胶体金标记蛋白A技术
胶体金标记蛋白A技术（Protein A-gold technique, PAg法） PAg复合物制备方法简便，作为第二抗体，无种属特异性，可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用，蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性，又能保持高度的稳定性，PAg复合物分子最小易于穿透组织。PAg复合物的原液在4℃可保存达一年之久。电镜水平的PAg染色法 PAg法在电镜技术的应用原则是二步标记法，可用于包埋前和包埋后染色。其主要区别于一般胶体金免疫染色在：①须1%卵白蛋白－PBs （pH7.4）或1%卵白蛋白—0.05mol/l Tris缓冲液（pH7.4）来封闭非特异性的结合部位，而不是采用羊或其它的动物的正常抗血清，因为PAg复合物能够与正常血清组中的Ig结合，从而给出假阳性结果；②在应用第一抗血清孵育和PBS冲洗后作第二抗血清即PA......阅读全文
免疫电镜胶体金标记法（简称金标法）
1、 包埋后染色 (超薄切片的金标记法)（1）超薄切片厚50～70nm左右，载于200～300网孔的镍网上；（2）滴1%的H2O2液1滴于蜡板上，将网的载片面轻浮于液滴上10min至1h；（3）双蒸水洗3次，每次10分钟。第1、2次洗法如（2），浮于液面上，第3次以盛双蒸水的注射器沿镍网面冲洗，水流
白话胶体金系列——第二话<标记>中篇
（二）操作上面大篇幅都围绕Ph展开，因此不难想象Ph是标记优化的一个关键点，总结起来就4个字——高效、稳定。很多流程里，摸索最佳Ph都是优化标记的第一步，但是如果大家对第一话《烧金》的内容还有印象的话，那么标记的第一步首先应该是找到合适的容器，因为胶体金有洁癖。1.容器：推荐用清洗过的西林瓶（玻璃瓶
白话胶体金系列——第二话<标记>下篇
5）离心纯化：目的有几方面：去除游离蛋白；置换储存液；浓缩。高速离心，本身是一个加速破坏的过程，所以离心需要平衡两点，“上清干净”和“无不溶颗粒”，这两个矛盾的问题在小量离心时不明显，但是大量离心就讲究了，以下引自涛哥答疑录：“关于金标记物的离心方法，五花八门，各种各样的都有，比如：有人先低速离心，
白话胶体金系列——第二话<标记>上篇
（一）基本概念为了方便新人与老司机交流，需要掌握一些基本名词和概念，以便准确的表述问题。这些知识不考试，写作时间也有限，关键还没有稿费，所以随便写写，没有咬文嚼字，如果意思表达错了请指正，形式上就不用对着教科书抠字眼了，谢谢。1.抗原、抗体，和二抗：抗原（半抗原）：能够诱导产生抗体（免疫原性）并且和
胶体金与蛋白制备
胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值，在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下，二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时，则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。1．待标记蛋白溶液的制备 将待标记蛋白预先对0.005Mo
蛋白质标记
Biosynthetic labeling (Sefton Lab)Biotinylation of Antibody (Contributed by Nanci Donacki)125I Labeling of Protein using ICl (ScienceXchange)Protein (
藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE标记蛋白A方法
藻红蛋白标记抗体的方法：1. 巯基化藻红蛋白（PE）的制备；（1） 将600μl浓度为15.5mg/ml的盐酸巯醇亚胺加到1.2ml浓度为3.6mg/ml的PE中；（2） 将以上混合液和1.2ml pH6.8的PB混合，而后装入透析袋置入50mmol/L p
藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE标记蛋白A方法
藻红蛋白标记抗体的方法﹠PE-标记蛋白A方法 藻红蛋白标记抗体的方法： 1. 巯基化藻红蛋白（PE）的制备； （1） 将600μl浓度为15.5mg/ml的盐酸巯醇亚胺加到1.2ml浓度为3.6mg/ml的PE中； （2） 将以上混合液和1.2ml pH6.
胶体金标记实验的操作方法与步骤
胶体金标记实验的实验过程主要包含以下步骤：胶体金标记蛋白的制备及其与胶体金之间的用量比例的确定、胶体金和蛋白的结合、胶体金标记蛋白的纯化与质量检测等。1、蛋白质的处理：胶体金标记蛋白的制备胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值，在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下，二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的p
免疫胶体金技术的技术特点
免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，英文缩写为：GICT。胶体金是由氯金酸（HAuCl4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳
胶体金快诊技术
大凡存在的，就必有其存在的意义。当胶体金免疫层析检测初出江湖的时候，有人预测这种简易的装置会改变免疫检测的市场格局。当时我们并不以为然。可是后来的事实却证明了这个预言。一种崭新的朴素的检测模式以其极致的简便方式受到市场的青睐。说到胶体金，早早孕和排卵检测市场要远远超出了我们的想象。这个年代，只要是育
免疫胶体金技术简介
免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，英文缩写为：GICT。胶体金是由氯金酸（HAuCl4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳
免疫胶体金技术3
为了得到颗粒均一的免疫金试剂，可将上述初步纯化的结合物再进一步用10％～30％蔗糖或甘油进行密度梯度离心,分带收集不同梯度的胶体金与蛋白的结合物。（2）凝胶过滤法：此法只适用于以BSA作稳定剂的胶体金蛋白结合物的纯化。将胶体金蛋白结合物装入透析袋，在硅胶中脱水浓缩至原体积的 1／5～1／10。再
免疫胶体金技术简介
免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，英文缩写为：GICT。胶体金是由氯金酸（HAuCl4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳
免疫胶体金技术1
（一） 原理 免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金是由氯金酸（HAuCl4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与
免疫胶体金技术介绍
一、免疫胶体金技术的基本知识1、胶体金的概念氯金酸(HAuCl4)在还原剂作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，形成带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。2、免疫金标记技术胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能，蛋白质
免疫胶体金技术2
（3）配制胶体金溶液的pH以中性（pH7.2）较好。（4）氯金酸的质量要求上乘，杂质少。最好是进口的。（5）氯金酸配成1％水溶液在4℃可保持数月稳定，由于氯金酸易潮解，因此在配制时，最好将整个小包装一次性溶解。 （三） 胶体金标记蛋白的制备 胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值，在
标记的免疫技术
免疫技术是利用抗原抗体反应进行的检测方法，即应用制备好的特异性抗原或抗体作为试剂，以检测标本中的相应抗体或抗原。它的特点是具有高度的特异性和敏感性。如将试剂抗原或试剂抗体用可以微量检测的标记物（例如放射性核素、荧光素、酶等）进行标记，则在与标本中的相应抗体或抗原反应后，可以不必测定抗原抗体复合物
标记的免疫技术
免疫技术是利用抗原抗体反应进行的检测方法，即应用制备好的特异性抗原或抗体作为试剂，以检测标本中的相应抗体或抗原。它的特点是具有高度的特异性和敏感性。如将试剂抗原或试剂抗体用可以微量检测的标记物（例如放射性核素、荧光素、酶等）进行标记，则在与标本中的相应抗体或抗原反应后，可以不必测定抗原抗体复合物
RAPD标记技术
实验概要运用随机引物扩增寻找多态性DNA片段可作为分子标记。这种方法即为RAPD(randomly amplifiled polymorphic DNA,随机扩增的多态性DNA.)该RAPD技术建立于PCR基础上，它是利用一系列(通常数百个)不同的随机排列碱基顺序的寡聚核苷酸单链(通常为十聚体)
AFLP标记技术
实验概要AFLP也是通过限制性内切酶片段的不同长度检测DNA多态性的一种DNA分子标记技术。但AFLP是通过PCR反应先把酶切片段扩增,然后把扩增的酶切片段在高分辨率的顺序分析胶上进行电泳,多态性即以扩增片段的长度不同被检测出来(附图)。实验中酶切片段首先与含有与其共同粘末端的人工接头连接,连接后的
RFLP标记技术
实验概要DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种（个体）基因组的限制性内切酶的酶
赛默飞世尔质谱技术发现蛋白标记物
摘要： 赛默飞世尔科技今日宣布将与乔治梅森大学(GMU)的研究者们合作，来验证GMU利用赛默飞世尔的质谱技术而发现的蛋白标记物(biomaker)。 GMU应用蛋白质组和分子医药中心(CAPMM)的科学家们将会利用赛默飞世尔的中TSQ Quantum Ultra三重四极杆质谱仪来发现癌症标记物，
免疫胶体金技术的简介
免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术，英文缩写为：GICT。胶体金是由氯金酸（HAuCl4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一
免疫胶体金技术的应用
胶体金标记技术由于标记物的制备简便，方法敏感、特异，不需要使用放射性同位素，或有潜在致癌物质的酶显色底物，也不要荧光显微镜，它的应用范围广，除应用于光镜或电镜的免疫组化法外，更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。 1．液相免疫测定：将胶体金与抗体结合，建立微量凝集试验检
胶体金检测常用检测技术
免疫胶体金光镜染色法 细胞悬液涂片或组织切片，可用胶体金标记的抗体进行染色，也可在胶体金标记的基础上，以银显影液增强标记，使被还原的银原子沉积于已标记的金颗粒表面，可明显增强胶体金标记的敏感性。 免疫胶体金电镜染色法 可用胶体金标记的抗体或抗抗体与负染病毒样本或组织超薄切片结合，然后进行负
免疫胶体金技术的应用
胶体金标记技术由于标记物的制备简便，方法敏感、特异，不需要使用放射性同位素，或有潜在致癌物质的酶显色底物，也不要荧光显微镜，它的应用范围广，除应用于光镜或电镜的免疫组化法外，更广泛地应用于各种液相免疫测定和固相免疫分析以及流式细胞术等。1．液相免疫测定：将胶体金与抗体结合，建立微量凝集试验检测相应的
免疫胶体金技术测试原理
层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫金标记技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式，相比ELISA试剂，除标记物不同外，同样服从于抗原抗体反应的特性。此种检测方法具有明显的优点：*方便使用，体现在操作简单，不需经过特殊培训。*短时间获得检测结果，一般10－15分钟即可得出结论。*不同环境下的稳定
胶体金技术是什么原理
胶体金法是一种常用的标记技术，是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等还原剂的作用下，聚合成相应大小的金颗粒，并由于静电作用而使金颗粒成为一种稳定的胶体状态，形成携带着负电的疏水胶溶液，因为成为了稳定的胶体状
免疫标记技术常用的标记物介绍
常用的标记物有荧光素、酶、放射性核素及胶体金等。免疫标记技术具有快速、定性或定量甚至定位的特点，是应用最广泛的免疫学检测技术。 常用的免疫荧光素主要有： 1 ．异硫氰酸荧光素 (FITC) ，最大吸收光谱为 490~495nm ，最大发射光谱为 520~530nm ，呈黄绿色荧光。 2 ．