几种常用特殊PCR技术
几种常用特殊PCR技术(一)逆转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR(RT-PCR)常用于基因表达研究(定量PCR)和逆病毒检测.设计RT-PCR引物时,应使引物分别位于不同的外显子中,以便区别cDNA和gDNA扩增产物。(二)多重PCR(Multiple PCR)在同一PCR反应体系中用多对引物(覆盖不同长度的靶序列)同时扩增。例如用多重PCR进行DNA缺失筛选(三) 套式PCR(nested PCR)用第一次PCR扩增区域内部的第二对(套式)引物对第一次PCR产物再次扩增,可以增加特异性和灵敏度。(四)非对称PCR(asymmetric PCR)在PCR反应体系中,限制引物之一的浓度(50-100:1)进行扩增,可得到单链PCR产物,可用于制备单链测序模板或单链DNA杂交探针。......阅读全文
几种常用的热电偶
1、铂铑10-铂热电偶组成: 由φ0)5mm的纯铂丝和直径相同的铂铑丝制成,分度号为S。铂铑丝为正极,纯铂丝为负极。 2)特点:热电性能好,抗氧化性强,宜在氧化性、惰性气氛中连续使用。长期适用的温度为1400℃,超过此温度时,即使在空气中纯铂丝也将再结晶而使晶粒增大。短期使用温度为
几种常用酸碱指示剂
各种不同的酸碱指示剂,具有不同的变色范围,有的在酸性溶液中变色,如甲基橙、甲基红等;有的在中性附近变色,如中性红、苯酚红等;有的则在碱性溶液中变色,如酚酞、百里酚酞等。几种常用酸碱指示剂及其变色范围列于下表。 几种常用酸碱指示剂指示剂变色范围pH颜色变化酸式 碱式pKHln浓度用量滴/10ml百里酚
几种传统定量PCR方法简介
1)内参照法:在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。2)竞争法:选
荧光定量PCR常用术语
基线:基线是早期循环的噪点水平,通常在第3和第15循环之间测量,这是因为在此期间还检测不到扩增产物引起的荧光值增加。用于计算基线的循环数量是可以改变的,如果使用高模板量或者靶标基因的表达水平高则循环数量需要减少。设置基线需要查看线性度扩增曲线的荧光数据。设置基线,使得扩增曲线的增长所开始的循环圈数大
荧光定量PCR常用术语
荧光定量PCR原理和过程已经非常清楚,为方便初学者更加清晰的学习,QIAGEN为大家汇总了荧光定量PCR常用术语,供您查阅参考使用。基线:基线是早期循环的噪点水平,通常在第3和第15循环之间测量,这是因为在此期间还检测不到扩增产物引起的荧光值增加。用于计算基线的循环数量是可以改变的,如果使用高模板量
有机萃取溶剂有哪几种比较特殊
正丁醇:大多数的小分子醇是水溶性的,例如甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇等。大多数的高分子量醇是非水溶性的,而是亲脂性的能够溶于有机溶剂。但是中间的醇类溶剂例如正丁醇是一个很好的有机萃取溶剂。正丁醇本身不溶于水,同时又具有小分子醇和大分子醇的共同特点。它能够溶解一些能够用小分子醇溶解的极性化合物,而同时又
几种特殊的光学显微镜及区别
今天我们要介绍几种特殊的光学显微镜和不同光学显微镜之前的区别。 摘要 1.暗视野显微镜 2.体视显微镜 3.荧光显微镜 4.相差显微镜 5.倒置显微镜 6.偏光显微镜 1暗视野显微镜 暗视野显微镜不具备观察物体内部的细微结构的功能,但可以分辨0.004μm以上的
常用的液位计有哪几种
液位计有连通器式、吹泡式、差压式、电容式等,测量物位的有超声波物位计和放射性物位计等。连通器式就是应用最普通的玻璃液位计,它的特点是结构简单、价廉、直观,适于现场使用,但易破损,内表面沾污,造成读数困难,不便于远传和调节。超声波物位计是利用超声波在气体、液体或固体中的衰减、穿透能力和声阻抗不同的性质
几种常用的样品前处理方法
一、溶剂提取法 同一溶剂中,不同物质具有不同的溶解度。利用混合物中各物质溶解度的不同将混合物组分完全或部分分离的过程称为萃取,也称提取,常用方法有以下几种: 1.浸提法: 浸提法又称浸泡法。用于从固体混合物或有机体中提取某种物质,所采用的提取剂,应既能大量溶解被提取的物质,又要不破坏被提取
常用的光学元件有下列几种
1、光源椭偏仪的理想光源是强度稳定,从紫外(一190nm)到近红外整个波长范围内输出近似为常数,目前大多选用xe或Hg一xe灯是比较合理的,但是它在uv(低于26Onm)强度较弱,而在880一1010nm具有很强的原子辐射谱线。也有采用激光作为光源(HeNe),进行单色椭偏测量。 2、偏振
关于污水COD常用的几种分类
污水COD的分类有很多种,不同的分类有不同的叫法。 按污水来源分类,污水处理一般分为生产污水处理和生活污水处理。生产污水包括工业污水、农业污水以及医疗污水等,而生活污水就是日常生活产生的污水,是指各种形式的无机物和有机物的复杂混合物,包括:①漂浮和悬浮的大小固体颗粒;②胶状和凝胶状扩散物;③纯
常用的比色法有几种?
常用的比色法有两种:目视比色法和光电比色法,前者用眼睛观察,后者用光电比色计测量,两种方法都是以朗伯-比尔定律(见紫外-可见分光光度法)为基础。
常用的几种细胞破碎方法介绍
细胞破碎方法简述 随着重组DNA技术得到广泛应用以来,生物技术发生了质的飞跃。很多基因工程产物都是胞内物质,必须将细胞破壁,使产物得以释放,才能进一步提取,因此细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤,破碎方法的得当与否,直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。现将近年来常用的几种细胞破碎方法介绍一
ELISA有哪几种常用方法
也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂。双抗体夹心法ELISA试剂是否受RF的影响。因此在使用一步法试剂测定标本中含量可异常增高的物质(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)时,操作步骤如下:1) 将特异性抗体与固相载体联结。RF是一种自身抗体,即先包被与固相抗原相应的抗体,然后加
几种常用液位计的优缺点归纳
1、玻璃管式液位计 原理:普通的连通器式液位计。 特点:结构简单、价廉、直观,适于现场使用,但易破损,内表面易沾染 污物,造成读数困难,不便于远传和调节。 改进建议:如液位计在室外使用可加伴热管,如需显示明显,可选双色形式。如介质是酸碱易腐蚀介质玻璃管可更换成F46管,两端阀门
几种常用生理盐溶液的配制
生理性溶液为代体液,用于维持离体的组织、器官及细胞的正常生命活动。它必须具备下列条件:⑴渗透压与组织也相等;⑵应含有组织、器官维持正常机能所必需的比例适宜的各种盐类离子;⑶酸碱度应与血浆相同,并具有充分的缓冲能力;⑷应含有氧气和营养物质。1.常用生理溶液的配制方法动物实验中常用的生理盐溶液有生理盐水
常用的原子化器有几种
主要区别在: 1、原子化器不同火焰原子化器:由喷雾器、预混合室、燃烧器三部分组成。特点:操作简便、重现性好。石墨炉原子器:是一类将试样放置在石墨管壁、石墨平台、碳棒盛样小孔或石墨坩埚内用电加热至高温实现原子化的系统。其中管式石墨炉是最常用的原子化器。原子化程序分为干燥、灰化、原子化、高温净化 。原子
几种常用生理盐溶液的配制
生理性溶液为代体液,用于维持离体的组织、器官及细胞的正常生命活动。它必须具备下列条件:⑴渗透压与组织也相等;⑵应含有组织、器官维持正常机能所必需的比例适宜的各种盐类离子;⑶酸碱度应与血浆相同,并具有充分的缓冲能力;⑷应含有氧气和营养物质。1.常用生理溶液的配制方法动物实验中常用的生理盐溶液有生理盐水
常用的脱气方法有如下几种
1. 吹氦脱气法。利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性,在0.1MPa压力下,以约60 mL/min流速通入流动相储液容器中10~15min,可以很有效地从流动相中排除溶解的空气,能排除接近80%的氧气。采用一个高效分布式喷射流装置,一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。这意味着1L氦
常用的物理镀膜方法有几种
一.光学镀膜材料(纯度:99.9%-99.9999%) 1. 高纯氧化物: 一氧化硅、SiO,二氧化铪、HfO2,二硼化铪,氯氧化铪,二氧化锆、ZrO2,二氧化钛、TiO2,一氧化钛、TiO,二氧化硅、SiO2,三氧化二钛、Ti2O3,五氧化三钛、Ti3O5,五氧化二钽、Ta2O5,五氧化二铌、
常用几种蒸汽流量计选型
V型锥差压式流量计的关键部件即节流件为独特的V型圆锥体,与其它差压式流量计相比,是一项突破性创新,克服了其他节流装置的缺点。虽然V型锥差压式流量计的测量原理与其它差压式仪表相似,但几何结构却完全不同,悬挂在管线中心的V型锥体具有独特的"整流"功能。流体在节流元件的作用下,流场将经过"非稳定流→
PCR测序方法你知道几种?(一)
自从 Sanger等(1975)引人双脱氧核苷三磷酸( ddNTP)作为链终止剂,DNA序列测定技术得到迅速发展。 ddNTP在DNA聚合酶作用下,通过其5三磷酸基团可以掺入到正在延伸的DNA链中,但由于其脱氧核糖3位置缺少一个羟基,因此不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键,使得DNA链的延伸
PCR测序方法你知道几种?(二)
(2)测序引物同位素标记测序引物:用[yP]ATP或[γP]ATP和T4多聚核苷酸激酶对引物的5末端进行同位素标记。引物浓度:0.1~0.2mmol/L非同位素标记测序引物:用荧光标记4种双脱氧核苷酸,可以进行以荧光为基础的双脱氧测序反应。 (3)DNA聚合酶应为无3→5外切活性的耐热DNA聚合酶。
PCR技术-PCR技术的应用
一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。
PCR技术-PCR技术的应用
一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。这也
PCR技术(一):PCR技术概论
PCR技术概论PCR技术简史PCR技术的基本原理PCR反应体系与反应条件PCR反应特点PCR扩增产物的分析 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产率高、 快速、 简便、重复性好、易自动化等突出
PCR技术-PCR技术的应用
一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一。
解析荧光定量PCR常用术语
基线:基线是早期循环的噪点水平,通常在第3和第15循环之间测量,这是因为在此期间还检测不到扩增产物引起的荧光值增加。用于计算基线的循环数量是可以改变的,如果使用高模板量或者靶标基因的表达水平高则循环数量需要减少。设置基线需要查看线性度扩增曲线的荧光数据。设置基线,使得扩增曲线的增长所开始的循环圈数
几种常用色谱柱的老化温度
几种常用色谱柱的老化温度柱名称最高使用温度,℃异三十烷140阿皮松L300PEG 20M200PEG 6000175Ucon HB 2000225阿皮松K、M250SE 30300OV 1300E 301300OV 17300SE 52300DC FS-1265250DC 703250SE 5
几种常用尿液检查标本留取的方法
1、尿常规: 尿常规检测可起到筛选的作用,简单、快捷,半小时~1小时即可出结果。检测内容包括:尿蛋白、隐血、尿糖、细胞成分等。 留取方法:新鲜晨尿或随机尿,取中段尿(将前面和最后面一部分尿液弃去,留取中间一段尿液)30~50 毫升,装入清洁容器如尿杯等送检。 2、尿沉渣红细胞计数及分类: 用于检测尿