琼脂糖凝胶电泳准备手册
准备干净的配胶板和电泳槽注意 DNA 酶污染的仪器可能会降解 DNA ,造成条带信号弱、模糊甚至缺失的现象选择电泳方法 一般的核酸检测只需要琼脂糖凝胶电泳就可以;如果需要分辨率高的电泳,特别是只有几个 bp 的差别应该选择聚丙烯酰胺凝胶电泳;用普通电泳不合适的巨大 DNA 链应该使用脉冲凝胶电泳。注意巨大的 DNA 链用普通电泳可能跑不出胶孔导致缺带。正确选择凝胶浓度 对于琼脂糖凝胶电泳,浓度通常在 0.5 ~ 2 %之间,低浓度的用来进行大片段核酸的电泳,高浓度的用来进行小片段分析。低浓度胶易碎,小心操作和使用质量好的琼脂糖是解决办法。注意高浓度的胶可能使分子大小相近的 DNA 带不易分辨,造成条带缺失现象。适合的电泳缓冲液 常用的缓冲液有 TAE 和 TBE ,而 TBE 比 TAE 有着更好的缓冲能力。电泳时使用新制的缓冲液可以明显提高电泳效果。注意电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低, PH 值上升,缓冲性能下降,......阅读全文
琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪载体概述
琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳色谱仪用于分离、鉴定和纯化DNA段,是分子克隆的核心技术之一。该技术操作简单,迅速,能分离用其它方法如密度梯度离心等不能满意分离的DNA段。此外,凝胶中DNA的位置可以用低浓度荧光插入染料如溴化乙锭直接观察到,甚至含量少至20pg的双链DNA在紫外线激发下也能直接检测到。这
电泳分析法聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的优势、缺点
聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的优势 稳定的化学交联凝胶 更大的分辨能力(尖锐频段) 可以容纳大量DNA,而不会显着降低分辨率 从聚丙烯酰胺凝胶中回收的DNA非常纯净 聚丙烯酰胺凝胶的孔径可以通过改变两种单体的浓度以容易且可控的方式改变。 适合分离低分子量片段 聚丙烯酰胺凝胶电泳(
纺织行业安全手册
(一)、安全操作规程1、开车前必须检查机台是否有修车标志或他人工作,确信无危险情况才能开车。二人在同机台上工作,应先打招呼再开车。2、开关车要逐台进行,严禁双手同时关车。3、巡回时要注意车挡情况,不准穿越车头小车挡,不准在车头停留.4、清理三指*、梭库、扬起背板上的飞花、 回丝、清扫吊综,处理刺轴绕
1100-MSD入门手册
1100 MSD入门手册
T迷宫实验手册
一、实验原理近半个世纪前,Kivy和Dember等人证明大鼠能辨别T-形迷宫(T-maze)两臂颜色的变化。他们发现,将雄性大鼠置于T-形迷宫的主干臂 15-30min,让其能看见、但不能进入黑白两臂。然后,改变其中一个臂的颜色,使两臂同为黑色或白色。让大鼠自由选择T-形臂。结果显示,大鼠总
siRNA用户手册
The siRNA user guide (revised May 6, 2004) Selection of siRNA duplexes from the target mRNA sequenceUsing Drosophila melanogaster lysates (Tuschl et
DNA纯化手册1
Purification of plasmid DNA (miniprep) with high yields using diatomaceous earthKyung-Soo Kim and Charles K. PallaghySchool of Botany, La Trobe Univer
DNA纯化手册2
Key points to observe: a. Use a endA1- E. coli strain for plasmid propagation and isolation whenever possible. The instability of plasmids isolated fr
示踪染料在凝胶电泳中起什么作用
凝胶电泳是一种常用的实验室技术,具有许多实际应用,包括DNA指纹图谱和基因组测序。该过程涉及使用电流分离DNA片段,同时跟踪通过过滤凝胶的分子运动速率。在无色DNA样品中添加蓝色或橙色跟踪染料,可以查看样品并获得有关DNA分子在电泳过程中如何运动的信息。鉴定是基于分子迁移后凝胶上DNA条带的大小。凝
聚丙烯凝胶电泳的原理及优点
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。 琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,
聚丙烯凝胶电泳的原理及优点
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。 琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,
琼脂糖凝胶电泳图上样孔中的条带跑不出来怎么回事
点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA根据目的条带长度来调整凝胶浓度,一般1.5%左右,也不一定。紫外灯下没见带,不一定没有出孔,而是量少看不到,可以测一下浓度看一下,或直接试跑一下PCR。电泳时间可能过长,一般75v×30min左右,但是具体看溴酚蓝得离孔距离和目的条带离孔距离。利用电泳可以确
琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳迁移速率的影响因素
琼脂糖主要在DNA制备电泳中作为一种固体支持基质,其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场中,在中性pH值下带负电荷的DNA向阳极迁移,其迁移速率由下列多种因素决定:(1)DNA的分子大小线状双链DNA分子在一定浓度琼脂糖凝胶中的迁移速率与DNA分子量对数成反比,分子越大则所受阻力越大,也越难于在凝胶孔隙中
DNA提取产物经琼脂糖凝胶电泳条带有两条是怎么回事
DNA提取产物经琼脂糖凝胶电泳条带有两条是怎么回事“从头拖到尾,另外一对引物就能做出来”说明不是引物之间形成二聚体,而是第一对引物的设计有问题(特异性很差).如果一定要扩增那个区,建议引物的位置向两边放一放.如果你没有好的设计软件,建议到Primer3去试试(目前最好的免费引物设计).
琼脂糖凝胶电泳图上样孔中的条带跑不出来怎么回事
点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA根据目的条带长度来调整凝胶浓度,一般1.5%左右,也不一定。紫外灯下没见带,不一定没有出孔,而是量少看不到,可以测一下浓度看一下,或直接试跑一下PCR。电泳时间可能过长,一般75v×30min左右,但是具体看溴酚蓝得离孔距离和目的条带离孔距离。利用电泳可以确
琼脂糖凝胶电泳图上样孔中的条带跑不出来怎么回事
点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA根据目的条带长度来调整凝胶浓度,一般1.5%左右,也不一定。紫外灯下没见带,不一定没有出孔,而是量少看不到,可以测一下浓度看一下,或直接试跑一下PCR。电泳时间可能过长,一般75v×30min左右,但是具体看溴酚蓝得离孔距离和目的条带离孔距离。利用电泳可以确
简述完整性比较好的总RNA琼脂糖凝胶电泳图的特征
第一,完整性比较好的总RNA琼脂糖凝胶电泳图呈现三条带,也就是电泳图常见的28s 18s 5s核糖体RNA。且它们三条带清晰无严重拖尾。第二,真核生物有4种rRNA,它们分子大小分别是5S、5.8S、18S和28S。RNA电泳中可以依据核糖体RNA的大小大致判断条带的大小,RNA电泳条带上,应是28
琼脂糖凝胶电泳图上样孔中的条带跑不出来怎么回事
点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA根据目的条带长度来调整凝胶浓度,一般1.5%左右,也不一定。紫外灯下没见带,不一定没有出孔,而是量少看不到,可以测一下浓度看一下,或直接试跑一下PCR。电泳时间可能过长,一般75v×30min左右,但是具体看溴酚蓝得离孔距离和目的条带离孔距离。利用电泳可以确
琼脂糖凝胶电泳图上样孔中的条带跑不出来怎么回事
点样没点好或者制孔没制好,样品没提出DNA根据目的条带长度来调整凝胶浓度,一般1.5%左右,也不一定。紫外灯下没见带,不一定没有出孔,而是量少看不到,可以测一下浓度看一下,或直接试跑一下PCR。电泳时间可能过长,一般75v×30min左右,但是具体看溴酚蓝得离孔距离和目的条带离孔距离。利用电泳可以确
Molecular-Devices高内涵应用系列手册类器官应用手册
一、从2D到3D,从3D到类器官正如上一期3D细胞应用手册的内容,3D细胞培养模型以其能够促进细胞分化水平和组织形成,已经在生物科研领域受到了广泛关注,这些在传统的2D细胞培养系统下是不可能实现的。包括用于治疗研究的各种传统模型都很好地复制了肿瘤的组织复杂性与遗传异质性。Respective fea
准备大组织的厚切片进行β半乳糖苷酶染色
实验材料小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂、试剂盒4%(m V)琼脂糖氰基丙烯酸盐黏合剂(如Superglue)l00 mmol L磷酸钠盐缓冲液 pH 8.0仪器、耗材振动切片机(如VT 1000S; Leica)实验步骤1) 固定和洗涤组织。2) 将组织放置在100 mL烧杯中,用吸管轻柔吸取
BIOXL高致病性猪蓝耳病一步法凝胶RTPCR诊断试剂盒说明
(针对中国猪蓝耳病变异株检测)一,产品简介一步法突变型猪生殖与呼吸综合症病毒反转录PCR检测临床样本和环境样本包括48 个扩增反应所需的试剂48次/盒请在使用前通读操作手册二. 试剂盒组成■ 25 管 扩增反应试剂球 (Reagent Sphere; 4oC 保存)■ 2 x 520 μl PRRS
BIOXL高致病性猪蓝耳病一步法凝胶RTPCR诊断试剂
(针对中国猪蓝耳病变异株检测) 一,产品简介 一步法突变型猪生殖与呼吸综合症病毒反转录PCR 检测临床样本和环境样本 包括48 个扩增反应所需的试剂48次/盒 请在使用前通读操作手册 二. 试剂盒组成 ■ 25 管 扩增反应试剂球 (Reagent Sphere; 4oC 保存)
PCR-RFLP分析技术(Polymerase-Chain-Reaction–Restriction-Fr...
【实验目的】1.熟悉PCR—RFLP分析技术原理及实验步骤。2.掌握琼脂糖凝胶电泳检测方法。3.了解PCR— RFLP在遗传病基因诊断中的作用。【实验原理】聚合酶链式反应(PCR)是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应,可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳的样品制备——组织样品准备
实验材料固体组织样品试剂、试剂盒溶解缓冲液仪器、耗材研钵实验步骤固体组织样品常在溶解缓冲液中破碎,最好的方法是在组织冷冻及液氮温度的条件下破碎。包裹在铝箔并贮存于液氮中的较小组织样品,可以夹在两个冷研块或基体中间用杵和研钵在液氮环境下压碎,大的组织块可在溶解缓冲液中用旋转叶片型匀浆器进行匀浆处理,但
凝胶电泳仪产品应用
凝胶电泳被广泛用于分子生物学、遗传学和生物化学:1.大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)分离,也可以使用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。2.蛋白质的凝胶电泳通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行(SDS-PAGE),或者非变
凝胶电泳仪的应用
凝胶电泳被广泛用于分子生物学、遗传学和生物化学:1.大的DNA或者RNA分子通常利用琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis)分离,也可以使用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。2.蛋白质的凝胶电泳通常在加入十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中进行(SDS-PAGE),或者
凝胶电泳色谱仪的支持介质
电泳仪是利用在电场作用下待分离样品中各分子带电性质、分子大小和形状等差异,使带电分子产生不同的迁移率,从而对样品进行分离。自由界面电泳仪没有支持介质,扩散和对流都比较强,影响分离效果。于是出现了固定支持介质的电泳仪,减少了扩散和对流等干扰作用。凝胶作为支持介质的引入大大促进了电泳仪的发展,使电泳仪成
什么是凝胶电泳
电泳是实验室中常用的一种技术,用于根据大小分离带电分子,例如DNA。凝胶电泳是实验室中常用的一种技术,用于分离带电分子,例如DNA ,RNA 和蛋白质。根据它们的大小。当电流通过凝胶时,带电分子穿过凝胶。在凝胶上施加电流,以使凝胶的一端带正电荷,而另一端带负电荷。带电分子的运动称为迁移。分子向相反电
谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白实验
pGEX 载体表达的外源蛋白与谷胱甘肽 S 转移酶融合,因此可以通过谷胱甘肽-琼脂糖亲和层析进行纯化。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料表达 GST 融合蛋白的大肠杆菌细胞试剂、试剂盒二硫苏糖醇谷胱甘肽洗脱缓冲液磷酸缓冲钠盐溶液Tri