产物的交叉污染: 这种污染有两种原因: 一是整个基因组或大片段的交叉污染,导致假

菌落pcr会出现假阳性结果吗

最近做酶切连接转化,最后做鉴定时,以菌落为模板进行PCR时可以见到有目的条带;当把菌落接种到LB液扩菌后,以菌液为模板进行PCR时却什么东东都没有?请问会是什么原因啊?多多指教啊!建议重新以菌落为模板进行PCR检测,再重新以菌液为模板进行PCR检测,因为菌落或者菌液PCR假阳性的几率还是比较高的。但