ONPG的概念
（1）原理：有的细菌可产生β-半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚β-D-半乳糖苷（ONPG），而生成黄色的-硝基酚（O-nitrophenol），在很低浓度下也可检出。（2）试剂：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸馏水中，在加入缓冲液（6.9gNaH2PO4，溶于45ml蒸馏水中，用30%NaOH调整pH为7.0，再加水至50ml）5ml，置于4℃冰箱中保存。ONPG溶液为无色，如出现黄色，则不应再用。（3）方法：从培养基上取菌，于0.25ml无菌生理盐水中制成菌悬液，加入一滴甲苯并充分振摇，使酶释放。将试管置37℃水浴5分钟，加入0.25ml ONPG试剂，水浴20分钟～3小时观察结果。（4）结果：菌悬液呈现黄色为阳性反应，一般在20～30分钟内显色。（5）应用：迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本实验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。......阅读全文
ONPG的概念
（1）原理：有的细菌可产生β-半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚β-D-半乳糖苷（ONPG），而生成黄色的-硝基酚（O-nitrophenol），在很低浓度下也可检出。（2）试剂：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸馏水中，在加入缓冲液（6.9gNaH2PO4，溶于45ml蒸馏水中，用30%N
ONPG培养基
成分 邻硝基酚β－D-半乳糖昔(ONPG) 60mg (O－Nitrophenyl－β－D－galactopyranoside) 0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5) 10mL 1%蛋白胨水(PH7.5) 30mL 制法 将ONP
微生物培养基的原理、制作和现象：ONPG培养基
成分 邻硝基酚β－D-半乳糖昔(ONPG) 60mg (O－Nitrophenyl－β－D－galactopyranoside) 0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5) 10mL 1%蛋白胨水(PH7.5) 30mL 制法 将ONP
β半乳糖苷酶试验
β-半乳糖苷酶试验是检验主管技师考试辅导的部分内容，以下是医学教育网对这块内容的整理，希望对考生有所帮助： β-半乳糖苷酶试验（ONPG试验） （1）试剂：0.75M ONPG溶液。 （2）方法：从克氏双糖铁培养基上取菌，于0.25ml无菌生理盐水中制成菌悬液，加入一滴甲苯并充分振摇，使酶
β半乳糖苷酶试验
β-半乳糖苷酶试验 原理：有的细菌可产生β-半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚β-D-半乳糖苷（ONPG），而生成黄色的-硝基酚（O-nitrophenol），在很低浓度下也可检出。试剂：0.75MONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸馏水中，在加入缓冲液（6.9gNaH2PO4，溶于45ml蒸馏水中，用3
紫外分光光度计检测β半乳糖苷酶
β半乳糖苷酶一β一半乳糖苷酶，又称乳糖酶（Lactase）。能水解乳糖来降低乳制品的乳糖含量，从而提高乳制品的可消化性，用于低乳糖牛奶和非结晶型浓缩牛奶的生产及奶酪风味的改变，同时还可用于生产低聚半乳糖。【酶活测定】以ONPG为底物测定β-半乳糖苷酶活力。【酶活定义】以ONPG为底物，37℃保温酶解
β半乳糖苷酶试验的检查过程
试剂：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸馏水中，在加入缓冲液(6.9g NaH2P04溶于45ml蒸馏水中，用30% NaOH调整pH为7.0，再加水至50ml)5ml，置4℃冰箱中保存。 方法：取纯菌落用无菌生理盐水制成浓的菌悬液，加入0.25ml ONPG液，置35℃水浴2
临床化学检查方法介绍β半乳糖苷酶试验
β-半乳糖苷酶试验介绍： β-半乳糖苷酶试验是以有些细菌可产生β半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)，生成黄色的邻硝基酚这样的原理进行的试验方法。β-半乳糖苷酶试验正常值： 体内菌群的种类和比例正常，人体处于动态平衡健康状态。β-半乳糖苷酶试验临床意义： 迟缓发酵乳糖的肠杆菌ON
生化检测项目半乳糖苷酶试验介绍
β-半乳糖苷酶试验介绍： β-半乳糖苷酶试验是以有些细菌可产生β半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚-β半乳糖苷(ONPG)，生成黄色的邻硝基酚这样的原理进行的试验方法。β-半乳糖苷酶试验正常值： 体内菌群的种类和比例正常，人体处于动态平衡健康状态。β-半乳糖苷酶试验临床意义： 迟缓发酵乳糖的肠杆菌ON
β半乳糖苷酶试验的注意事项及检查过程
注意事项 试剂：0NPG溶液为无色，如出现黄色，则不应再用。 不合宜人群： 没有 检查前禁忌：注意正常的生活饮食习惯，注意个人卫生。 检查时要求：积极配合医生 检查过程 试剂：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸馏水中，在加入缓冲液(6.9g NaH2P04溶于45ml
哺乳动物原代细胞培养的β半乳糖苷酶（荧光测定）
β半乳糖苷酶：β半乳糖苷酶由大肠杆菌lacZ基因编码，可催化半乳糖苷水解。最大优势是易于用免疫组织化学法观测其原位表达，是最常用的监测转染率的报道基因之一。以邻—硝基苯—β—D—半乳吡喃糖苷(ONPG)为底物可用标准的比色法检测酶活性，其检测动力学范围为6个数量级。氯酚红—β—D—半乳吡喃糖苷(CP
哺乳动物原代细胞培养的β半乳糖苷酶（分光光度测定）
试剂和器材： 1.反应缓冲液：5g/L聚乙二醇辛基苯基醚（Triton X-100）、0.05mol/L柠檬酸钠-磷酸盐缓冲液，pH4.3；2.终止液：0.25%甘氨酸-NaOH，pH10；3.底物：6mmol/L对硝基苯基-β-半乳呋喃糖苷溶于缓冲溶液中；4.微量离心机，带1.5—2.0ml小管；
细菌对于碳水化合物的代谢试验
细菌对于碳水化合物的代谢试验原理为：由于细菌各自具有不同的酶系统，对糖的分解能力不同，有的能分解某些糖产生酸和气体，有的虽能分解糖产生酸，但不产生气体，有的则不分解糖。据此可对分解产物进行检测从而鉴别细菌。具体试验方法有：①糖类发酵试验是鉴定细菌最常用的生化反应，特别是对肠杆菌的鉴定尤为重要；
细菌对于碳水化合物的代谢试验
1.糖（醇、苷）类发酵试验 （1）原理：由于各种细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，故分解糖类的能力各不相同，有的能分解多种糖类，有的仅能分解1～2种糖类，还有的不能分解。细菌分解糖类后的终末产物亦不一致，有的产酸、产气，有的仅产酸，故可利用此特点以鉴别细菌。 （2）培养基：在培养基中加入
细菌对于碳水化合物的代谢试验
1.糖（醇、苷）类发酵试验 （1）原理：由于各种细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，故分解糖类的能力各不相同，有的能分解多种糖类，有的仅能分解1～2种糖类，还有的不能分解。细菌分解糖类后的终末产物亦不一致，有的产酸、产气，有的仅产酸，故可利用此特点以鉴别细菌。 （2）培养基：在培养基中加入0.
β半乳糖苷酶的测定实验
基本方案 实验方法原理 β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。乳糖＋H2O → β-D-半乳糖＋D-葡萄糖 实验
β半乳糖苷酶的测定实验
实验方法原理 β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。乳糖＋H2O → β-D-半乳糖＋D-葡萄糖实验材料 β-半乳糖苷酶试剂、试剂盒 磷酸钾邻硝基苯基 β-D-半乳糖苷仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」实验混合物：以 0.02 ml 酶溶液起始，然后 25℃ 下，在 405 nm
β半乳糖苷酶的测定实验
实验方法原理β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。乳糖＋H2O → β-D-半乳糖＋D-葡萄糖实验材料β-半乳糖苷酶试剂、试剂盒磷酸钾邻硝基苯基 β-D-半乳糖苷仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」实验混合物：以 0.02 ml 酶溶液起始，然后 25℃ 下，在 405 nm处吸收值升
β半乳糖苷酶试验的临床意义
迟缓发酵乳糖的肠杆菌ONPG实验阳性，如埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属等。不发酵乳糖的细菌如沙门菌属、变形杆菌属等为阴性。本试验可作为迟缓发酵乳糖细菌的快速鉴定方法。 异常结果：埃希氏菌引起肠道外感染，特别是泌尿道感染。 枸橼酸杆菌属引起原发性枸橼酸杆菌肺炎或继发性枸橼酸杆菌肺炎。病理改
大肠杆菌的检测方法酶底物法
酶底物法已被列为国家标准(GB/T4789.32－2002)，用酶底物法来检测大肠杆菌的主要原理是:大肠杆菌细菌能够产生 β－半乳糖苷酶(β－D－galactosidase)，它能够分解 ONPG(Ortho－nitro phenyl－β－D－galactopyr－anoside)，从而使得培养
类鼻疽假单胞菌的培养
在血平板上经24小时培养呈细小菌落，48小时后菌落增大至中等大小，灰黄色，外形似车轮状或菊花样。菌落周围呈半溶血状态。在液体培养中，初为混浊生长，后形成皱褶菌膜。在麦康凯平板上为分解乳糖的红色菌落；在SS平板上生长不良；在含2%和3%NaCl营养琼脂平板上不生长。所有生长菌落的平板均有浓烈的异味
酶法测定钠的原理
酶法测定钠的原理是利用钠依赖的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG（邻硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷）；分解释放出有色产物邻硝基酚，在波长420nm处测吸光度变化。 酶法测钾的原理是利用对丙酮酸激酶的激活作用，后者催化磷酸烯醇式丙酮酸变为乳酸同时伴有还原型辅酶Ⅰ的消耗，在波长340nm处测NADH的
类鼻疽假单胞菌的培养介绍
在血平板上经24小时培养呈细小菌落，48小时后菌落增大至中等大小，灰黄色，外形似车轮状或菊花样。菌落周围呈半溶血状态。在液体培养中，初为混浊生长，后形成皱褶菌膜。在麦康凯平板上为分解乳糖的红色菌落；在SS平板上生长不良；在含2%和3%NaCl营养琼脂平板上不生长。所有生长菌落的平板均有浓烈的异味
β半乳糖苷酶试验的正常值及临床意义
正常值 体内菌群的种类和比例正常，人体处于动态平衡健康状态。 临床意义 迟缓发酵乳糖的肠杆菌ONPG实验阳性，如埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属等。不发酵乳糖的细菌如沙门菌属、变形杆菌属等为阴性。本试验可作为迟缓发酵乳糖细菌的快速鉴定方法。 异常结果：埃希氏菌引起肠道外感染，特别是泌尿
酶法测定血清离子的原理
酶法测定钠的原理是利用钠依赖的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG（邻硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷）；分解释放出有色产物邻硝基酚，在波长420nm处测吸光度变化。酶法测钾的原理是利用对丙酮酸激酶的激活作用，后者催化磷酸烯醇式丙酮酸变为乳酸同时伴有还原型辅酶Ⅰ的消耗，在波长340nm处测NADH的吸光度下
酶法测定血清离子的原理
酶法测定钠的原理是利用钠依赖的β-半乳糖苷酶催化人工底物ONPG（邻硝基酚β-D-吡喃半乳糖苷）；分解释放出有色产物邻硝基酚，在波长420nm处测吸光度变化。 酶法测钾的原理是利用对丙酮酸激酶的激活作用，后者催化磷酸烯醇式丙酮酸变为乳酸同时伴有还原型辅酶Ⅰ的消耗，在波长340nm处测NADH的吸光
细菌鉴定的生化试验碳源代谢试验
碳源是为微生物提供碳素来源的物质。用于合成菌体,碳源物质在细胞内经过一系列复杂的化学变化后成为微生物自身的物质(如糖类、脂质、蛋白质等),碳可占一般细菌细胞干重的一半。大多数碳源还能为机体提供维持生命活动所需的能源,因此,碳源物质通常也是能源物质。碳源代谢试验主要是通过检测细菌在利用碳源时的代谢途径
β半乳糖苷酶试验的临床意义及注意事项
临床意义 迟缓发酵乳糖的肠杆菌ONPG实验阳性，如埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属等。不发酵乳糖的细菌如沙门菌属、变形杆菌属等为阴性。本试验可作为迟缓发酵乳糖细菌的快速鉴定方法。 异常结果：埃希氏菌引起肠道外感染，特别是泌尿道感染。 枸橼酸杆菌属引起原发性枸橼酸杆菌肺炎或继发性枸橼酸杆菌
FDA认可使用的检测系统和试剂盒
美国FDA认可使用的检测系统和试剂盒详见下列表格： 表1：检测和鉴定食源性病原菌的微量生化复合试剂盒 微生物 检测系统名称 生产商 肠杆菌科 API-20Ea
实验动物细菌学监测标准操作规程
主体内容：1. 标本的采集正常动物细菌检测主要检查呼吸道和肠道，分别取气管分泌物及肠内容物做细菌培养检查。对于发病动物，采取其病变组织和脏器做细菌学检查。2. 细菌的培养细菌是单细胞的原核生物，绝大部分都可以在人工培养基上进行繁殖，只有少数例外，如泰泽病原体需在活细胞中繁殖。不同细菌种类所要求的最适