蛋白质标记

Biosynthetic labeling (Sefton Lab)Biotinylation of Antibody (Contributed by Nanci Donacki)125I Labeling of Protein using ICl (ScienceXchange)Protein (Antibody) Fluorescent Labeling (Mario Roederer)Gives detailed protocol for conjugation of proteins to fluorescent dyes. The conjugations fall into four basic protocols: Type 1 (used for FITC, Cy5, and the initial preparation of the Cy5 and Cy7 tandem......阅读全文

蛋白质标记

Biosynthetic labeling (Sefton Lab)Biotinylation of Antibody (Contributed by Nanci Donacki)125I Labeling of Protein using ICl (ScienceXchange)Protein (

蛋白质的胶体金标记

当蛋白质的最适稳定量及标记的最佳pH值被确定以后,便可进行标记。具体步骤如下。(1)根据标记所用胶体金的总量计算出所需要待标记蛋白质的总量。(2)边搅拌边将蛋白质溶液加入胶体金溶液中,逐渐加入,lmg的蛋白质量大约需5min,或在搅拌下将胶体金逐渐加入到蛋白质溶液中,大约需5~10min。(3)继续

蛋白质的胶体金标记

当蛋白质的最适稳定量及标记的最佳pH值被确定以后,便可进行标记。具体步骤如下。(1)根据标记所用胶体金的总量计算出所需要待标记蛋白质的总量。(2)边搅拌边将蛋白质溶液加入胶体金溶液中,逐渐加入,lmg的蛋白质量大约需5min,或在搅拌下将胶体金逐渐加入到蛋白质溶液中,大约需 5~10min。(3)继

胶体金标记蛋白质的纯化

标记好的免疫金探针必须经过纯化处理才能用于IHC染色,尤其是免疫电镜的染色。纯化的目的就是除去其中未标记的蛋白质,未充分标记的胶体金及在标记过程可能形成的各种聚合物。其纯化方法有超速离心法、色谱柱法以及以上二者相结合应用。(一)超迷离心法根据胶体金颗粒大小不同及蛋白质种类不同,离心的转速和时间也不同

蛋白质的生物合成标记实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 甲硫氨酸PBS仪器、耗材 培养箱离心管实验步骤 1.  培养悬浮细胞至对数增长期,室温300 g 离心5 min。回收107~108细胞。 2.  每2×107细胞用约10 ml 37℃的短时间标记培养基在圆锥型试管中洗涤,于室温300 g 离心5 min 回收细胞,小

蛋白质的生物合成标记实验

甲硫氨酸短时间标记悬液中的细胞 甲硫氨酸短时间标记贴壁培养细胞 甲硫氨酸对细胞进行脉冲追踪标记             实验材料 蛋白质

蛋白质的生物合成标记实验

甲硫氨酸短时间标记悬液中的细胞 甲硫氨酸短时间标记贴壁培养细胞 甲硫氨酸对细胞进行脉冲追踪标记             实验材料 蛋白质

靶蛋白的放射标记实验—酵母和细菌蛋白质代谢放射标记

实验材料 细胞 仪器、耗材 基本培养基 实验步骤 1. 接种细胞于只含有必需氨基酸和辅因子的已知成分的基本培养基,于合适温度中度振荡培养过夜。 2. 用新鲜的基本培养基稀释培养物,继续温育至 107 细胞/ml (酵母)或对数期中期(细菌)。 3. 5000

重组蛋白质的代谢标记实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材 培养瓶离心机转子实验步骤 1.  接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病毒分别准备一个平皿供感染用,并准备一个对照平皿供野生型杆状病毒感染。于27℃温育

重组蛋白质的代谢标记实验

基本方案             实验材料 蛋白质 试剂、试剂盒

头发中独特蛋白质标记可识别身份

  DNA检测技术已在寻找罪犯方面发挥很大威力。但DNA检测是找到犯罪分子的唯一手段吗?美国一项最新研究称,头发中的独特蛋白质标记同样可以用于身份识别,让那些犯罪分子无所遁形。   每个人的DNA都是独一无二的,这是DNA检测常用于犯罪调查或考古研究的原因所在。但这一手段也存在不足,因为随着时

重组蛋白质的代谢标记实验

由于重组蛋白质表达的时候,宿主蛋白质的合成基本终止,因此体内代谢标记是检测重组蛋白质的敏感方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒胎牛血清甲硫氨酸半胱氨酸仪器、耗材培养瓶离心机转子实验步骤1.  接种2.5×106细胞于盛有4 ml 含10%胎牛血清的完全培养液的60 mm 肌组织培养皿中。对每一假定重组病

蛋白质的生物合成标记实验(三)

实验材料细胞试剂、试剂盒甲硫氨酸PBS仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1.  准备和用[35S]甲硫氨酸标记细胞,用0.2~1 mCi/ml 的[35S]甲疏氨酸脉冲标记细胞5~30 min。 2.  脉冲标记后,除去[35S]甲硫氨酸培养基,用10 ml 于37℃追加培养基冼细胞1次,加入10 ml

蛋白质的生物合成标记实验(二)

实验材料细胞试剂、试剂盒PBS甲硫氨酸仪器、耗材培养箱离心机实验步骤1.  在100 mm 直径的培养皿上培养贴壁细胞(0.5~2×107)至70%~90%汇片,吸去培养液,用10 ml 于37℃短时间标记培养基轻轻搖晃冼两次细胞。2.  加入5 ml 于37℃短时间标记培养基,在5%CO2的加湿培

头发中独特蛋白质标记可识别身份

  DNA检测技术已在寻找罪犯方面发挥很大威力。但DNA检测是找到犯罪分子的唯一手段吗?美国一项最新研究称,头发中的独特蛋白质标记同样可以用于身份识别,让那些犯罪分子无所遁形。   每个人的DNA都是独一无二的,这是DNA检测常用于犯罪调查或考古研究的原因所在。但这一手段也存在不足,因为随着时间的流

蛋白质的生物合成标记实验(一)

甲硫氨酸短时间标记悬液中的细胞生物按照从脱氧核糖核酸 (DNA)转录得到的信使核糖核酸(mRNA)上的遗传信息合成蛋白质的过程。由于mRNA上的遗传信息是以密码(见遗传密码)形式存在的,只有合成为蛋白质才能表达出生物性状,因此将蛋白质生物合成比拟为转译或翻译。实验材料蛋白质试剂、试剂盒甲硫氨酸PBS

不同标记与非标记蛋白质组学定量准确性分析研究

  通过质谱法进行定量蛋白质组分析为生物医学探索研究提供非常重要的途径。 然而,了解生物样品中的定量限制对于准确判断结果非常重要。通过使用加入已知浓度的蛋白质标准品的复杂样本,科学家们研究了无标记(label free)和基于标记(TMT和iTRAQ)的肽定量的定量限制,包括前体混合的评估及其对同重

全套抗体标记工具全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用2

     方便的设计以取得最大的效果:         ReadiLink™快速抗体标记试剂盒利用胺反应性标记来制备共价标记的结合物。这些反应性标记选择性地靶向并结合至目标抗体上的伯胺(例如赖氨酸残基)。要标记您的抗体,只需将您的抗体溶液(浓度约1 mg / mL)与ReadiLink™

全套抗体标记工具全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用1

     用特定标签标记抗体已成为生物科学和医学研究中的重要且常规程序,标签的范围从视觉标记(例如荧光染料)到半抗原分子(例如生物素),标签的作用有增强免疫复合物和蛋白质-蛋白质相互作用的可见性,以及用于蛋白质的分离和纯化。        在确定选择哪种标签类型时,应侧重于抗体的下游应用。荧光标

全套抗体标记工具全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用3

       表2. ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂盒  名称 Ex(nm) Em(nm) 规格 货号 ReadiLink™xtra Rapid iFluor™350抗体标记试剂盒 344 4

蛋白质磷酸化的测定实验—代谢标记

实验材料细胞仪器、耗材培养瓶实验步骤1. 用 60 mm 或 100 mm 培养瓶,在完全培养基中培养细胞至所希望的密度。2. 用预热的低磷酸培养基(无放射性磷酸盐)冲洗两次,然后加入含 0.5~1 mCi32P/ml 的低磷酸培养基(50~100 μmol/L 无机磷酸)。3. 培养结束后,回收 

活细胞蛋白质标记与成像研究获进展

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504935.shtm近日,华东理工大学光遗传学与合成生物学交叉学科研究中心杨弋、朱麟勇、陈显军团队在活细胞蛋白质标记与成像研究中取得重要进展,相关研究在《细胞发现》发表。   ?人造荧光蛋白及荧光

用于无标记蛋白质分析的高通量系统

蛋白质分析寻找不需要检测剂的技术。使用无微流体的系统越来越多地被使用,这些系统承诺更容易处理,更快的测量和更大的数据集。 生物层干涉测量法是一种无标记的快速实时蛋白质分析方法。 生物层干涉测量遵循基于光波叠加的光学干涉测量原理。使用具有特定的表面改性,以在传感器的前端基于光纤的BLI生

蛋白质可控荧光标记研究方面取得新成果

  9月21日,Angewandte Chemie International Edition发表了中科院生物物理研究所王江云研究组和林庆研究组合作成果Genetically Encoded Cyclopropene Directs Rapid, Photoclick

《自然化学》:标记蛋白质的有效新方法

  最近,奥胡斯大学的研究人员开发出一种更简单的方法,来构建DNA-蛋白质复合物。该方法可能加强疾病诊断相关的工作。  DNA与蛋白质——包括抗体相结合,提供了一种强有力的伙伴关系,可用于诊断技术、纳米技术和其他学科。DNA-蛋白质复合物——用DNA标记蛋白质,可用于诸如感光检测和生物材料可视化这样

氯胺T法标记蛋白质/多肽注意事项

 (1)放射性碘源的选用:无载体的131I或125I均可用于碘化标记,但应尽量选用新鲜的、比放射强度高的、含还原剂量少的放射性碘源。碘源的比放射强度最好≥50~100mCi/ml,至少也要>30mCi/ml,否则加入碘源的容量要增加,随着带入碘源中含有的还原剂(为放射性碘源运输保存所需加入)量也增加

方案1-用-FLAG抗原表位标记蛋白质进行蛋白质免疫共沉淀

实验材料抗 FLAGM2 单克隆抗体293 T 细胞试剂、试剂盒抗 FLAGM2 琼脂糖亲和凝胶甘氨酸辣根过氧化物酶IEF缓冲液裂解缓冲液NaCl磷酸盐缓冲液聚乙烯亚胺RF10培养基RPMI 1640 培养基4 X SDS-PAGE 加样缓冲液叠氮化钠胰岛素仪器、耗材大型离心机配有检测 GFP 滤片

非标记蛋白质的磷酸化作用分析实验

免疫印迹分析 化学发光法             实验材料 蛋白质样品 试剂、试剂盒

新蛋白质交联抗体的标记和修饰使用方法

介绍现在的研究中,一个大生物分子与另一个大分子的共价结合,如抗体与酶或酶与DNA的共价结合,仍是研究人员实验中的重点之一。其中有几种方法可用于交联两个生物分子。一种常见的方法是使用一种小分子交联剂(如Sulfo-SMCC)。SMCC的一端有胺反应性NHS酯基与蛋白质的游离胺(-NH2)反应,另一端有

方案10-定量蛋白质组学的体内蛋白质同位素标记实验

实验材料酿酒酵母试剂、试剂盒丙酮乙腈NH4HCO3细胞生长培养基干冰冰水2-巯基乙醇甲醇铁氰化钾蛋白提取试剂组合蛋白酶抑制剂硫代硫酸钠仪器、耗材离心蒸发仪离心管血细胞计数器孵育器MALDI- TOF 质谱仪和 LC-MS MS 系统超声波破碎仪分光光度计实验步骤一、培养细胞二、提取蛋白的细胞准备三、