质粒提取的小技巧
实验室里经常听到这样的抱怨：实验没做好，实验没结果，心情郁闷。但其实静下心来查找原因，往往是由于操作上面的不认真，或是一些小小的细节没有注意到，以下是10个实验室日常小技巧。 主题： 关于质粒提取的小技巧 内容： 现在用质粒提取试剂盒非常方便，而且菌体培养后，可以多管浓缩提取，提到的质粒量多，可以-20℃保存，以后用于酶切、转化等实验，可以提前跑个胶，只要不降解，就可以继续用，避免每次要用，都要培养一遍再提取一遍。 1.质粒DNA提取 提取质粒的时候，最后一步的酒精挥发很关键，基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一点时间，最好是空调吹热风，或是37度温箱放长一点的时间，我试过室温过夜，酶切很好。 将amp浓度提高到200μg/mL，下班前接种，次日一早收获菌体，此时OD虽然不高，质粒丰度却不一般。菌体量少些，操作体积(管数......阅读全文
质粒提取的小技巧
实验室里经常听到这样的抱怨：实验没做好，实验没结果，心情郁闷。但其实静下心来查找原因，往往是由于操作上面的不认真，或是一些小小的细节没有注意到，以下是10个实验室日常小技巧。 主题： 关于质粒提取的小技巧 内容： 现在用质粒提取试剂盒非常方便，
质粒提取的小技巧
实验室里经常听到这样的抱怨：实验没做好，实验没结果，心情郁闷。但其实静下心来查找原因，往往是由于操作上面的不认真，或是一些小小的细节没有注意到，以下是10个实验室日常小技巧。 主题： 关于质粒提取的小技巧 内容： 现在用质粒提取试剂盒非常方便，而且菌体培养后，可以
质粒提取的小技巧
现在用质粒提取试剂盒非常方便，而且菌体培养后，可以多管浓缩提取，提到的质粒量多，可以-20℃保存，以后用于酶切、转化等实验，可以提前跑个胶，只要不降解，就可以继续用，避免每次要用，都要培养一遍再提取一遍。 提取质粒的时候，后一步的酒精挥发很关键，基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这
DNA－提取小技巧
很多人都有上面这样的想法吧？其实我当初也这样的，结果呢？怎么也提不好，一提提了好几个月呢。DNA 提取还真是说起来容易、做起来难。首先大家得明确一点，DNA 是遗传信息的载体，获得高分子量、高纯度的 DNA 是你开展后续测序、杂交等实验的前提。所以，注意了，要高分子量、高纯度哦。我相信肯定有很多人一
质粒提取
一、导论已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA，这些方法都含有以下3个步骤:细菌培养物的生长。细菌的收获和裂解质粒DNA的纯化。(一)细菌培养物的生长从琼脂平板上挑取一个单菌落，接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长)，然后从中纯化质粒，质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载
质粒提取
一、导论已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA，这些方法都含有以下3个步骤:细菌培养物的生长。细菌的收获和裂解质粒DNA的纯化。(一)细菌培养物的生长从琼脂平板上挑取一个单菌落，接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长)，然后从中纯化质粒，质粒的提纯几乎总是如此。现在使用的许多质粒载
质粒DNA的提取
实验概要 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。实验原理 碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0～12.5这个狭窄的范围内，线性的DNA双螺旋结构解开而被变性，尽管在这样的条件下，共价闭环质粒DNA
质粒提取（三）
10)按步骤8)所述再次轻轻地吸去上清，这一步操作要格外小心，因为有时沉淀块贴壁不紧，去除管壁上形成的所有乙醇液滴，打开管口，放于室温直至乙醇挥发殆尽，管内无可见的液体(2-5)分钟。11)用50μl含无DNA酶的胰RNA酶(20μg/ml)的TE(pH8.0)溶解核酸稍加振荡，贮存于-20℃。注:
质粒提取（二）
2)加200μl新配制的溶液Ⅱ。溶液Ⅱ0.2mol/L NaOH(临用前用10mol/L贮存液现用现稀释)1%SDS盖紧管口，快速颠倒离心管5次，以混合内容物。应确保离心管的整个内表面均与溶液Ⅱ接触。不要振荡，将离心管放置于冰上。3)加150μl用冰预冷的溶液Ⅲ溶液Ⅲ5mol/L乙酸钾 60ml冰乙
质粒如何提取
需要掌握技能1. 质粒转化具体操作步骤： 将1ul 质粒DNA加入1.5ml的离心管； 将感受态细菌（competent cells）从－70℃冰柜中取出，快速吸取50ul感受态细菌，加入含质粒DNA的1.5ml的离心管； 轻轻地旋转以混匀内容物，在冰中放置30～60 min； 42度热休克
提取质粒的主要步骤
质粒抽提方法即去除 RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。提取质粒DNA的方法有很多种，从提取产量上分可分为微量提取、中量提取、大量提取，从使用仪器上分可分为一般提取和试剂盒方法提取，从具体操作方法分可以分为碱裂解法、煮沸法、牙签法等，各种不同的方法各有
质粒DNA提取实验
实验方法原理 质粒多为一些双链、环状的DNA分子，是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作，进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。 提取质粒的基本步骤分为三步：①细菌的培养和质粒的扩增②细菌菌体的裂解③质粒DNA的纯化实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒
质粒提取实验步骤
实验原理现在较常用的质粒提取方法有三种:碱裂解法、煮沸法和去污剂裂解法，前两种方法较为剧烈，适用于较小的质粒（＜15Kb），而去污剂裂解法则比较温合，一般用于分子量较大的质粒（＞15Kb）。碱裂解法是一种最广泛使用的制备质粒DNA的方法。其原理为：染色体DNA远大于质粒DNA，且染色体DNA为线状分
质粒DNA提取实验
碱解法SDS碱裂解法（试剂盒提取）实验方法原理碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性，再将pH值调至中性使其复性，复性的为质粒DNA，而染色体DNA不会复性，缠结成网状物质，通过离心除去。实验材料大肠杆菌
质粒DNA提取实验
实验方法原理 碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性，再将pH值调至中性使其复性，复性的为质粒DNA，而染色体DNA不会复性，缠结成网状物质，通过离心除去。
质粒DNA提取技术
实验概要通过本实验，学习和掌握碱裂解法提取质粒的方法和技术。实验原理质粒是基因工程中常用的载体之一。质粒是染色体外小型双链环状的DNA，大小在1～200kb之间。碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们的。在pH值介于12.0～12.5这个狭窄的范围内，线
质粒DNA提取时质粒为何会丢失
中稳定存在，经多次转接后有可能造成质粒丢失。因此不要频繁转接，每次接种时应接种单菌落。另外，检查筛选 用
钳形表的选购小技巧
钳形表的选购小技巧 1: 检测对象 根据不同的检测对象,交流电流,直流电流,还是漏电电流来选择机种; 2:可检测的导体规格 配合检测场所,有从21mm直径到53mm直径不同规格. 3:真效值检测是否必要 使用平均值方式的钳形电流表不能正确检测电机等非正弦波的电路和
球磨机的操作小技巧
球磨机是一种非常常见的磨矿用设备，它利用物料和钢球或者钢柱的摩擦和转筒自己的转动形式来促使物料达到理想的粒级标准，以方便后续选矿过程中的分级和浮选等操作。 球磨机的操作技巧 1、开机前，对于设备各个部分进行检查，检查螺栓是否松动，润滑是否正常，传动装置是否可靠，仪表是否灵敏。 2、盘
移液器的使用小技巧
移液器的的操作是有一些窍门的，如何选择量程和控制吸液方面的操作是困扰操作新手的几个常见问题，下面是重点注意事项：1. 安装吸头： 在移液器的套柄zui下端进入吸头后，如果在吸头盒内操作，在轻轻向下压的同时左右晃动移液器或稍稍转动移液器（仅单道移液器可旋转）1-2秒即可;如果是用散装
使用移液器的小技巧
移液器是我们日常实验室工作中最经常使用到的仪器之一。那么，你有没有使用移液器时的小技巧呢？今天，莱贝就来讲讲使用移液器的小技巧。谈技巧之前，首先我们需要了解移液器的工作原理。移液器的工作原理是什么呢？对，就是通过弹簧的伸缩运动来实现我们的吸液和放（排）液。力由我们的拇指按压按钮这一动作来引起活塞推动
常用的模温机小故障排除小技巧
长期运行的模温机无法摆脱出现故障的问题，在遇到各类小故障的时候，只要企业的维护人员能够掌握处理各类小故障的技巧，即可在很短的时间内解决模温机故障。并且保持模温机处于高效率的运行状态，避免由于各类故障而导致设备运行异常。 想要减少模温机各类小故障，实际使用模温机的时候，要求企业定期针对模温机进行
质粒DNA的提取与纯化
一、实验目的与原理质粒多为一些双链、环状的DNA分子，是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作，进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。提取质粒的基本步骤分为三步：①细菌的培养和质粒的扩增，②细菌菌体的裂解，③质粒DNA的纯化。本实验采取的菌体裂解方
质粒提取的注意事项
1、利用氯霉素抑制染色体的复制，而不抑制质粒的复制这一特点，在低拷贝质粒（如pUC19）的培养过程中添加氯霉素可以大大提高得率。2、RNA 的去除，首先是使用 RNase 消化。在溶液 I 中加入高浓度的 RNase A (100ug/ml)，或者用含 25ug RNase A/ml TE 溶解抽提
质粒DNA的小量快速提取
实验概要本实验介绍了质粒DNA小量快速提取的基本原理及操作步骤。实验原理在碱性条件下，染色体DNA和质粒DNA都发生变性，但质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离，当用酸性的高盐缓冲液将pH中和至中性时，变性的质粒DNA又恢复到原来的构型并溶解在溶液中，而染色体DNA不能复性而形
质粒DNA的提取与纯化
一、实验目的与原理 质粒多为一些双链、环状的DNA分子，是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作，进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。 提取质粒的基本步骤分为三步： ①细菌的培养和质粒的扩增 ②细菌菌体的裂解 ③质粒DNA的纯化 本实验采取的菌体
质粒提取的原理和步骤
本文章首先从溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ开始讲解:溶液I，50 mM葡萄糖/ 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 M NaOH / 1% SDS；溶液III，3 M醋酸钾/ 2 M醋酸。溶液I的作用任何生物化学反应，首先要控制好溶液的pH，因此用适当浓度的
质粒DNA的提取与鉴定
本实验采取碱裂解法的方法来提取质粒 ，之后经琼脂糖凝胶电泳来检测DNA。质粒DNA 的提取与鉴定(一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变
PCR实用小技巧
增加PCR的特异性：1. primers design这是最重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些条件1) 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的primer同样会降低特异性,并且降低产量2) GC% 40%~60%3
Altium－Designer小技巧
以下是在用到Altium Designer做PCB设计时候几个方便实用的小技巧，都是经验总结。1 选择多个引脚在PCB设计的时候，经常会遇到芯片或者排针多个引脚并行走线的情况，我们都知道AD有“交互式布多根线连接”的功能，通过这个功能能够很轻松的实现并行走线，不过在选择这多个引脚的时候可以通过“S＋