科学家首次成功克隆大豆雄性不育基因MS1
近日，中国农业科学院作物科学研究所大豆育种技术创新与新品种选育创新团队联合国内优势单位，成功克隆了大豆遗传育种界寻觅50年的雄性不育基因MS1。5月4日，相关研究成果在线发表于《植物生物技术杂志》。 作科所孙石研究员介绍，大豆是典型的自花授粉作物，花器官小，人工杂交困难、效率低，不同地理来源品种常因花期不遇进一步限制了品种间的基因交流，导致大豆育成品种遗传基础狭窄，遗传改良进度缓慢。构建轮回选择群体是拓宽作物品种遗传基础的有效方法，我国学者利用引进的雄性不育ms1突变体，成功构建了针对不同产区的轮回选择基础群体，并选育出大豆新品种。然而，由于迟迟未找到该基因，无法建立高效的生物育种技术体系，严重限制了轮回选择育种的效率。 该研究针对不育基因的特点，提出了公共对照池分子克隆策略，即利用已公开的大豆品种重测序数据作为公共对照池，以ms1雄性不育纯合材料构建突变池，通过高通量测序分析，定位了ms1基因位点，并通过CRISPR......阅读全文
基因克隆的载体类型
①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制，且对受体细胞无害，不影响受体细胞正常的生命活动。②有多个限制酶（Restriction enzymes）切点，而且每种酶的切点最好只有一个，如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点，可适于多种限制酶切割的DNA插入。③含有复制起始位点，能够独立复制；通
目的基因的亚克隆
目的基因的亚克隆所谓亚克隆就是对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆，其目的在于对目的DNA进行进一步分析，或者进行重组改造等。 亚克隆的基本过程包括：(1)目的DNA片段和载体的制备；(2)目的DNA片段和载体的连接；(3)连接产物的转化；(4)重组子筛选。 一、试剂准备1．LB液体培养基：
基因克隆技术1
一、目的基因的获得目的基因是指所要研究或应用的基因，也就是将要克隆或表达的基因。获得目的基因是分子克隆过程中最重要的一步。目前用于获得目的基因的方法有几种，如限制性内切酶直接分离法、文库筛选法、体外扩增法和人工合成法等，其中限制性内切酶法直接分离目的基因和多聚酶链式反应（PCR）或逆转录-多聚酶链式
目的基因的亚克隆
实验题目 ：目的基因的亚克隆一、实验目的1、掌握细菌基因组提取的方法和原理。2、掌握限制性核酸内切酶处理基因组及其结果分析。3、掌握基因片段回收的方法。二、实验原理细菌基因组的提取：通过碱法或者酶法裂解细菌之后，可以将胞内的核酸和蛋白质全释放出来。DNA溶于1mol/L的NaCl中，不溶于 0.
基因克隆常见方法
、T4连接酶介导的DNA克隆传统的分子克隆，通常需要使用相同的限制性内切酶酶切载体和目的片段，使得载体和片段产生相同的粘性或平末端，使用T4 DNA连接酶对其进行连接，转化，挑取阳性克隆，得到重组质粒为了更方便的对DNA进行克隆，后续又将克隆的载体进行了简化，出现了T载体，这样就可以不用酶切，直接将
基因分离克隆的方法
1 基因芯片技术分离目的基因生物芯片是高密度固定在固相支持介质上的生物信息分子的微列阵。列阵中每个分子的序列及位置都是已知的，并按预先设定好的顺序点阵。基因芯片是生物芯片的一种，其上固定的是核算类物质，主要用于DNA、RNA分析。分为DNA芯片和微点阵两种。分离目的基因是是指从基因组中发现或找出某个
“电子”基因克隆－（sillcon－cloning）
利用计算机来协助克隆 基因，称为“电子”基因克隆 （sillcon cloning），是与定位克隆 、定位候选克隆 策略并列的方法之一，即采用生物信息学的方法延伸EST序列，以获得基因部分乃至全长的cDNA序列。EST数据库的迅速扩张，已经并将继续导致识别与克隆 新基因策略发生革命性变化。1
基因克隆技术概述
基因克隆技术是分子生物学的核心技术，其目的是获得某一基因或DNA片段的大量拷贝，用于深入分析基因的结构与功能，并可达到人为改造细胞以及物种遗传性状的目的。基因克隆的一项关键技术是DNA重组技术，它利用酶学方法将不同来源的DNA分子进行体外特异性切割，重新拼接组装成一个新的杂合DNA分子。在此基础上将
目的基因的亚克隆
目的基因的亚克隆可应用于：（1）进一步分析目的基因；（2）基因重组。实验方法原理亚克隆的基本过程包括：(1)目的DNA片段和载体的制备；(2)目的DNA片段和载体的连接；(3)连接产物的转化；(4)重组子筛选。实验材料E.coli JM109试剂、试剂盒牛肉膏胰蛋白胨NaCl微量细菌基因组抽提试剂盒
基因克隆的常用方法
基因克隆的常用方法 基因(gene)是遗传物质的最基本单位,也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能,还是要改变某个基因的功能,都必须首先将所要研究的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。本文就基因克隆的几种常用方法介绍如下。
Rf－基因对－细胞质雄性不育相关基因的作用
Rf基因可对 CMS 基因转录本的稳定性、转录后加工、翻译及翻译后加工、甚而基因的结构产生影响。对 CMS 小麦(T.timopheevi)的研究表明，CMS 相关片段 orf256 与线粒体基因 coxI 形成嵌合基因 orf256/coxI共转录，在 CMS 系中转录起始点位于 orf256
日本将研究基因异常与男性不育的关联
共同社8月28日报道说，日本东北大学等机构计划研究男性不育是否与特定基因异常存在关联。这一研究可能有助于寻找诊断和治疗男性不育的新方法。 在利用体外受精治疗男性不育的时候，医生会选择运动能力强的精子与卵子结合，但即使这样，许多情况下还是不能成功。科学家怀疑其中有未知的原因在发挥作用。 据报道，日本研
转基因食品致癌、致不育、欧美不吃都是谣言
针对转基因产品安全性问题，农业部于日前组织专题新闻发布会，公开说明情况，这是近年来头一次。 农业部表示，通过批准上市的转基因产品都是安全的，“转基因玉米致广西大学生精子活力下降”等谣言毫无事实依据，被科学界一一否定。 色彩鲜艳的圣女果是转基因产品，这是真的么? 目前，我国批准种植的转基因作
全球最大豆类基因库成立
哥伦比亚设立了一个新的种子基因库。图片来源：ALLIANCE OF BIOVERSITY AND CIAT/JUAN PABLO MARIN 近日，来自各国的科学家和官员在哥伦比亚为名为“未来之种”的基因库揭幕。该基因库将成为全球最大的豆
全球最大豆类基因库成立
哥伦比亚设立了一个新的种子基因库。图片来源：ALLIANCE OF BIOVERSITY AND CIAT/JUAN PABLO MARIN 近日，来自各国的科学家和官员在哥伦比亚为名为“未来之种”的基因库揭幕。该基因库将成为全球最大的豆
不发芽的大豆就是转基因吗
辽宁读者蒲女士问：前两天从超市买来的大豆泡后没有发芽，我看网上说不能发芽的大豆就是转基因的，这是真的吗？另外，网上还有很多鉴别转基因食品的方法，比如，转基因的土豆切开后不会变黑，这方法靠谱吗？ 中科院植物所植物学博士史军答：这位读者买到的大豆理论上来说不可能是转基因大豆。首先，尽管我国每年进口
大豆转基因试纸条使用说明
大豆转基因试纸条使用说明如下样品准备大豆样品用蒸馏水按1（重量）：5（体积）来稀释，例如取20g大豆，放入粉碎机中打碎，加入100ml蒸馏水，混匀10-15秒钟，静置30秒钟。使用方法取吸管吸一下取500ul提取的上清液加入样品杯中。取出试纸条，放入样品杯中，请不要触摸试纸条防护套。保持垂直方向将测
大豆“中黄13”基因组发布－为国产优异大豆品种培育定基础
中科院遗传与发育生物学研究所联合中国科技大学、江苏省农业科学院种质资源与生物技术所、北京贝瑞和康生物技术有限公司等，对中国国审大豆品种“中黄13”（Gmax_ZH13）的基因组进行从头组装，最终得到1.025 Gb的基因组序列，包含20条染色体和1条叶绿体。相关成果近日以封面文章形式在线发表于《中国
大豆基因组重测序表明:野生大豆遗传多样性更高
“中原有菽，庶民采之。”五千年前，华夏始祖将野生大豆驯化，变成今天的“五谷”之一。而今，一项被称为“大豆回家”的基因组研究计划在其故乡中国取得突破。 11月15日，由香港中文大学、华大基因研究院、农业部基因组重点实验室、中国农业科学院等单位合作完成的《31个大豆基因组重测序揭示遗传多样性和
目的基因的亚克隆3
2． 调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，最后在72℃ 保温7min。3． 结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。4．PC
基因分离克隆用什么方法
蛋白组是指细胞内全部蛋白的存在及活动方式，即基因组表达产生的总蛋白质的统称。功能蛋白质组指那些可能涉及到特定功能机理的蛋白质群体。主要研究方法为蛋白质双向电泳。通过高效液相色谱、质普对蛋白质序列进行分析，在借用分子生物学的手段则可以进行目的基因的分离。如：应用PCR进行分离目的基因：通过对蛋白质的序
复制型基因的克隆方法
将目的基因仍保留在染色体以外的克隆系统称为复制型基因克隆系统，以区别整合到染色体上的整合型克隆系统。尽管有大量不同的噬菌体，但所有已知的乳球菌复制型克隆系统都是由质粒构建的。乳球菌遗传学研究证明，乳球菌含有数量不等的质粒，多则十几个。它们当中一些编码重要的代谢物质，为了分析和克隆这些基因，以及了解它
分子标记基于图谱克隆基因
图位克隆(Map—bascd cloning））是近几年随着分子标记遗传图谱的相继建立和基因分子定位而发展起来的一种新的基因克隆技术。利用分子标记辅助的图位克隆无需事先知道基因的序列，也不必了解基因的表达产物，就可以直接克隆基因。图位克隆是最为通用的基因识别途径，至少在理论上适用于一切基因。基因
目的基因的亚克隆1
所谓亚克隆就是对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆，其目的在于对目的DNA进行进一步分析，或者进行重组改造等。亚克隆的基本过程包括：(1)目的DNA片段和载体的制备；(2)目的DNA片段和载体的连接；(3)连接产物的转化；(4)重组子筛选。 一、试剂准备 1．LB液体培养基：胰化蛋白胨（细
果蝇白眼突变基因的克隆
【实验目的】掌握T克隆的原理和方法。了解质粒提取的原理和方法。【实验原理】外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组，这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA 连接酶的作用下，有Mg2+ 、ATP存在的连接缓冲系统中，将载体分子与外源DNA分子进行连接。Taq DNA
目的基因的亚克隆2
2. 连接产物的转化⑴ 取100μl贮存于-70℃钙化菌，冰浴化开；⑵ 加入适量连接产物（一般不超过10μl，轻轻混匀，冰浴20min；⑶ 于42℃热休克90s，迅速转移至冰浴中，继续冰浴2-3min；⑷ 加入LB液体培养基200μl，于37℃缓摇孵育45min；⑸ 将培养物适量涂于1.5%琼脂LB
酵母菌基因克隆实验
实验材料 酵母菌实验步骤 1. 用含LEU 2作为选择标志的酵母菌DNA文库转化lea 2 cdc 101-1酵母菌株，在23℃培养，依据插入片段的大小，筛选2 000~20 000个Leu+转化体。 2. 影印平板转化体，将其转印到预热的选择性平板，并于37℃培养筛选互补温感突变的表型。过
我国学者发现导致男性不育的基因突变
中科院生物化学与细胞生物学研究所刘默芳研究组与上海市计划生育科学研究所施惠娟研究组合作，首次发现人类Piwi基因突变可导致男性不育，并深入揭示了其致病机理，为相关男性不育症的早期分子诊断及精准医疗提供了理论依据。近日，《细胞》在线发表了该项研究成果。 据悉，在我国的不孕不育夫妇中，男性因素约占
细胞质雄性不育与核基因组
对胞质遗传物质的研究无疑加深了人们对 CMS 现象分子机制的认识，但是 CMS 是一种核质互作的结果，因此核基因组在 CMS 发生过程的作用是不容忽视的。研究表明在核基因组中可能存在育性恢复(restorer of fertility，Rf)基因。在 Rf 基因存在下，与 CMS 相关的线粒体等胞质
细胞质雄性不育与线粒体基因组
根据研究，线粒体基因组的变异重组与 CMS 的关系最为密切。通过对不同材料的 CMS 系和保持系线粒体 DNA 的 RFLP、RAPD、AFLP 等多态性分析表明，CMS 系和保持系在线粒体基因组结构上具有显著差异。这可能与植物线粒体基因组自身的特点有关。与动物和真菌的线粒体基因组比起来，植物线粒体