几种常用特殊PCR技术

几种常用特殊PCR技术(一)逆转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR(RT-PCR)常用于基因表达研究(定量PCR)和逆病毒检测.设计RT-PCR引物时,应使引物分别位于不同的外显子中,以便区别cDNA和gDNA扩增产物。(二)多重PCR(Multiple PCR)在同一PCR反应体系中用多对引物(覆盖不同长度的靶序列)同时扩增。例如用多重PCR进行DNA缺失筛选(三) 套式PCR(nested PCR)用第一次PCR扩增区域内部的第二对(套式)引物对第一次PCR产物再次扩增,可以增加特异性和灵敏度。(四)非对称PCR(asymmetric PCR)在PCR反应体系中,限制引物之一的浓度(50-100:1)进行扩增,可得到单链PCR产物,可用于制备单链测序模板或单链DNA杂交探针。......阅读全文

几种常用特殊PCR技术

几种常用特殊PCR技术 (一)逆转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR) RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR(RT-PCR)常用于基因表达研究(定量PCR)和逆病毒检测. 设计RT-PCR引物时,应使引物分别位于不同的外显子中,以便区别cDNA和

几种常用特殊PCR技术

几种常用特殊PCR技术(一)逆转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR(RT-PCR)常用于基因表达研究(定量PCR)和逆病毒检测.设计RT-PCR引物时,应使引物分别位于不同的外显子中,以便区别cDNA和gDNA

几种常用特殊PCR技术

几种常用特殊PCR技术(一)逆转录PCR(Reverse transcription-PCR,RT-PCR)RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR(RT-PCR)常用于基因表达研究(定量PCR)和逆病毒检测.设计RT-PCR引物时,应使引物分别位于不同的外显子中,以便区别cDNA和gDNA

关于PCR,你知道多少?(五)-几种特殊的PCR

关于PCR,你知道多少?(五) ----几种特殊的PCR本篇文章由专业生化试剂供应商上海岚兴生物为您提供。 1、锚定PCR(anchored PCR)通常采用的PCR反应必须知道欲扩增的DNA或RNA片段两侧的序列,而在大多数情况下对某些序列本身或其旁侧序列并不清楚,“锚定PCR”可以帮助克服序列未

几种常用PCR仪的用途及介绍

 普通PCR仪:一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。主要是用作简单的,对目的基因退火温度的扩增。主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。梯度PCR仪:一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温

几种常用PCR仪的用途及介绍

  普通PCR仪  一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。主要是用作简单的,对目的基因退火温度的扩增。  主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。  梯度PCR仪  一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件

病理制片技术——常用特殊染色

1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1

原子吸收的几种特殊技术

1.背景校正技术AAS仪中已有氘灯和碘钨灯连续光源背景校正、塞曼效应背景校正和空心阴极灯强脉冲自吸背景校正等方法。其中塞曼效应校正背景还衍生出几种不同的磁场调制与排列方式。以下介绍各种背景方法要点。1.1连续光源背景校正:这是现代AAS仪中应用最广泛的一种AAS仪器背景校正方法,尤其在FAAS中,它

几种质谱仪常用进样技术

在室温和常压下,气态或液态样品可通过一个可调喷口装置以中性流的形式导入离子源。吸附在固体上或溶解在液体中的挥发性物质可通过顶空分析器进行富集,利用吸附柱捕集,再采用程序升温的方式使之解吸,经毛细管导入质谱仪。对于固体样品,常用进样杆直接导入。将样品置于进样杆顶部的小坩埚中,通过在离子源附近的真空环境

介绍几种特殊的天平

一、微分标牌天平  结构与普通标牌天平相似,不同的是:①横梁指针下端装有微分刻度牌。②立柱下端装有用以放大并在投影屏上显示微分读数值的电光系统。③吊挂系统增加了套筒式空气阻尼器,称量时能使横梁迅速停止摆动,便于定点准确读数。④在天平外框罩上装有凸轮杠杆式或其他形式的部分量程机械加码(一般为10~99

特殊血型都有哪几种

如RH、KIDD、MNSSU、P、DEIGO、LEWIS、KELLLUTHERAN、DUFFY以及其他一系列稀有血型系统。RH是恒河猴(RhesusMacacus)外文名称的头两个字母。兰德斯坦纳等科学家在1940年做动物实验时,发现恒河猴和多数人体内的红细胞上存在Rh血型的抗原物质,故而命名的。凡

工业常用的生物分离技术有哪几种

常用到得分离方法:盐析。常用的中性盐有硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等,但以硫酸铵为最多。得到的蛋白质一般不失活,一定条件下又可重新溶解,故这种沉淀蛋白质的方法在分离、浓缩,贮存、纯化蛋白质的工作中应用极广。萃取分离法(包括溶剂萃取、胶团萃取、双水相萃取、超临界流体萃取、固相萃取、固相微萃取、溶剂微萃取等)

几种特殊显微镜的应用

   1.荧光显微镜(fluorescencemicroscope)是用来观察标本中的自发荧光物质或以荧光素染色或标记的细胞和结构。荧光显微镜是以高压汞灯产生的短波紫外线为光源,并配有激发、阻断、吸热和吸收紫外线等滤片系统,标本中的荧光物质在紫外线激发下产生各种颜色的荧光,借以研究该荧光物质在细胞和

几种特殊显微镜的应用

 1.荧光显微镜(fluorescencemicroscope)是用来观察标本中的自发荧光物质或以荧光素染色或标记的细胞和结构。荧光显微镜是以高压汞灯产生的短波紫外线为光源,并配有激发、阻断、吸热和吸收紫外线等滤片系统,标本中的荧光物质在紫外线激发下产生各种颜色的荧光,借以研究该荧光物质在细胞和组织

几种特殊显微镜的应用

1.荧光显微镜 (fluorescence microscope)是用来观察标本中的自发荧光物质或以荧光素染色或标记的细胞和结构。荧光显微镜是以高压汞灯产生的短波紫外线为光源,并配有激发、 阻断、吸热和吸收紫外线等滤片系统,标本中的荧光物质在紫外线激发下产生各种颜色的荧光,借以研究该荧光物质在细胞和

常用的几种电桥介绍

  由电阻、电容、电感等元件组成的四边形测量电路叫电桥。人们常把四条边称为桥臂。作为测量电路,在四边形的一条对角线两端接上电源,另一条对角线两端接指零仪器。调节桥臂上某些元件的参数值,使指零仪器的两端电压为零,此时电桥达到平衡。利用电桥平衡方程Z1Z3=Z2Z4,即可根据桥臂中已知元件的数值求得被测

几种常用的转染方法

  一、物理-化学方法  脂质体转染法:采用脂质体转染试剂,将遗传物质如质粒, siRNA等转移至细胞内。  此种方法易于操作且不需要许多步骤或特殊的专业知识。通常情况下,你只需要一种转染试剂和一种兼容的生长培养基 (通常是低血清且具有良好的缓冲作用,使细胞在转染过程中保持活性)。不同的厂商有自己的

常用的几种分子标记

RAPD利用 10 个碱基的一个或几个随机引物非定点地扩增 DNA 片段,一般一个引物可扩增 6-12 条 DNA 片段,利用凝胶电泳分开扩增的片段,从而进行基因多态性研究。 RAPD 是一种能快速进行基因多态性研究的技术,并且由于不涉及印迹杂交、放射性自显影等技术,因此简便易行。 SSR 真核生物

PCR常用优化策略

 PCR过程中如果没有找到zui佳的扩增条件将会导致产生许多不确定的、不需要的产物,有时甚至没有目的产物;而在另一个极端,又可能没有扩增到任何产物。这时改变已知对引物-模板的忠实性和引物延伸有影响的诸多参数中的一两个,将会达到优化扩增的目的。其中zui主要的优化变量包括 Mg2+浓度、缓冲液pH值和

几种常用的蛋白鉴定方法

   传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。

几种常用的蛋白鉴定方法

传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。1  图象

几种常用的蛋白鉴定方法

 传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。 1  

几种分析电路的常用方法

  常用分析电路的方法有以下几种:  1、直流等效电路分析法  在分析电路原理时,要搞清楚电路中的直流通路和交流通路。直流通路是指在没有输入信号时,各半导体三极管、集成电路的静态偏置,也就是它们的静态工作点。交流电路是指交流信号传送的途径,即交流信号的来龙去脉。  在实际电路中,交流电路与直流电路共

几种常用的蛋白鉴定方法

几种常用的蛋白鉴定方法 传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的 comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基

几种常用的灭菌方法汇总

物理灭菌法(一)加热灭菌法加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸,导致微生物死亡。加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好。主要是因湿热灭菌时,有水分存在,蛋白质容易变性。水分又易使微生物膜壁润湿,湿热的穿透力比干热大。干热灭菌法  常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法

菌种保藏的几种常用方法

基本原理   微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。    低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。 保藏方法大致可

几种常用的蛋白鉴定方法

  传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析,或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力,不适合高流通量的筛选。 目前,所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。  

几种常用酸碱指示剂

各种不同的酸碱指示剂,具有不同的变色范围,有的在酸性溶液中变色,如甲基橙、甲基红等;有的在中性附近变色,如中性红、苯酚红等;有的则在碱性溶液中变色,如酚酞、百里酚酞等。几种常用酸碱指示剂及其变色范围列于下表。 几种常用酸碱指示剂指示剂变色范围pH颜色变化酸式 碱式pKHln浓度用量滴/10ml百里酚

常用的几种流量计

污水流量计按计量原理分类: 1、流量计有节省式流量计、毕保管流量计、均速管流量计、转子流量计、靶式流量计,这些流量计是运用伯努利方程原理,经过丈量流体差压信号反映流量;(延伸阅览…文丘里流量计) 2、流量计有涡轮流量计、涡街流量计、电磁流量计、多普勒超声波流量计、测速流量计,这些是经过丈量流体流速来

多肽常用的几种水解方法

虽然多肽合成的氨基酸组成分析方法较多,且趋向更灵敏、更精确、更简便、更快速,但还没有一种方法可以单独适用于所有氨基酸残基的检测,并且很多因素如温度、时间、水解试剂、水解方法及多肽合成样品中添加剂等对水解程度均有影响。常用的水解方法作简要介绍如下: 1.酸性水解酸性水解是应用最为广泛水解方法,可以使大