ONPG的概念
（1）原理：有的细菌可产生β-半乳糖苷酶，能分解邻硝基酚β-D-半乳糖苷（ONPG），而生成黄色的-硝基酚（O-nitrophenol），在很低浓度下也可检出。（2）试剂：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸馏水中，在加入缓冲液（6.9gNaH2PO4，溶于45ml蒸馏水中，用30%NaOH调整pH为7.0，再加水至50ml）5ml，置于4℃冰箱中保存。ONPG溶液为无色，如出现黄色，则不应再用。（3）方法：从培养基上取菌，于0.25ml无菌生理盐水中制成菌悬液，加入一滴甲苯并充分振摇，使酶释放。将试管置37℃水浴5分钟，加入0.25ml ONPG试剂，水浴20分钟～3小时观察结果。（4）结果：菌悬液呈现黄色为阳性反应，一般在20～30分钟内显色。（5）应用：迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为阳性，而不发酵乳糖的细菌为阴性。本实验主要用于迟缓发酵乳糖菌株的快速鉴定。......阅读全文
实验动物细菌学监测标准操作规程
主体内容：1. 标本的采集正常动物细菌检测主要检查呼吸道和肠道，分别取气管分泌物及肠内容物做细菌培养检查。对于发病动物，采取其病变组织和脏器做细菌学检查。2. 细菌的培养细菌是单细胞的原核生物，绝大部分都可以在人工培养基上进行繁殖，只有少数例外，如泰泽病原体需在活细胞中繁殖。不同细菌种类所要求的最适
全自动大肠杆菌快速测定仪鉴定原理
全自动大肠杆菌快速测定仪是利用固定底物酶底物法(defined substrate technology,DST,简称 DST-酶底物法),采用大肠菌群能产生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)分解 ONPG 使培养液呈黄色,以及大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuron
碳水化合物的代谢试验
1.糖（醇、苷）类发酵试验 是鉴定细菌最主要和最基本的试验，特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。2.氧化-发酵试验（O/F试验） 主要用于肠杆菌科细菌与非发酵菌的鉴别，前者均为发酵型，而后者通常为氧化型或产碱型。也可用于葡萄球菌与微球菌间的鉴别。3.β-半乳糖苷酶试验（ONPG试验） 主要用于迟
紫外可见分光光度计在食品酶分析中的应用
酶对食品加工的影响 酶是生物活细胞产生的一类具有催化功能的蛋白质。酶除了具有高的催化效率特性外，还具有很高的专一性，利用它能选择性地将个别食品组分改性，而不影响到其它组分。因此，酶在食品科学中相当重要，通过酶的作用能引起食品原料的品质发生变化，也能在比较温和的条件下加工和改良食品。 2.紫外-可见分
酵母遗传学方法5：酵母β－半乳糖苷酶的测定
酵母β－半乳糖苷酶的测定1） 粗提取物测定1．在适当温度下（通常30℃），用适当培养液将5ml细胞培养物培养到浓度为1×107～2×107细胞/ml。如果自主复制质粒的杂合基因表达，可使用一种适当培养基对存在质粒的菌株进行筛选。2．在冰上冷却细胞，离心收集。注意：以下步骤保持细胞在冰上。3．弃上清
基因互补实验
实验方法原理互补作用可以用来确定两个突变是属于同一基因还是属于不同的基因。如果是同一基因内两个不同位点的突变,它们就不能互补;如果是不同基因的突变则是互补的,此为基因间互补。有时同一基因内的两个突变位点也能发生基因内互补,但基因内互补所恢复的酶活性一般最多只有野生型酶活性的25%,而基因间互补则为1
基因互补实验
实验方法原理 互补作用可以用来确定两个突变是属于同一基因还是属于不同的基因。如果是同一基因内两个不同位点的突变,它们就不能互补;如果是不同基因的突变则是互补的,此为基因间互补。有时同一基因内的两个突变位点也能发生基因内互补,但基因内互补所恢复的酶活性一般最多只有野生型酶活性的25%,而基因间互补则为
大肠菌群检测新方法：酶底物法检测系统
水质大肠菌群酶底物法检测系统： 由LK-2010程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、医疗用水等。 该检测方法采用大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ort
细菌鉴定碳水化合物代谢试验应用及意义
(醇、苷)类发酵试验 (1)原理：不同种类含有发酵不同糖(醇、苷)类的酶，因而对各种糖(醇、苷)类的代谢能力也有所不同，即使能分解某种糖(醇、苷)类，其代谢产物可因菌种而异。检查细菌对培养基中所含糖(醇、苷)降解后产酸或产酸产气的能力，可用以鉴定细菌种类。 (2)培养基：培养基中加入0.5%-1
临床化学检查方法介绍细菌的鉴定介绍
细菌的鉴定介绍： 细菌的鉴定是对细菌进行各方面的检查。例如：细菌对于碳水化合物的代谢试验、吲哚试验、淀粉的水解等各种试验。细菌的鉴定正常值： 胃肠道的正常菌群可分为需氧菌、兼性厌氧菌和厌氧菌。最居优势的是厌氧菌，占菌群总数的99%，其中仅类杆菌和双歧杆菌就占90%，而乳杆菌和双歧杆菌可与我们终
生化检测项目细菌的鉴定介绍
细菌的鉴定介绍： 细菌的鉴定是对细菌进行各方面的检查。例如：细菌对于碳水化合物的代谢试验、吲哚试验、淀粉的水解等各种试验。细菌的鉴定正常值： 胃肠道的正常菌群可分为需氧菌、兼性厌氧菌和厌氧菌。最居优势的是厌氧菌，占菌群总数的99%，其中仅类杆菌和双歧杆菌就占90%，而乳杆菌和双歧杆菌可与我们终
嗜血杆菌属菌种与相关菌种鉴别试验
菌 种 需 要 X 因 子 需 要 V 因 子 靛 基 质 鸟 氨 酸 脱 羧 酶 赖 氨 酸 脱 羧 酶 葡 萄 糖 蔗 糖 乳 糖 甘 露 糖 硝 酸 盐 还 原 触 酶 嗜沫嗜血杆菌 + - - - - + + + - + - 副嗜沫嗜血杆菌 - + - - - + + + - +
临床微生物培养基手册（三）
葡萄糖氧化发酵培养基（O/F） 成份： 蛋白胨 2．7克 氯化钠 5．0克 0．2%溴麝香酚兰 0．03克 琼脂 3克 KH2PO4 0．3克
抑制细菌转录终止检测技术筛选RNA结合蛋白实验
一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。实验材料N-表达质粒E.coil N567 感受态细菌试剂、试剂盒储
抑制细菌转录终止检测技术筛选RNA结合蛋白实验
实验方法原理 一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。实验材料 N-表达质粒E.coil N567 感受态细菌试剂、试剂盒 储存液缓冲液仪器、耗材 蛋白胨培养基蛋白胨平板N-表达质粒组合文库培养板实验步骤 ―、材料与设备1. 通过比较 β-半乳糖苷酶表达
抑制细菌转录终止检测技术筛选RNA结合蛋白实验
实验方法原理 一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。 实验材料 N-表达质粒 E.coi
临床细菌检验的全面质量管理（二）
2、生化反应试纸和试剂的质控 试纸和试剂无论是外购的还是自制的，在使用时一定要注明开启时间和失效期。测定代谢产物的试纸或试剂，要用已知阳性和阴性的菌株进行测试，并作好测试记录。测定代谢产物的试剂，要防止细菌的污染。触酶、氧化酶、凝固酶试剂在开瓶时以及使用中，每天至少要分别用一阳性和
利用大肠杆菌系统检测RNA与RNA结合蛋白的相互作用实验
实验方法原理 大肠杆菌中异源性的 RNA-BP 与靶 RNA 的结合会抑制靶基因的翻译。此方法已成功地应用于包括 HIV Rcv 蛋白和核仁素（nucleolin）在内的多种 RNA-BP 的研究中。实验材料 质粒菌株试剂、试剂盒 X-Gal 储液IPTG 储存液lacZ 缓冲液ONPG 溶液碳酸钠
利用大肠杆菌系统检测RNA与RNA结合蛋白的相互作用实验
实验方法原理大肠杆菌中异源性的 RNA-BP 与靶 RNA 的结合会抑制靶基因的翻译。此方法已成功地应用于包括 HIV Rcv 蛋白和核仁素（nucleolin）在内的多种 RNA-BP 的研究中。实验材料质粒菌株试剂、试剂盒X-Gal 储液IPTG 储存液lacZ 缓冲液ONPG 溶液碳酸钠溶液β
利用大肠杆菌系统检测RNA与RNA结合蛋白的相互作用实验
实验方法原理 大肠杆菌中异源性的 RNA-BP 与靶 RNA 的结合会抑制靶基因的翻译。此方法已成功地应用于包括 HIV Rcv 蛋白和核仁素（nucleolin）在内的多种 RNA-BP 的研究中。
食品微生物鉴定之生化实验汇总（一）
不同的细菌具有各自的独特的酶系统，因而对底物的分解能力各异，其代谢的产物也不相同。这些代谢产物又具有不同的生物化学特性，可利用生物化学的方法测定这些代谢产物以鉴定细菌。掌握各种生化反应的原理和应用是细菌鉴定的基础。生理生化特性的测定主要根据Shirling & Gottlieb《Internatio
细胞提取物中β半乳糖苷酶的测定实验
实验材料 转染了感兴趣 DNA 的哺乳动物培养细胞 试剂、试剂盒 大肠杆菌β-半乳糖苷酶 Tris-Cl
细菌的生物化学试验
各种细菌具有各自独特的酶系统，因而对底物的分解能力不同，其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物，可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌，称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多，主要有以下几类。 一、碳水化合物的代谢试验1．糖（醇、苷）类发酵试验
细菌的生物化学试验
各种细菌具有各自独特的酶系统，因而对底物的分解能力不同，其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物，可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌，称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多，主要有以下几类。 一、碳水化合物的代谢试验1．糖（醇、苷）类发酵试验
细菌的生化实验
各种细菌具有各自独特的酶系统，因而对底物的分解能力不同，其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物，可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌，称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多，这里主要介绍碳水化合物的代谢试验1．糖（醇、苷）类发酵试验(1)原理：不同
细菌的生化实验
各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同.用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类.利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应.生物化学试验的方法很多,这里主要介绍碳水化合物的代谢试验1．糖(醇、苷)类发酵试验 (1)原
微生物生理生化鉴定的新方法
微生物鉴定中的生理生化试验代谢，在所有活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢，代谢过程主要是酶促反应过程。各种微生物具有不同的酶系统，利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌，尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中，生理生化试验占有重要的地位。 常
钠钾氯测定方法学评价及标本要求
一、钠、钾测定 （一）标本要求 血浆或全血钾比血清低0.2～0.5mmol/L，是因为血液凝固时血小板破裂释放出一部分K+。因此，报告时必须注明是血清还是血浆。 测血钾时，无论是血清还是血浆标本一定不能溶血，轻微溶血（500mgHb/L）就可引起血钾升高3%。 维持细胞内外钾平衡是依靠细胞膜
钠钾氯测定方法学评价及标本要求
一、钠、钾测定 （一）标本要求 血浆或全血钾比血清低0.2～0.5mmol/L，是因为血液凝固时血小板破裂释放出一部分K+。因此，报告时必须注明是血清还是血浆。 测血钾时，无论是血清还是血浆标本一定不能溶血，轻微溶血（500mgHb/L）就可引起血钾升高3%。
细菌鉴定常用的生化试验及其原理
用来鉴定细菌的生化试验有好多种,如碳源代谢试验、氮源代谢试验、碳源氮源利用试验、酶类试验、抑菌试验等。1、碳源代谢试验碳源是为微生物提供碳素来源的物质。用于合成菌体,碳源物质在细胞内经过一系列复杂的化学变化后成为微生物自身的物质(如糖类、脂质、蛋白质等),碳可占一般细菌细胞干重的一半。大多数碳源还能