ELISA一步法误判高浓度抗HIV为阴性1例

酶联免疫吸附试验(ELISA)以其简便、快速、灵敏、特异性好,且适用于大批标本检测之特点,而广泛地应用于诸多领域,也是目前采供血机构筛查献血者各类传染性指标的主要检测方法。ELISA抗-HIV就其操作步骤来分有两类:即“一步法”与“二步法”,前者相对于后者,少一个洗板和加酶标记物再孵育的步骤,因此操作更为简便,为广大用户所青睐,国内有不少厂家在生产这类抗-HIV试剂盒。笔者在献血者血液标本的日常初、复检中,使用了二类各1家试剂,发现1例标本明显的一阴一阳结果,后经稀释法、二类多家试剂、抗-HIV确认试验,证实为ELISA“一步法”引起的假阴性结果,报告如下。1 材料与方法1.1 标本来源 标本采自本血液中心无偿献血者,采全血200ml于ACD-B三联袋T-200ml(上海市血液中心生产,批号0301406-14)内,并分离新鲜血浆135ml。1.2 试剂 抗-HIV ELISA试剂盒(厦门新创公司,批号200304660......阅读全文

ELISA一步法误判高浓度抗HIV为阴性1例

   酶联免疫吸附试验(ELISA)以其简便、快速、灵敏、特异性好,且适用于大批标本检测之特点,而广泛地应用于诸多领域,也是目前采供血机构筛查献血者各类传染性指标的主要检测方法。ELISA抗-HIV就其操作步骤来分有两类:即“一步法”与“二步法”,前者相对于后者,少一个洗板和加酶标记物再孵育的步

ELISA一步法误判高浓度抗HIV为阴性1例

酶联免疫吸附试验(ELISA)以其简便、快速、灵敏、特异性好,且适用于大批标本检测之特点,而广泛地应用于诸多领域,也是目前采供血机构筛查献血者各类传染性指标的主要检测方法。ELISA抗-HIV就其操作步骤来分有两类:即“一步法”与“二步法”,前者相对于后者,少一个洗板和加酶标记物再孵育的步骤,因此操

HBsAg假阳性和假阴性原因分析之ELISA法和金标法

ELISA法ELISA法假阴性原因1、标本用肝素或EDTA等抗凝处理易造成HBsAg检测结果假阴性,肝素抗凝血浆会增加OD值,可能与高浓度肝素具有强大的负电荷,能吸附酶标记物不易洗脱有关;EDTA、酶抑制剂可抑制ELISA系统中的辣根过氧化物酶活性,造成假阴性。2、标本保存不当,在冰箱内保存过久的标

ELISA检测方法之双抗体夹心法测抗原-|-实验

对于含多个抗原决定簇的大分子蛋白,使用双抗体夹心ELISA模式测定相当简便,现有的商品试剂盒基本上都采用此种测定模式。具体测定方法如下:1.首先以双抗体之一于碳酸盐缓冲液中4℃下过夜包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗体,洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗体后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭,洗涤去除未结

ELISA测定的常用模式——双抗体夹心法测抗原

对于含多个抗原决定簇的大分子蛋白,使用双抗体夹心ELISA模式测定相当简便,现有的商品试剂盒基本上都采用此种测定模式。具体测定方法如下:1.首先以双抗体之一于碳酸盐缓冲液中4℃下过夜包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗体,洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗体后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭,洗涤去除未结

艾滋疑云:HIV抗体阴性,抗原阳性

2020年12月1日是第33个“世界艾滋病日”,我国宣传活动主题是“携手防疫抗艾、共担健康责任”,英文主题为“Global solidarity,shared responsibility”。 本主题旨在强调在全球抗击新冠肺炎疫情背景下,加强团结协作,强化压实政府、部门、社会和个人“四方责任”,携手

血清感染性疾病标志物筛检中应重视的若干问题

血液筛查质量的高低,直接关系到受血者的安全。目前。国内采供血机构针对感染性疾病病原体筛检的标志物共有4种,即乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型地炎病毒抗体(抗HCV)、人免疫缺陷病毒抗体(抗HIV)和梅毒抗体。主要采用酶联免疫明附试验(ELISA)方法检测。方法模式有一步双抗体夹心法、间接法和

ELISA法检测的影响因素及其对策(一)

酶联免疫吸附试验(ELISA)是目前临床实验室检测免疫学指标最受欢迎、应用范围最广泛的方法之一,广泛应用于乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病以及结核等传染类疾病的诊断及激素的检测,具有灵敏度高、特异性强、快速简便、重复性好、成本低、环保且适合大批量人群筛查等优点,虽然操作简单,但是一些影响因素不容小觑,临床待

一例HIV阴性、胸腔积液诊断分析

患者,男,80岁。检查显示HIV阴性,右侧胸腔内大量积液。细胞涂片(图A,染色)显示出大量有浆母细胞特征的不规则大淋巴样细胞。流式细胞术表明这些不规则细胞模糊地表现为CD4阳性(图B),而其它T细胞(图B,C)和B细胞抗原(数据未显示)表达为阴性。同时,细胞块的免疫组织化学检查表明这些不规则细胞的C

化学发光法与酶联免疫吸附法进行血HIV检测效果评价

  获得性免疫缺乏综合征简称艾滋病(AIDS),是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)引起的一种严重传染性疾病。酶联免疫吸附法(Elisa)最早应用于艾滋病毒的筛查,1985年研制成功的第一代HIV Elisa试剂[2]敏感性和特异性欠佳,至今已发

乙肝ELISA检测中HBeAg和抗HBe双阳性原因分析

乙型肝炎病毒HBeAg阳性,表明病毒复制活跃、传染性强,与HBsAg同时阳性发生肝癌的危险系数增加60倍,抗-HBe阳性说明病毒复制减少,传染性弱。近年来,普遍使用ELISA一步法,在工作中遇到HBeAg和抗-HBe双阳性的少见模式,为了分析这一现象,笔者进行了研究,现报告如下。1 材料与方法 1.

ELISA法因孵育时间不同使丙肝抗体假阳性误判

酶联免疫吸附试验(ELISA),以其操作简便、快速、灵敏度高、特异性好之特点。被广泛应用于临床诊断,是目前检验科用于各类传染病指标大批量标本检测的主要方法,也是丙肝抗体常用的检测方法,但由于酶联免疫吸附试验(ELISA),在检测过程中影响因素诸多,会出现假阳性反应,现将ELISA两步法由于孵育时间不

人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)ELISA分析检测试剂盒

人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)ELISA分析检测试剂盒技术资料本试剂仅供研究使用  标本:血清或血浆试验原理:HIV试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知HIV浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将HIV和生物素标记的抗体同时温育。人抗人类免疫缺陷病毒抗体EL

如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果?

【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域,是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中,ELISA操作的各方面均对结果产生影响,如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外,一些非主观因素也会对结果

如何辨别ELISA实验中的假阴性和假阳性结果?

  【蛋白研究系列专题】-13丨ELISA的真真假假   ELISA被广泛应用于农业、养殖业、食品安全、临床诊断等领域,是一种灵敏度高、特异性强、操作简便的检测方法。在实际应用中,ELISA操作的各方面均对结果产生影响,如移液器的使用、样本存放、加样、溶血、试剂温度、避光等。除此之外,一些非主观因

HIV初筛实验室筛查检验程序

1、筛查试剂必须是经国家食品药品监督管理局注册批准、批批检合格、在有效期内的试剂。推荐使用经临床质量评估敏感性和特异性高的试剂。2、筛查方法(1)、常用的筛查方法是酶联免疫试验(ELISA)目前国内外主要使用第三代(双抗原夹心法)试剂,少数使用第二代试剂。血源筛查仍以第三代ELISA为主,国际上有些

ELISA法检测之抗HBc结果的解读

作者:西安交通大学第二附属医院检验科 安哲博士之前详细阐述了临床实验室采用ELISA法检测抗HBc需要对血清进行30倍预稀释的理论依据。在此我就抗HBc检测问题从不同角度做下列进一步解释。第一,基本点。临床实验室采用ELISA法检测抗HBc(30倍预稀释)是以能否检出HBVDNA为其检测灵敏度,而不

HIV抗体ELISA检测试剂比较

作者:怀化市第二人民医院  张廷华HIV抗体检测分为筛查试验(包括初筛与复检)和确证试验。常见的筛查方法有:1、酶免法(ELISA);2、化学发光与免疫荧光法;3、快速检测法(多为金标法)。常见的确证方法包括免疫印迹法(WB)、条带免疫法、放射免疫沉淀法(RIPA)及免疫荧光法(IFA)等。目前,国

Elisa试剂盒花板问题出现如何处理?

在结果"花板"的这一问题中,对检测数据造成很大影响,往往会使检测者做出误判,是实验中必须要注意和避免的。针对这个问题,我公司技术部人员做出分析总结,上海劲马为您讲谈Elisa试剂盒"花板"问题出现该如何是好。一、标本/试剂/1.标本:出入境人员的血液标本。2.试剂:HBsAg、HCV、HIV、梅毒试

酶联免疫吸附法检测HBV抗HBc假阳性的探讨

【摘要】  目的 鉴别并纠正酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙型肝炎抗-HBc过程中出现的假阳性结果。方法 在乙型肝炎“两对半”临床检测标本中随即挑选抗-HBc阳性的标本310份,根据“两对半”检测结果的不同模式分为三组:A组HBs-Ag(+)、抗-HBs(-)、HBeAg或抗-HBe(+)、抗-H

ELISA法检测HIV抗体的影响因素

酶联免疫吸附实验(ELISA)是一种常用的固相免疫测定方法,被广泛应用于各种抗原和抗体的测定。《全国艾滋病检测技术规范》(2009年修订版)中要求:各筛查实验室在进行抗体检测时,先用第一种筛查试剂(高敏感性ELISA)检测,出现阴性反应报告“HIV抗体阴性”,出现阳性反应时不可直接报告阳性结果,则用

乙肝两对半检测的影响因素分析对策(二)

    4、HooK效应影响     随着ELISA一步法的应用,一些标本中抗原含量过高,产生HooK效应。影响检测结果,采用同步稀释测定或使用线性范围高的两对半定量法可以减HooK反应的发生。     5、干扰物质的影响     有人认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不

双抗夹心-ELISA

实验概要夹心  ELISA 法是应用两种抗体协同测定抗原含量的方法(即:捕获抗体和检测抗体)。因此抗原必须包含至少 2 个能被抗体识别的抗原位点。在夹心  ELISA  中,单克隆抗体和多克隆抗体都可以被用作捕获抗体和检测抗体。单抗识别单一的抗原表位,可以区别抗原的微小差别,使抗原得到更精确地检测和

双抗夹心-ELISA

实验概要夹心  ELISA 法是应用两种抗体协同测定抗原含量的方法(即:捕获抗体和检测抗体)。因此抗原必须包含至少 2 个能被抗体识别的抗原位点。在夹心  ELISA  中,单克隆抗体和多克隆抗体都可以被用作捕获抗体和检测抗体。单抗识别单一的抗原表位,可以区别抗原的微小差别,使抗原得到更精确地检测和

ELISA假阳性结果和细胞假阴性结果

假阳性结果和假阴性结果1、标本的采集与保存ELISA试剂盒当标本采集保存不当产生溶血时,红细胞中的血红蛋白释放到血清中,血红蛋白具有过氧化物酶的性质,其通过吸附或“PP效应"(蛋白质间相互吸附的现象)结合后,可催化A、B液显色而造成假阳性标本采集保存不当致细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,会产生

丙型肝炎病毒的检测策略及其应用(二)

1、血液筛查:HCV可以通过多种途径传播,目前发达国家以静脉吸毒为主要传播途径;HCV也可通过血液传播,经皮的血液暴露感染HCV的危险性是HIV的10倍。世界卫生组织报告,从20世纪90年代开始,大多数工业国家开始对献血者进行血液筛查,如今这些国家通过血液感染HCV占总感染人群的比例明显降低。199

初筛实验室抗HIV临界值质控血清的制备及应用

 王锦恒   邓梅英    541001   桂林医学院附院         关键词  抗-HIV  质量控制  临界值   质控血清    ELISA 是目前公认的抗-HIV 较佳的筛选方法[1],但在实际工作中,笔者发现ELISA抗-HIV的检测受诸多因素影响,有系统误差(包括试剂盒质量问题 、

Structure:猫咪帮助找寻抗HIV新药物

  如果你最近还没有为你的猫咪做检查,那你也可能不知道你的猫咪可能感染了艾滋病毒。猫免疫缺陷病毒肯能会引起猫咪致病,其症状类似感染HIV病毒后的症状。但是科学家认为这是研究抗HIV新药的一种契机。  猫咪会怎么帮助人们抗击艾滋病呢?不管是猫免疫缺陷病毒(FIV)还是人免疫缺陷病毒都会依赖一种称为整合

抗hiv病毒药物有多少种

可以分为以下五大类。(1)反转录酶抑制药代表药物有齐多夫定、拉米夫定。(2)蛋白酶抑制药代表药物有洛匹那韦/利托那韦(克力芝)、达芦那韦、阿扎那韦等。(3)整合酶抑制药,代表药物有拉替拉韦、多替拉韦。(4)融合抑制药:这类药物阻断HIV病毒与CD4+T淋巴细胞膜融合,从而阻止HIVRNA进入CD4+

HIV测定(ELISA法)标准操作规程

1、检验目的    应用双抗原夹心酶联免疫法原理(ELISA)定性检测人血清、血浆标本中的HIV(1+2)型抗体的测定,用于HIV感染的辅助诊断,抗HIV药物治疗的效果的监测。2、原理采用夹心ELISA方法检测血清或血浆标本中人类免疫缺陷病毒HIV(1+2)型抗体,预包被高纯度基因重组HIV(1+2