T淋巴细胞在CD4/CD8散点图上究竟分为几群?
做淋巴细胞亚群的FLOWER,可能都明白,CD3+T细胞分为CD4+和CD8+两类,前者为Th,后者为Tc,两者比例失调可能跟免疫功能失衡有关,但是你只看到这两群单阳性的细胞吗?实际上,在CD4/CD8散点图上,我们仔细分析,还是可以看到一些稀有亚群,观察这些稀有亚群,相信你可以写出更多好文章。下图是从Ronald N. Germain et al. T-CELL DEVELOPMENT AND THE CD4–CD8 LINEAGE DECISION. NATURE REVIEWS | IMMUNOLOGY, 2002上摘录的一幅模式图: 群体最大的是DN(CD4、CD8双阴性)、CD4+SP(CD4单阳性,即Th)和CD8+ SP(CD8单阳性,即Tc),其它还有DP(CD4+CD8+)、CD4 low CD8 low、CD4low CD8+、CD4+CD8 low这四类,这篇综述中讲到,DN是淋......阅读全文
T淋巴细胞在CD4/CD8散点图上究竟分为几群?
做淋巴细胞亚群的FLOWER,可能都明白,CD3+T细胞分为CD4+和CD8+两类,前者为Th,后者为Tc,两者比例失调可能跟免疫功能失衡有关,但是你只看到这两群单阳性的细胞吗?实际上,在CD4/CD8散点图上,我们仔细分析,还是可以看到一些稀有亚群,观察这些稀有亚群,相信你可以写出更多好文章。下图
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(二)
2 不同浓度的PMA刺激后人T淋巴细胞CD4、CD8和CD3的表达。24孔细胞培养板中,每孔加入约5×105个细胞,加入RPMI 1640培养基至总体积1ml。加入不同浓度的PMA(10ng、20ng和50ng终浓度)和500ng/ml Ionomycin共同刺激人外周血单个核细胞,同时加入
如何用流式细胞仪测CD4,CD8并分析
第一步是在FSC, SSC散点图上根据细胞大小gate出淋巴细胞群。然后在gate出单细胞群。检测CD4和CD8,应该还要同时染色CD3. 先选中CD3阳性的细胞(T细胞),然后把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示,可以分为四个象限。分别代表CD4阳性,CD8阳性,双阳性,和无染色的。正常情况下
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(三)
2 不同时间的PMA刺激对小鼠外周血T淋巴细胞抗原表达的影响。PMA刺激8h后CD4阳性T淋巴细胞的表达没有明显下降。PMA刺激12h后,CD4阳性T淋巴细胞的表达明显下降。而CD8表达在8h和12h均没有明显下降。典型的检测结果见图2。图2 不同时间的PMA刺激对小鼠外周血T淋巴细胞抗原表达的影响
CD3/-CD4-/CD8-T-cell-subset-counts
DescriptionProcedure for CD3/ CD4 /CD8 T cell subset counts using CD3-FITC / CD4-PE / CD8-PECy5 antibody Procedure1. One 5 ml round bottom tube (Falco
如何运用流式细胞仪进行T淋巴细胞亚群分析
简单的概括:1、先在FSC/SSC散点图gate出淋巴细胞;2、然后把淋巴细胞显示到柱状图,gate出CD3阳性的(T细胞);3、再把T细胞显示到散点图,横坐标,纵坐标分别为CD4和CD8。
关于T细胞亚群(CD2,CD4,CD8)的简介
T细胞是一个不均一的细胞群体,分类方法有多种。按细胞表面分化抗原(CD)的不同,可分为CD4+和CD8+两大亚群。CD4+T细胞识别MHCⅡ类分子所提呈的外源性抗原肽,活化后主要分化为Th。CD8+T细胞识别MHCⅠ类分子所提呈的内源性抗原肽,活化后主要分化为CTL。CD4+T细胞也是不均一的细
猴T细胞亚群(CD3、CD4、CD8)酶联免疫分析
猴ELISA试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猴T细胞亚群(CD3、CD4、CD8)水平。用纯化的猴T细胞亚群(CD3、CD4、CD8)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入T细胞亚群(CD3、CD4、CD8),再与HRP标记的T细胞亚群(CD3、CD4、CD8)抗体
简述T细胞亚群(CD2,CD4,CD8)的临床意义
作为细胞免疫重要内容的T淋巴细胞及亚群的检测在一些疾病的免疫功能和预后判断以及指导治疗中有重要作用。这些疾病主要包括:①病毒感染性疾病;②肿瘤性疾病;③自体免疫性疾病;④器官移植患者;⑤其他免疫缺损或异常的患者。 在淋巴细胞的分化中产生的总T细胞的数量是有限的,加之在病变中主要为辅助T或抑制T
淋巴细胞亚群检测,可以指向哪些疾病?
免疫功能与每个人的健康状态息息相关,而淋巴细胞亚群分析正是检测免疫功能的重要指标——它能反映机体当前的免疫功能、状态和平衡水平,并可以辅助诊断某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等),对分析发病机制,观察疗效及检测预后都有重要意义。那么淋巴细胞亚群究竟是什么?它的检测
CD4/CD8比值测定的介绍
CD4/CD8比值测定(CD4、CD8、CD4/CD8):CD4/CD8比值是T细胞亚群报告中最为简单和明确的指标。在淋巴细胞的分化中产生的总T细胞的数量是有限的,加之在病变中主要为辅助T或抑制T的升高或降低,因而CD4(+)和CD8(+)细胞的比值会发生相应的变化,因此该值就成为一个简单和明确
CD4-及CD8-细胞的分离
⑴CD4 细胞的分离:将一定量的T 细胞悬液通过一根SephDdexC—10 柱,然后用少量的RPMll640 培养洗涤,收获的细胞悬液约含85%的CD4 细胞。⑵CD8 细胞分离:用Tris 缓冲液稀释羊抗鼠IgG(浓度为10μg/m1)包被一平皿表面,然后放置4℃过夜,没有包被上的抗体用PBS
用流式细胞仪检测各个象限的意义
左下为正常细胞,左上为坏死细胞;右上为晚期凋亡细胞,右下为早期凋亡细胞。检测CD4和CD8,应该还要同时染色CD3. 先选中CD3阳性的细胞(T细胞),把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示,可以分为四个象限。分别代表CD4阳性,CD8阳性,双阳性,和无染色的。正常情况下,是不应该有双阳性和未染色
用流式细胞仪检测各个象限的意义
左下为正常细胞,左上为坏死细胞;右上为晚期凋亡细胞,右下为早期凋亡细胞。检测CD4和CD8,应该还要同时染色CD3. 先选中CD3阳性的细胞(T细胞),把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示,可以分为四个象限。分别代表CD4阳性,CD8阳性,双阳性,和无染色的。正常情况下,是不应该有双阳性和未染色
用流式细胞仪检测各个象限的意义
左下为正常细胞,左上为坏死细胞;右上为晚期凋亡细胞,右下为早期凋亡细胞。检测CD4和CD8,应该还要同时染色CD3. 先选中CD3阳性的细胞(T细胞),把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示,可以分为四个象限。分别代表CD4阳性,CD8阳性,双阳性,和无染色的。正常情况下,是不应该有双阳性和未染色
用流式细胞仪检测各个象限的意义
左下为正常细胞,左上为坏死细胞;右上为晚期凋亡细胞,右下为早期凋亡细胞。检测CD4和CD8,应该还要同时染色CD3. 先选中CD3阳性的细胞(T细胞),把T细胞在CD4/CD8的散点图上再显示,可以分为四个象限。分别代表CD4阳性,CD8阳性,双阳性,和无染色的。正常情况下,是不应该有双阳性和未染色
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(四)
从Rostaing等[2]发表流式细胞术检细胞内细胞因子的方法后,陆续有人研究了流式细胞术检测细胞内因子方法的可行性及重复性等问题。虽然活化T淋巴细胞有各种各样的方法,如:PMA、PHA、Con A、CD3、CD2和CD28等。但是目前公认的较好的方法仍然是PMA和钙离子载体的联合刺激。研究
简述CD4-及CD8-细胞的分离
⑴CD4 细胞的分离:将一定量的T 细胞悬液通过一根SephDdexC—10 柱,然后用少量的RPMll640 培养洗涤,收获的细胞悬液约含85%的CD4 细胞。 ⑵CD8 细胞分离:用Tris 缓冲液稀释羊抗鼠IgG(浓度为10μg/m1)包被一平皿表面,然后放置4℃过夜,没有包被上的抗体用
关于T细胞、B细胞亚群的简介
淋巴细胞是构成机体免疫系统的主要细胞群,参与机体细胞及体液免疫。可将其分为 T 淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)。T细胞亚群是细胞免疫的主要免疫应答形式,根据表型不同分为CD3细胞、CD4细胞、CD8细胞三类,在正常情况下,这三类细胞处于动态平衡状态,其中CD3细胞是全T细胞标志,
HIVCD4、CD8细胞计数及其意义
在T淋巴细胞分类中,CD4代表T辅助细胞而CD8代表T抑制细胞和T杀伤细胞。CD4+T淋巴细胞是HIV感染的主要靶细胞,而其本身又是免疫反应的中心细胞;CD8+T淋巴细胞是免疫反应的效应细胞。正常人的CD4+T淋巴细胞约占总的T淋巴细胞的65%,CD8+T淋巴细胞约占35%。人体感染了HIV后,涉及
CD4/CD8比值测定的参考值
流式细胞术:0-4岁:0.60-4.00;4-17岁:0.72-2.88;17-200岁:0.71-2.87
CD4/CD8比值测定的临床意义
自身免疫性疾病、病毒感染、恶性肿瘤、艾滋病诊断、病毒分期、制定抗病毒治疗和预防机会性感染方案的标准指标。常用的正常参考值为1.4~2.5。若其比值>2.5表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态,容易出现自体免疫反应。CD4/CD8<1.4一般被称为“免疫抑制”状态,常见于: 1、免疫缺陷病,如艾
流式细胞在高烧病例筛查原因的应用
患儿女,10 岁,主诉高热伴腹痛 4 天入院。入院查体:急性病容,体温 38.5℃,呼吸急促,双侧颈部、腋窝、腹股沟可触及肿大淋巴结,最大 1.0×1.5 cm,质软,有压痛感,活动度可;脾大,肋下约 2 cm,质软无压痛,余无明显阳性体征。血常规示:Hb 135 g/L,WBC 19.6×
T淋巴细胞分化抗原检测的临床意义是什么
1.CD1 在所有胸腺皮质中的胸腺细胞都可以检测到CD1分子的表达,在激活的单核细胞和朗格汉斯细胞中也表达CD1。 2.CD2 在T细胞发育的早期阶段表达,由于抗CD2单克隆抗体可以激活早期T淋巴细胞祖细胞,因此CD2抗原可能出现在功能性T细胞受体表达之前,是胸腺细胞激活中可以利用的一种受
T淋巴细胞分化抗原检测的临床意义
1.CD1 在所有胸腺皮质中的胸腺细胞都可以检测到CD1分子的表达,在激活的单核细胞和朗格汉斯细胞中也表达CD1。 2.CD2 在T细胞发育的早期阶段表达,由于抗CD2单克隆抗体可以激活早期T淋巴细胞祖细胞,因此CD2抗原可能出现在功能性T细胞受体表达之前,是胸腺细胞激活中可以利用的一种受
淋巴细胞分化抗原检测的临床意义
1.B淋巴细胞分化抗原 (1)CD5:表达CD5的B细胞可以被各种激活B细胞的试剂激活,在脐带血、成人血和所有主要的外周淋巴样器官中都可以发现。 (2)CD19:主要表达在B细胞上,在成熟的B细胞各个分化阶段上有表达,在定向B细胞的祖细胞上也有表达,但在滤泡树突状细胞上只有弱的表达,因此它是
淋巴细胞分化抗原检测的临床意义
1.B淋巴细胞分化抗原 (1)CD5:表达CD5的B细胞可以被各种激活B细胞的试剂激活,在脐带血、成人血和所有主要的外周淋巴样器官中都可以发现。 (2)CD19:主要表达在B细胞上,在成熟的B细胞各个分化阶段上有表达,在定向B细胞的祖细胞上也有表达,但在滤泡树突状细胞上只有弱的表达,因此它是
T淋巴细胞的表面标志
1、T细胞抗原受体(TCR):TCR是T细胞识别外来抗原并与之结合的特异性受体,可表达于所有成熟的T细胞表面。大多数成熟T细胞(约95%)的TCR分子由α链和β链两条异二聚体肽链组成,小部分由γ、δ链组成。T细胞发育的过程中,编码α及β的基因决定TCR的高度多态性,不同的T细胞克隆有不同的TCR
T淋巴细胞分化抗原检测的操作方法及临床意义
操作方法 1.免疫组织化学染色法 (1)免疫荧光显微技术:使荧光抗体与细胞表面的T淋巴细胞分化抗原进行反应,洗涤除去游离的荧光抗体后,在荧光显微镜下观察。 (2)免疫金银染色技术:利用胶体金标记T淋巴细胞分化抗原对应的特异性抗体,通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置,加入银显影液,用对苯
T淋巴细胞分化抗原检测的操作方法及临床意义
操作方法 1.免疫组织化学染色法 (1)免疫荧光显微技术:使荧光抗体与细胞表面的T淋巴细胞分化抗原进行反应,洗涤除去游离的荧光抗体后,在荧光显微镜下观察。 (2)免疫金银染色技术:利用胶体金标记T淋巴细胞分化抗原对应的特异性抗体,通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置,加入银显影液,用对苯