质谱常用离子源

无信号/荧光强度弱 不正确的信号补偿:检查流式细胞仪阳性单一颜色对照是否正确,通道和补偿设置是否能正确地捕获所有粒子;没有足够的抗体来检测:增加抗体的量/浓度;无法接近细胞内目标:检查目标蛋白是否在细胞内。 对于胞内染色,确保有足够的通透性。为防止细胞表面蛋白质的内化,该过程应用冰冷的试剂,在冰上或 4 °C进行,以终止一切反应。加入叠氮钠可防止表面抗原的修饰和内化带来的荧光强度的损失。对于细胞系染色,胰蛋白酶可以引起细胞表面蛋白质的内化,尤其是细胞表面分子,可能需要更温和的分离方法; 细胞内染色结合荧光分子太大:对细胞内染色实验,荧光分子应具有较小的分子量。大分子量荧光染料会降低抗体的动力和其进入细胞的可能性; 激光器未对齐:确保流式细胞仪的激光器正确对齐,必要时通过运行液流检查微球来调整路线。如果激光器不能正确对准或发生漂移时,您可能需要考虑联系此机的客服; 目标蛋白不存在或处于低水平表达:确保组织或细胞类型表......阅读全文

现代流式细胞仪采用的激光器

v现代流式细胞仪采用的激光器大多为气冷式氢离子激光器,常用的激光束波长为488nm,15mW。

流式细胞术之染料选择那些事儿

很多朋友面对各种各样颜色的流式抗体,在选择及搭配上就犯了难,在此我们需要了解下流式细胞仪的各个激发光及各个接收通道是如何工作的、常见的荧光素有哪些、这些荧光的特性是什么样的。了解了这些,选择抗体和搭配不同的颜色就变得非常简单了。 我们再回过头来看看流式细胞仪的原理,熟悉一下流式细胞仪的光路系统。  

流式抗体选择

很多朋友面对各种各样颜色的流式抗体,在选择及搭配上就犯了难,在此我们需要了解下流式细胞仪的各个激发光及各个接收通道是如何工作的、常见的荧光素有哪些、这些荧光的特性是什么样的。了解了这些,选择抗体和搭配不同的颜色就变得非常简单了。我们再回过头来看看流式细胞仪的原理,熟悉一下流式细胞仪的光路系统。从这张

荧光素有哪些种类?

  异硫氰酸荧光素:最大发射波长为520~530nm,呈现明亮的黄绿色荧光,适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪。  藻红蛋白:最大发射波长为575nm,适用于所有配备488nm氩离子激光器的流式细胞仪。  德州红:一种串联荧光素,由PE和TexasRed组合而成,最大发射波长为615n

流式细胞术的3大要素

  一、流式细胞术的3大要素  1. 流式细胞仪:现在市面上有多种型号的流式细胞仪,但其基本结构都是相同的,分析性流式细胞仪有液流系统、光路系统、监测分析系统。  (1)液流系统  (2)光路系统  光路系统始于激光器,其分类分法很多,最常用的分类方法是根据其发射的激光的波长来分,如常见的有488n

流式细胞仪光源的那点事

激光是一种相干光源,它能提供单波长、高强度及稳定性高的光照,是细胞微弱荧光快速分析的理想光源。细胞处在快速运动的状态,每个细胞经过光照区的时间仅为微秒左右,每个细胞所携带荧光物质被激发产生荧光信号的强弱与被照射的时间和激发光的强度有关,只有细胞接受到足够的光照,才能产生相应可被检出的信号。通常小型流

跟着论文做实验:凋亡的多参数检测

  大家都知道,在细胞凋亡的早期,线粒体膜电位的下降是一个标志性的事件。而对于线粒体膜电位的检测,JC-1这种亲脂性阳离子染料是个很好的工具,也使用了很多年。  当线粒体膜电位较高时,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,产生红色荧光;而当线粒体膜电位较低时,JC-1不能聚集在线粒体的基质中,此

中生医疗流式细胞仪

SinoCyte  流式细胞仪中生医疗科研型流式细胞仪SinoCyte具有自动分析、自动荧光补偿调节功能,操作简单高效,检测结果精准。中生医疗科研型流式细胞仪SinoCyte高配置3激光15色18个检测参数(15个荧光和3个散射光),具有高分辨率、高灵敏度和高稳定性等特点。全自动的检测流程,采集/分

流式细胞仪荧光补偿调节方法

  荧光补偿是指修正荧光光学信号在探测器之间相互渗漏并被数字化检测的过程。自单激光双色分析出现后,此过程变得十分重要。每种荧光素分子都具有自身的光谱发射范围。这些发射光谱之间存在相互叠加,在某些情况下此现象十分明显。  举例来说,如下图为FITC与PE荧光发射光谱的叠加情况。在一个双探测器系统中,可

流式细胞仪检测原理

流式细胞仪检测原理如下:流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指

Cobolt激光器在生物分析和光学测量中的应用研究

瑞典Cobolt AB公司致力于研发生产半导体泵浦固体激光器和半导体激光器,波长范围覆盖:紫外、可见、近红外,因其优秀的性能特点和小巧紧凑的外形设计,广泛应用于:生物分析、拉曼检测、全息术、激光投影、RGB光源,得到广大科学实验室和OEM客户的认可。新势力光电携手Cobolt公司为中国客户提供高端的

肿瘤细胞的标记及活体荧光成像

摘要 以绿色荧光蛋白( GFP) 作为标记基因转入人类肺癌细胞系(ASTC2a21) , 经800 mg/ L G418 筛选, 获得5 株高表达细胞系. 利用流式细胞仪对GFP 表达的稳定性进行了初步研究, 结果表明本实验中有些细胞株间GFP 表达稳定性有显著差异( P < 0101) . 将稳定

多色流式实验荧光素的选择(一)

如今,流式细胞术已经成为一项功能强大的技术,可在数秒内对数千个单个细胞或其他颗粒的多项参数进行分析。在流式细胞分析中,荧光素受到一定波长的激光激发后,释放出的能量能发射出一定波长的荧光,因此我们在选择荧光素时应注意它们的激发波长和发射波长,以选择正确的激光器和荧光组合。随着多色流式细胞仪的出现,新荧

流式细胞仪入门

目录前言第1章 综述第2章 液流系统第3章 散射光信号及荧光信号  3.1 散射光信号   3.2 荧光信号第4章 光电系统  4.1 光平台   4.2 光学滤片   4.3 信号探测器   4.4 阀值第5 章 数据分析  5.1 数据采集及显示   5.2 设门   5.3 细胞亚群的数据分析

流式细胞仪检测原理

流式细胞仪检测原理如下:流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指

流式细胞仪检测原理

流式细胞仪检测原理如下:流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指

流式细胞仪检测原理

流式细胞仪检测原理如下:流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指

一机通用!Cytek携全光谱流式细胞仪亮相细胞生物学大会

  分析测试百科网讯 2021年4月14日,中国细胞生物学学会2021年全国学术大会在重庆悦来国际会议中心盛大开幕,Cytek公司在午餐卫星会上,介绍了本公司的明星产品Cyek®Aurora全光谱流式细胞仪。会议现场Cytek午餐卫星会  SpectroFlo®软件提供从QC到数据分析的直观工作流程

智能激光器模块使台式细胞仪更灵活

  通过使用可更换的激光器,新一代台式流式细胞仪(例如艾森生物公司的NOVOCYTE™流式细胞仪)兼具卓越的性能和可定制的功能,从而催生了一种经济高效的细胞分析平台  说明:艾森生物(杭州)有限公司即ACEA Biosciences公司  作者:MATTHIAS SCHULZE,相干公司。  流式细

流式细胞仪分析中荧光测量的应用

  荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激光激发后产生,发射的荧光波长与激发光波长不相同。每种荧光染料都有特定的激发波长,激发后又产生特定波长荧光。通过一些波长选择通透性滤光片,可将不同波长的散射光、荧光信号区分开。选择不同的单克隆抗体及荧光染料可以利用流式细胞仪同时测定一个细胞上的多个不同特

流式细胞仪标本制备荧光标记法

实验方法原理活细胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备,染色后也能在荧光显微镜下进行观察,在某些实验条件下,活细胞免疫荧光染色后的特异性和敏感性要优于滴片固定的常规间接免疫荧光的结果。活细胞表面保留有较完整的抗原或受体,先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合,再用荧光标记的第二抗体结合,

关于流式细胞仪的荧光信号的介绍

  在实际使用中,仪器首先要对光散射信号进行测量。当光散射分析与荧光探针联合使用时,可鉴别出样品中被染色和未被染色细胞。光散射测量最有效的用途是从非均一的群体中鉴别出某些亚群。  荧光信号主要包括两部分:①自发荧光,即不经荧光染色细胞内部的 荧光分子经光照射后所发出的荧光;②特征荧光,即由细胞经染色

如何用流式细胞仪分析荧光强度

荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激光激发后产生,发射的荧光波长与激发光波长不相同。每种荧光染料都有特定的激发波长,激发后又产生特定波长荧光。通过一些波长选择通透性滤光片,可将不同波长的散射光、荧光信号区分开。选择不同的单克隆抗体及荧光染料可以利用流式细胞仪同时测定一个细胞上的多个不同特征。

如何用流式细胞仪分析荧光强度

荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激光激发后产生,发射的荧光波长与激发光波长不相同。每种荧光染料都有特定的激发波长,激发后又产生特定波长荧光。通过一些波长选择通透性滤光片,可将不同波长的散射光、荧光信号区分开。选择不同的单克隆抗体及荧光染料可以利用流式细胞仪同时测定一个细胞上的多个不同特征。

如何用流式细胞仪分析荧光强度

荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激光激发后产生,发射的荧光波长与激发光波长不相同。每种荧光染料都有特定的激发波长,激发后又产生特定波长荧光。通过一些波长选择通透性滤光片,可将不同波长的散射光、荧光信号区分开。选择不同的单克隆抗体及荧光染料可以利用流式细胞仪同时测定一个细胞上的多个不同特征。

流式细胞仪分析中荧光测量的应用

  荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激光激发后产生,发射的荧光波长与激发光波长不相同。每种荧光染料都有特定的激发波长,激发后又产生特定波长荧光。通过一些波长选择通透性滤光片,可将不同波长的散射光、荧光信号区分开。选择不同的单克隆抗体及荧光染料可以利用流式细胞仪同时测定一个细胞上的多个不同特

流式细胞仪分析中荧光测量的应用

  流式细胞仪分析中荧光测量的应用,快来跟着小编了解一下吧!  荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受激光激发后产生,发射的荧光波长与激发光波长不相同。每种荧光染料都有特定的激发波长,激发后又产生特定波长荧光。通过一些波长选择通透性滤光片,可将不同波长的散射光、荧光信号区分开。选择不同的单克隆抗

流式细胞术的基本理论

1. 工作原理流式细胞仪主要由流动室及液流系统、激光器及光学系统、光电管及检测系统、计算机及分析系统四个部分组成。待测细胞被制备成单细胞悬液,经特异性荧光染料染色后置于专用样品管中,在气体压力推动下被压入流动室,流动室内充满鞘液(不含细胞或微粒的缓冲液),在高压作用下从鞘液管喷出包裹细胞,使细胞排成

会当击水三千里┃流式细胞仪主要厂商的新品与经典

  流式细胞仪(Flow Cytometer)是一种在液流中快速测量和分析细胞特性的仪器,它将现代物理电子技术、激光技术、计算机技术等多种高新技术融为一体。流式细胞仪诞生已50多年了,应用领域从最初的免疫学研究,到现在的肿瘤学、细胞生物学、分子生物学等,在医院、疾控、制药、环境、高校和科研院所等行业

CytoFLEX流式细胞仪的性能评估

流式细胞仪的性能评估,是评定仪器能否胜任高复杂性流式应用的检测标准。根据流式细胞仪的性能评估标准,对CytoFLEX流式细胞仪的以下指标进行了评估:1、检测灵敏度2、动态范围3、群体分辨能力4、线性度5、稳定性6、可重复性7、对微颗粒的检测能力评估工作在以下单位进行:La Jolla生物工程研究所普