科学家首次成功克隆大豆雄性不育基因MS1
近日，中国农业科学院作物科学研究所大豆育种技术创新与新品种选育创新团队联合国内优势单位，成功克隆了大豆遗传育种界寻觅50年的雄性不育基因MS1。5月4日，相关研究成果在线发表于《植物生物技术杂志》。 作科所孙石研究员介绍，大豆是典型的自花授粉作物，花器官小，人工杂交困难、效率低，不同地理来源品种常因花期不遇进一步限制了品种间的基因交流，导致大豆育成品种遗传基础狭窄，遗传改良进度缓慢。构建轮回选择群体是拓宽作物品种遗传基础的有效方法，我国学者利用引进的雄性不育ms1突变体，成功构建了针对不同产区的轮回选择基础群体，并选育出大豆新品种。然而，由于迟迟未找到该基因，无法建立高效的生物育种技术体系，严重限制了轮回选择育种的效率。 该研究针对不育基因的特点，提出了公共对照池分子克隆策略，即利用已公开的大豆品种重测序数据作为公共对照池，以ms1雄性不育纯合材料构建突变池，通过高通量测序分析，定位了ms1基因位点，并通过CRISPR......阅读全文
袁隆平：吃转基因稻不育－这话我从没说过
袁隆平 袁隆平与华南农业大学合作培育稻种—— 高端 访谈 “转基因不能一概而论。美国的转基因抗除草剂大豆进口到中国，我们的豆油、豆腐都来源于这些，都是没问题的。” 昨天，国家杂交水稻工程技术研究中心与国家植物航天育种工程技术研究中心战略合作协议签约仪式在华南农业大学举行。国家杂交水稻
细胞质雄性不育与叶绿体基因组
CMS 与叶绿体的关系还存在很大的争议。相对于植物线粒体而言，叶绿体基因组较为保守也较小(120～160 kb)，因此对它的认识要比对线粒体深入的多。研究发现植物叶绿体一般分为4个区：两个反向重复区，大单拷贝区和小单拷贝区。已有多种植物叶绿体的物理图谱被构建。对高粱的 CMS 系及相应保持系的叶绿体
院士团队揭示控制水稻杂种不育的自私基因系统
中国农科院作物科学研究所水稻功能基因组学创新研究组万建民院士领衔的科研团队系统解析了水稻粳稻与籼稻杂种不育问题及遗传特性，发现自私基因系统控制水稻杂种不育，并影响稻种基因组的分化。该研究有望解决水稻杂种不育难题。相关研究成果在线发表于《科学（Science）》期刊。 自私基因是指双亲杂交后，父
日本：对进口转基因大豆认证严格
日本目前没有商业化生产转基因大豆，进口转基因大豆要经过严格的审查和认证。 日本农林水产省消费安全局农产安全管理课负责人高松贤介绍，该课要对想进入日本市场的转基因大豆品种进行环境审查认证，检查是否会对环境造成影响，认证时间大概为两年。如果进口的转基因大豆用作食品，还须经过厚生劳动省食品
美科学家发现“超耐压”大豆基因
美国农业部科学家对美国大豆的祖先耐臭氧和其他压力的第一次筛查有了惊人的发现：世界上的超级耐压明星竟然来自一个名叫菲斯克比的瑞典北部小村庄。 参与这项研究的遗传学家汤米·卡特和植物生理学家肯特·伯基都供职于位于北卡罗来纳州罗利的农业研究所。卡特在大豆与固氮研究室工作，伯基在植物科学研究室工作
巴西开发具有抗旱能力的转基因大豆
巴西农牧业研究公司12日透露，该公司正在开发一种有自主知识产权的转基因大豆，该品种将具有较强的抗旱能力，非常适宜巴西的气候特点。 据该公司科学家亚历山大·内波穆塞诺介绍说，研究目前已进入到“田间试验”阶段，正在对该转基因品种的抗旱能力进行具体比较，并观察其能否保持品种的稳定性。 内波
陶氏转基因大豆在加拿大获批
陶氏益农和MS Technologies转基因大豆Enlist E3(DAS44406)获加拿大的批准。这是第一个具有三个叠加的抗除草剂基因的大豆，可以同时抗2，4-D、草甘膦和草铵膦。受主要出口市场的限制，公司计划于2015年推广该技术。同时，该大豆也在寻求美国、巴西和其他南美国家的种植许
大豆转基因试纸条的使用说明
样品准备大豆样品用蒸馏水按1（重量）：5（体积）来稀释，例如取20g大豆，放入粉碎机中打碎，加入100ml蒸馏水，混匀10-15秒钟，静置30秒钟。使用方法取吸管吸一下取500ul提取的上清液加入样品杯中。取出试纸条，放入样品杯中，请不要触摸试纸条防护套。保持垂直方向将测试纸条上标有“sample”
通过转基因试剂盒检测大豆方法
为了加强大豆制种田的生产质量，进一步做好种子企业制种活动的监管工作，种子管理站会定期组织技术人员对制种田进行转基因成分检测工作。通常，技术人员都会直接采用转基因试剂盒进行快速检测。 过去，很多朋友会通过肉眼区分转基因大豆，比如看大豆肚脐、大豆形状，大豆出油率等，这里想说的是，这些方式
中国大豆“中黄13”基因组发布
中科院遗传与发育生物学研究所联合中国科技大学、江苏省农业科学院种质资源与生物技术所、北京贝瑞和康生物技术有限公司等，对中国国审大豆品种“中黄13”（Gmax_ZH13）的基因组进行从头组装，最终得到1.025 Gb的基因组序列，包含20条染色体和1条叶绿体。相关成果近日以封面文章形式在线发表于《
爆米花香味的大豆！这个基因能做到
大豆富含大量优质蛋白和多种营养物质，是食品加工中的重要原料，其中，具备特殊芳香型的大豆品种拥有广阔的应用前景。近日，河南农业大学生命科学学院教授王燃团队在《生物技术通报（英文）》（aBIOTECH）发表了研究论文。研究结果揭示了大豆香气形成的分子机制，为创造芳香型大豆新品种奠定了理论基础。 2
田志喜：给中国大豆“嵌入”高产基因
走进中国科学院遗传与发育生物学研究所(以下简称遗传发育所)研究员田志喜的实验室，最先入耳的是一阵阵“哗啦”声——一群学生正扬起刚收获不久的大豆。金黄的豆粒在柳条编织的簸箕中上下翻飞，与农家的丰收景象别无二致。而在走廊另一侧，现代化的科研仪器正在井然有序地运行，古老的农作物，在这里被赋予了新的价值
基因工程操作技术及原理之基因克隆
1．克隆已知序列的基因 根据已知基因的序列设计引物(primer)，利用PCR方法克隆基因。即使不同种属之间，基因编码区序列的同源性高于非编码区的序列。在某种植物的同源基因被克隆的条件下，可先构建eDNA文库或基因组文库，然后以该基因(或部分序列)为探针来筛选目的基因的克隆。 2．功能克隆 根据基
基因治疗特异正常基因的分离与克隆
应用重组DNA和分子克隆技术结合基因定位研究成果，已有不少基因并将会有更多人类基因被分离和克隆，这是基因治疗的前提，在当代分子生物技术条件下，一般来说，只要有基因探针和准确的基因定位，任何基因都可被克隆。除此，如今既可人工合成DNA探针，还可用DNA合成仪在体外人工合成基因，这些都是在基因治疗前，分
基因工程操作技术及原理之基因克隆
1．克隆已知序列的基因根据已知基因的序列设计引物(primer)，利用PCR方法克隆基因。即使不同种属之间，基因编码区序列的同源性高于非编码区的序列。在某种植物的同源基因被克隆的条件下，可先构建eDNA文库或基因组文库，然后以该基因(或部分序列)为探针来筛选目的基因的克隆。2．功能克隆根据基因的产物
生物节律转基因猪克隆成功
由深圳华大基因研究院、丹麦奥尔胡斯大学、深圳华大方舟生物技术有限公司等单位组成的科研团队，采用手工克隆技术，首次将人体生物钟基因突变体转入到猪体内，从而成功获得生物节律转基因模型猪。相关研究成果已在《公共科学图书馆・综合》上发表。 生物钟存在于所有生物中，从绿藻
我国成功克隆稻米品质关键基因
由中科院院士张启发领衔的水稻国家研究团队成功克隆了第一个稻米垩白率的主效基因Chalk5,并对其调控垩白形成的分子与细胞学机理进行了深入研究。研究成果不仅为优质稻米的分子育种提供了目标基因，还为水稻优质育种实践提供了理论指导，也为进一步阐明作物品质调控的生物学机理提供了理论依据。
原核表达——基因克隆技术
原核表达可以用于检测（1）发生在原核生物内的基因表达。（2）通过基因克隆技术，将外源目的基因，通过构建表达载体并导入表达菌株的方法，使其在特定原核生物或细胞内表达。实验方法原理一个完整的表达系统通常包括配套的表达载体和表达菌株。如果是特殊的诱导表达还包括诱导剂，如果是融合表达还包括纯化系统或者Tag
关于复制型基因的克隆介绍
将目的基因仍保留在染色体以外的克隆系统称为复制型基因克隆系统，以区别整合到染色体上的整合型克隆系统。尽管有大量不同的噬菌体，但所有已知的乳球菌复制型克隆系统都是由质粒构建的。 乳球菌遗传学研究证明，乳球菌含有数量不等的质粒，多则十几个。它们当中一些编码重要的代谢物质，为了分析和克隆这些基因，以
DNA基因探针的克隆方法介绍
对于基因探针的克隆尚有更快捷的途径。这也是许多重要蛋白质的编码基因的克隆方法。该方法的第一步是分离纯化蛋白质，然后测定该蛋白的氨基或羟基末端的部分氨基酸序列，然后根据这一序列合成一套寡核苷酸探针。用此探针在DNA文库中筛选，阳性克隆即是目标蛋白的编码基因。值得一提的是真核细胞和原核细胞DNA组织有所
小鼠βactin基因的克隆表达（1）
动物组织RNA的提取实验目的：掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理：Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液，其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性，随后加入氯仿，酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同，造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中，RNA
家蚕油蚕突变基因的克隆
【实验原理】外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组，这样重新组合的DNA叫做重组体或重组子。重组的DNA分子是在DNA 连接酶的作用下，有Mg2+ 、ATP存在的连接缓冲系统中，将载体分子与外源DNA分子进行连接。Taq DNA聚合酶扩增的PCR产物，其DNA双链前后末端都有一个游离的A碱
PCR技术应用基因克隆的应用
运用 PCR 技术、基因克隆和亚克隆比传统的方法具有更大的优点。由于 PCR 可以对单拷贝的基因放大上百万倍,产生微克(μg)级的特异 DNA 片段,从而可省略从基因组 DNA 中克隆某一特定基因片段所需要的 DNA的酶切、连接到载体 DNA 上、转化、建立 DNA 文库及基因的筛选、鉴定、亚克隆等
目的基因的亚克隆（subcloning）1
所谓亚克隆就是对已经获得的目的片段进行重新，其目的在于对目的进行进一步分析，或者进行重组改造等。亚的基本过程包括：(1)目的片段和载体的制备； (2)目的片段和载体的连接；(3)连接产物的转化；(4)重组子筛选。一、试剂准备1．LB液体培养基：胰化蛋白胨（细菌培养用）10g，酵母提取物（细菌培养用）
功能基因cDNA－5’末端的克隆
一．原理⑴ 5’-RACE法① 以目的mRNA 为模板，使用5’末端P 标记的RT 引物进行反转录反应，合成1ststrand cDNA。② 使用RNase H 分解 Hybrid DNA-RNA中的RNA链。③ 使用T4 RNA Ligase 使单链cDNA进行环化或形成首尾连接物。④ 进行PCR
基因克隆的载体必要条件
⑴载体必须是复制子。⑵具有合适的筛选标记，便于重组子的筛选。⑶具备多克隆位点（MCS），便于外源基因插入。⑷自身分子量较小，拷贝数高。⑸在宿主细胞内稳定性高。
目的基因的亚克隆（subcloning）2
四、连接产物的转化1.感受态细胞的制备⑴ 保存于-70℃的DH5α（或其他菌种）用接种环划菌于1.5%琼脂平板上，37℃恒温倒置培养至单菌落出现（约14-16 hr）。⑵ 挑取单菌落，接种于2.0ml LB液体培养基中，37℃恒温，250g振荡培养过夜（约12hr）。⑶ 取0.5ml 过夜培养液，接
功能基因－cDNA－3’末端的克隆
一．原理 (1) 以目的mRNA 为模板，使用Oligo dT-3sites Adaptor Primer 进行反转录反应，合成1st Strand cDNA。 (2) 使用含有KpnI、XbaI、BamH I 酶切位点的上游特异性引物和3sites Adaptor Primer进行PCR反应。 (
小鼠βactin基因的克隆表达（4）
实验步骤：（1）诱导靶蛋白表达分别挑取对照菌和重组菌1~2个菌落，接入5ml含Amp（30μg/ml）的LB培养液，37℃振荡培养过夜。取5ml过夜培养物接入500ml含Amp（30μg/ml）的LB培养液，37℃振荡培养2h以上，至对数中期（A550=0.5~1.0）。向诱导管中加入IPTG使其浓
原核表达之目的基因克隆
1. 了解实验课题对目的蛋白的要求包括：目的蛋白分子量有多大，表达目的（是蛋白结晶、药剂结合还是制备抗体，不同目的对蛋白要求不同）；是否要其可溶；是胞内表达还是分泌表达，是组成型表达还是诱导型表达；另外，还要了解蛋白表达后需要采用什么样的方式进行纯化，纯化标签有多大，蛋白纯化后是否需要将标签去除（即