卫星实验原理及操作鉴别流感嗜血杆菌
卫星现象(satellite phenomenon)概念:当将金黄色葡萄球菌与流感嗜血杆菌在同一血琼脂平板上共同培养时,由于前者能合成较多的V因子,促进后者生长,故在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大,距离越远的菌落越小,此现象称为“卫星现象”(satellite phenomenon) 方法:挑取可疑菌落密涂划种于血平板上和M-H平板上,再将金黄色葡萄球菌点种或划种于其上,35℃孵育24 h 结果:如葡萄球菌菌落邻近处被检菌的菌落较大,远离葡萄球菌落邻近处被检菌的菌落较大,远离葡萄球菌菌落处的菌落小或不生长,即卫星试验阳性 注意点:在血平板上点种葡萄球菌时,X、V因子都具备; 在M-H平板上接种葡萄球菌时,只具备V因子; 流感嗜血杆菌生长需要X和V因子; 副流感嗜血杆菌生长只需要V因子; 意义:能在M-H平板上呈卫星生长的菌为副流感嗜血杆菌 不能在M-H平板上呈......阅读全文
卫星实验原理及操作鉴别流感嗜血杆菌
卫星现象(satellite phenomenon)概念:当将金黄色葡萄球菌与流感嗜血杆菌在同一血琼脂平板上共同培养时,由于前者能合成较多的V因子,促进后者生长,故在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大,距离越远的菌落越小,此现象称为“卫星现象”(satellite phen
鉴别流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌的卫星现象
卫星现象(satellite phenomenon)概念:当将金黄色葡萄球菌与流感嗜血杆菌在同一血琼脂平板上共同培养时,由于前者能合成较多的V因子,促进后者生长,故在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大,距离越远的菌落越小,此现象称为“卫星现象”(satellite phe
免疫荧光实验原理及操作
免 疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体 分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。
火箭免疫电泳实验原理及操作
一、实验原理火箭免疫电泳(rocket immunoelectrophoresis,RIEP)是将单向免疫扩散和电泳相结合的一种定量检测技术。电泳时,含于琼脂凝胶中的抗体不发生移动,而在电场的作用下促使样品中的抗原向正极泳动。当抗原与抗体分子达到适当比例时,形成一个形状如火箭的不溶性免疫复合物沉
与流感嗜血杆菌共同培养可见卫星现象的细菌
当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血平板上共同培养时,由于后者能合成Ⅴ因子释放于培养基中,故在金黄色葡萄球菌菌落周围,流感嗜血杆菌菌落较大,远离金黄色葡萄球菌菌落则小,此称为卫星现象,有助于流感嗜血杆菌的鉴定
ISSR分子标记的实验原理及操作流程
ISSR(inter-simple sequence repeat)标记是一种类似RAPD,但利用包含重复序列并在3’或5’锚定的单寡聚核酸引物对基因组进行扩增的标记系统,即用SSR引物来扩增重复序列之间的区域。其原理具体是,ISSR标记根据生物广泛存在SSR的特点,利用在生物基因组常出现的SSR本
RAPD分子标记的实验原理及操作流程
RAPD标记RAPD技术的全称是随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA),此技术建立于PCR基础之上,使用一系列具有10个左右碱基的单链随机引物,对基因组的DNA全部进行PCR扩增,以检测多态性。由于整个基因组存在众多反向重复序列,因此须对每一随机
嗜血杆菌属菌种与相关菌种鉴别试验
菌 种 需 要 X 因 子 需 要 V 因 子 靛 基 质 鸟 氨 酸 脱 羧 酶 赖 氨 酸 脱 羧 酶 葡 萄 糖 蔗 糖 乳 糖 甘 露 糖 硝 酸 盐 还 原 触 酶 嗜沫嗜血杆菌 + - - - - + + + - + - 副嗜沫嗜血杆菌 - + - - - + + + - +
人类染色体核型分析实验原理及操作步骤
实验原理核型(karyotype)一词在20世纪20年代首先由苏联学者T. A. Levzky等人提出。核型分析的发展有三项技术起了很重要的促进作用,一是1952年美籍华人细胞学家徐道觉发现的低渗处理技术,使中期细胞的染色体分散良好,便于观察;二是秋水仙素的应用便于富集中期细胞分裂相;三是植
兔肝RNA的制备及测定实验原理和操作步骤
实验原理细胞内大部份RNA均与蛋白质结合在一起,并且多以核蛋白的形式存在。因此,分离制备RNA 时,首先遇到的是必须使RNA与蛋白解离,并除去蛋白质。由于RNA的种类来源和存在形式不同,所用的制备方法各异,一般常用的方法有,盐酸胍法,去污剂法和苯酚法。其中,以苯酚法使用较为广泛。产品纯度高,适合
制冰机工作原理及操作原理
制冰机是一种将水通过蒸发器由制冷系统制冷剂冷却后生成冰的制冷机械设备。现代生活艺术中经常会用到制冰机,但是很多人对它并不了解。下面我们就来看看制冰机的工作原理及操作原理。 制冷机的工作原理为: 1,储水箱的冷冻水用水泵不断循环流经板式或分格的蒸发器;2,压缩机运转后经吸气-压缩-排气-冷凝(
转膜实验原理与操作步骤
转膜是把DNA从琼脂糖凝胶中转移到固相支持物(一般是尼龙膜)上固定,是进行各种后续研究(如 RFLP 分析,阳性克隆的筛选验证等所有涉及分子杂交的研究)的前提。 实验目的: 掌握 Southern blotting 的原理及操作步骤 实验原理: 1. 转膜的方式: 向上的毛细管
熔点仪的原理及操作
熔点仪是按照药典规定的熔点检测方法而设计的,该仪器利用电子技术实现温度程控,初熔和终熔数字显示。 应用了线性校正的铂电阻作检测元件,并用电子线路实现了快速“起始温度”设定及四档可供选择的线性的升温速率。 仪器采用药典规定的毛细管作为样品管,通过高倍率的放大镜观察毛细管内样品的熔
ELISA实验原理及实验过程
实验原理ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通
ISSR(intersimple-sequence-repeat)分子标记的实验原理及操作
ISSR标记ISSR(inter-simple sequence repeat)标记是一种类似RAPD,但利用包含重复序列并在 3’或5’锚定的单寡聚核酸引物对基因组进行扩增的标记系统,即用SSR引物来扩增重复序列之间的区域。其原理具体是,ISSR标记根据生物广泛存在 SSR的特点,利用在生
叶绿体的分离与观察实验原理和实验操作
实验原理将植物组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心,是分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状、稠密度,也与离心力以及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中,同一时间内,密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间,就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大
实验室集中供气的操作原理
实验室供气有二级减压和多级减压: 二级减压即气瓶端采用一级减压阀和末端采用一级减压阀来达到二级减压的目的。实验室一般推荐采用二级减压,保证气体的纯度和节约成本,也能达到多级减压的效果。 多级减压即气瓶端采用二级减压阀或多级减压阀和末端采用二级减压阀或多级减压阀来达到多级减压的目的。减压效果同
RNA甲醛变性电泳实验原理和操作
[原理] 用溴化乙锭等荧光染料示踪的核酸电泳结果可用于判定核酸的纯度。由于DNA分子较RNA分子大许多,电泳迁移率低;而RNA中以rRNA最多,占到80%~85%,tRNA及核内小分子RNA占15%~20%,mRNA占1%~5%。故总RNA电泳后可呈现特征性的三条带。在原核生物为明显可见的23S
PCRSSCP实验原理和操作步骤
【实验目的】1.了解PCR-SSCP技术的原理。2.了解并熟悉PCR-SSCP技术的步骤。 【实验原理】 PCR-SSCP是1989年日本Orita等创建的筛查突变的新技术。它是一种简单、快速、经济的点突变筛查手段。PCR-SSCP技术的基本原理是PCR扩增后的DNA片段经变性成单链DNA,
PCRDGGE实验原理和操作步骤
【实验目的】 1.了解PCR-DGGE技术的原理。 2.了解并熟悉PCR-DGGE技术的步骤。 【实验原理】 变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链,称之为变性。核酸50%发生变性时的温度称为熔解温度(Tm
cDNA的合成实验原理和操作步骤
一、实验目的掌握植物cDNA合成的原理和方法二、实验原理反转录酶主要用于体外cDNA的合成。目前最常用的反转录酶(reverse transcriptase) 有SuperscriptII、M-MLV和AMV等。它们具有依赖于RNA或DNA的DNA聚合酶活性和RNaseH酶活性,可以以RNA分子
DNA酶切及凝胶电泳实验原理、仪器试剂和操作步骤
【实验原理】DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此他们能以相同的速度向正极方向移动。在一定的电场强度下,DNA 分子的迁移速度取决于分子
氮吹仪工作原理及操作
氮吹浓缩加热装置适用于液相、气相及质谱分析中的样品制备。它采用认可方法,将氮气吹入加热样品的表面进行样品浓缩,具有省时、操作方便、容易控制等特点,可很快得到预期的结果。采用固相萃取前处理技术代替传统的液体萃取和层析技术,可使样品迅速分离、净化;而使用吹氮加热方式取代常用的旋转蒸发仪进行浓缩,可使分析
western-blot-的原理及操作步骤
原理Western Blot与Southern印迹杂交或Northern印迹杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素膜NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附
IHC原理、操作及注意事项
免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的一项技术。IHC的实验流程和方法总体不难,但做出漂亮的染色结果却不容易,
Southern-Blot原理及操作方法
原理:将待检测的DNA分子用/不用限制性内切酶消化后,通过琼脂糖凝胶电泳进行分离,继而将其变性并按其在凝胶中的位置转移到硝酸纤维素薄膜或尼龙膜上,固定后再与同位素或其它标记物标记的DNA或RNA探针进行反应。如果待检物中含有与探针互补的序列,则二者通过碱基互补的原理进行结合,游离探针洗涤后用自显影或
移液器的工作原理及操作使用
移液器的工作原理移液器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。 在活塞推动下,排出部分空气, 利用大气压吸入液体, 再由活塞推动空气排出液体。 使用移液器时,配合弹簧的伸缩性特点来操作,可以很好地控制移液的速度和力度。 二、移液器的操作使用移液器规范操作步骤1.1 设定移液体积从大体积调
测汞仪原理及操作注意
测汞仪是一种高灵敏度的测汞用的原子吸收光谱的仪器。在一些金属矿床上方空气中的汞异常往往低到几至几十纳克/立方米。原有各种测汞的方法无法发现此种微弱异常。近年来研究成功的测汞仪,其灵敏度可以达到l纳克/立方米。它是利用汞蒸气能强烈吸收253.7纳米谱线的特性而设计的。测汞仪包括汞灯、气体吸收室及光电放
RAPD分析的原理及操作技术
1 目的分子标记是一类建立在分子水平上的遗传标记,它同样具有遗传标记的两个特点,即可遗传性和可识别性。广义的分子标记包括同工酶和DNA分子标记两类,狭义的分子标记则仅指后者。DNA分子标记通常是一些小分子量的DNA片段(几十到2000bp左右),它们大量存在于真核生物的基因组内,能够通过特定的技术和
液相色谱仪操作及原理
工作原理:流动相通过输液泵流经进样阀,与样品溶液混合,流经色谱柱,在色谱柱中进行吸附、分离,最后每一组分分别经过检测器转变为电讯号,在色谱工作站上出现相应的样品峰。液相色谱仪操作过程:1、开机操作:①打开液相色谱仪电源,用Harb相连接时,注意Harb电源,打开计算机,打开Bootp Server(