用SYBRGreenⅠ进行定量PCR实验的最适读板温度
SYBR Green Ⅰ（ SG Ⅰ）是一种双链 DNA 结合染料，它在定量 PCR 实验中对核酸的灵敏检测和定量是非常有用的。但采用 SG Ⅰ也有一个潜在的缺点，那就是一些非特异的产物也能和染料结合并产生荧光信号。引物二聚体是最常见的假信号源，而且任何非特异的双链 DNA 的存在都会产生信号，这些荧光信号有可能被当作来自目标扩增序列的信号，特别是当目标序列的扩增量很少或者根本没有的时候。因为引物二聚体的片段一般很小，它的熔解温度（ Tm ）通常都比目标 PCR 产物的熔解温度低。如果在高于引物二聚体的 Tm 但低于特异产物的 Tm 的温度下读板，由于引物二聚体已经变性，与之结合的 SG Ⅰ都脱离下来，因此这个时候检测到的荧光都来自于目标扩增序列。这就消除了因引物二聚体而产生的荧光信号。而在这个温度下，大部分的特异产物仍然保持双链形式与 SG Ⅰ结合。此时检测到的荧光信号，就没有了因引物二聚体而产生的信号......阅读全文
用SYBR－Green－Ⅰ进行定量PCR实验的最适读板温度
SYBR Green Ⅰ（ SG Ⅰ）是一种双链 DNA 结合染料，它在定量 PCR 实验中对核酸的灵敏检测和定量是非常有用的。但采用 SG Ⅰ也有一个潜在的缺点，那就是一些非特异的产物也能和染料结合并产生荧光信号。引物二聚体是最常见的假信号源，而且任何非特异的双链 DNA 的存在都会产生信
SYBR－Green－I（20×）定量PCR用
规格：1ml 保存条件：-20度，如果经常使用，可放2-8度保存一周。 产品简介：SYBR Green I与dsDNA 结合荧光信号可增强800-1000倍。在PCR反应体系中，加入过量SYBR Green I荧光染料，SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后，荧光信号增强，而不掺入链中的SYBR
定量PCR中SYBR－Green－I的替代
定量PCR一般有两条路，一条是探针，另一条是染料。因染料是普遍适用的，无需特异设计，费用也相对低廉，故用者更多。定量PCR中的染料通常是SYBR Green I，但它也并非完美。SYBR Green I对PCR有抑制作用，在实验中的使用浓度很低，且与富含GC的序列优先结合。因此，后续的熔解分
SYBR－Green法实时定量PCR优化攻略
SYBR® Green是一种插入DNA分子的染料，具有多种分子生物学应用，其中之一就是用于实时定量PCR（qPCR）。随着PCR循环的连续进行，这种染料的荧光强度会不断增强，从而可以使人们对反应中的DNA进行定量。SYBR Green法及一些其他基于染料的qPCR方法比探针法的成本低，使用也更为方便
SYBR－Green－Quantitative－PCR－Protocol
SummaryQuantitative PCR is a method used to detect relative or absolute gene expression level. All qPCR involves the use of fluorescence to detect the
BIOGHC－SYBR－Green荧光定量PCR试剂盒说明
介绍 BIOGHC Elitefast SYBR Kit采用本公司生产的经化学修饰的热启动聚合酶，有效避免了非特异扩增和引物二聚体的形成，具有高度的特异性。反应缓冲液经多次优化，与热启动聚合酶具有最为乐观的搭配，使聚合酶的活性能够得到最大程度的发挥。反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟的时间。
REALTIME－PCR－WITH－SYBR－GREEN－I－PROTOCOL
1、反应体系 25ulCocktail 20 ul: Primer FP 1 ul + Primer RP 1u + 2 * SYBR GREEN I MIX 12.5 + H2O 5.5 ul cDNA 5 ul2、Primer 浓度，需要摸索，从200nM到700nm等，设置不同浓度。3、每个引
实时荧光定量PCR检测方法SYBR－Green－I－法与TaqMan－探针法
来自美国Azure Biosystems公司的Azure Cielo™实时荧光定量PCR系统，融合了高品质Pilter温度模块和基于光纤传输的光学检测系统，为您的科学研究提供高精准、高灵敏的可靠结果。北京深蓝云生物科技有限公司已经为您准备好了仪器，期待您的试用哦~既然仪器已经备好了，那么该怎样选
如何选择荧光定量检测法之SYBR－Green－I
总的说来，荧光检测技术可大致分为两大类：通用型的荧光染料检测法和高特异性的荧光探针法。前者主要是利用荧光染料(如SYBR Green I)与双链DNA分子结合发光的特性来指示扩增产物的增加，优点是：无需另外设计荧光探针，无需特别优化条件，简便易行，成本较低，能适用于任何一款定量PCR仪，缺点
SYBR－Green染料法介绍
TaqMan探针法因其良好的特异性以及可多重检测而受到实验人员的青睐，其实除了探针法外，还有很多好的实验方法也被实验人员广泛认可，这次就介绍一下另一个应用广泛的方法：SYBR Green染料法，它又是因为哪些优点获得实验人员的青睐呢？染料法原理染料法一般使用的是SYBR Green I染料，这是一种
SYBR－实时荧光定量PCR技术
优博生物技术有限公司开发的SYBR实时荧光定量PCR（Real-time PCR）就是在PCR反应体系中加入荧光染料与DNA双链的结合的原理，实时监测整个PCR进程，判定即时测定特异性产物的量和推断出初始基因的量，可快速、灵敏的检测样本的RNA和DNA，在动物病原体基因的检测，畜禽产品的检验检疫，生
实时荧光定量－PCR
实时荧光定量 PCR ，简称 RT-QPCR, 属于 Q-PCR 的一种，目前该技术已得到广泛应用，如：扩增特异性分析、基因定量分析、基因分型、 SNP 分析等。荧光定量 PCR 常用的方法是 DNA 结合染料 SYBR GreenⅠ的非特异性方法。 SYBR Green I 是一种结
实时荧光定量PCR原理和实验（二）
归一后的荧光信号再扣除本底，就得到DRn：DRn = Rn,样本- Rn,空白。DRn是最后构建PCR实时扩增曲线的纵坐标。 无论绝对定量还是相对定量，在得到实验结果后，还要考虑数据之间的可比性问题。在实验操作中，取样都是以体积或重量为单位的，但是同样体积或重量的样本所来源的细胞数目并不一样
用SpectraMax多功能微孔板读板机进行cAMP－HiRange检测（二）
Z’ 因子由阴性(无cAMP，无cAMP-d2)和阳性质控(无cAMP)计算得到2。利用SoftMax® Pro软件生成和分析数据，包含一些预设的HTRF实验模板以简化检测和分析。结果使用SoftMax Pro软件的4-参数曲线拟合如上所述进行数据分析和做图。依据表2的读板机参数设置获得最佳结果
用SpectraMax多功能微孔板读板机进行cAMP－HiRange检测（一）
简介在这篇应用文献中，我们展示了如何用SpectraMax®i3、SpectraMax®Paradigm®和SpectraMax®M5e多功能微孔板读板机进行可靠的、高通量的HTRF®检测，并具有完美的Z’因子和高重复性的EC50值。HTRF®是CisbioBioassays公司开发的一项检测生物分
如何选择合适的定量PCR仪？（一）
定量PCR仪主要由两部分组成，一个是PCR系统，一个是荧光检测系统。选择定量PCR仪的关键——由于定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的，对于定量PCR系统来说，重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等，更重要的还在于样品孔之间的均一性，以避免微小的差别被指
如何选择合适的定量PCR仪？（一）
定量PCR仪主要由两部分组成，一个是PCR系统，一个是荧光检测系统。选择定量PCR仪的关键——由于定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的，对于定量PCR系统来说，重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等，更重要的还在于样品孔之间的均一性，以避免微小的差别被指数级放大。至于荧
使用实时定量－PCR技术验证cDNA和差异显示PCR技术（一）
采用通过监测产物积累进行的实时反转录聚合酶链式反应（ RT － PCR ）可以用来验证基因表达的差异。我们在此报道了一种基于 SYBR Green I 染料进行的实时 PCR 定量方法并通过产物的融解曲线来确定在基因表达谱方法中确定的基因表达差异的重复性。因为 SYBR Green I
定量PCR仪选择宝典
定量PCR仪主要由两部分组成，一个是PCR系统，一个是荧光检测系统。选择定量PCR仪的关键——由于定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的，对于定量PCR系统来说，重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等，更重要的还在于样品孔之间的均一性，以避免微小的差别被指数级放大。至于荧
定量PCR仪选择宝典
定量PCR仪主要由两部分组成，一个是PCR系统，一个是荧光检测系统。选择定量PCR仪的关键——由于定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的，对于定量PCR系统来说，重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等，更重要的还在于样品孔之间的均一性，以避免微小的差别被指
定量PCR仪选择宝典
定量PCR仪主要由两部分组成，一个是PCR系统，一个是荧光检测系统。选择定量PCR仪的关键——由于定量PCR必需借助样本和标准品之间的对比来实现定量的，对于定量PCR系统来说，重要的参数除了传统PCR的温控精确性、升降温速度等等，更重要的还在于样品孔之间的均一性，以避免微小的差别被指数级放大。至于荧
常见荧光定量PCR检测方法比较
定量PCR：以参照物为标准，对PCR终产物进行分析或对PCR过程进行监测，从而达到评估样本中靶基因的拷贝数，称为定量PCR。定量PCR的可行性定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。 常见荧光定量PCR方法比较 SYBR Green I 检测模式 SYBR
常见荧光定量PCR检测方法比较
定量PCR：以参照物为标准，对PCR终产物进行分析或对PCR过程进行监测，从而达到评估样本中靶基因的拷贝数，称为定量PCR。定量PCR的可行性定量一般是在PCR扩增的指数期进行的。 常见荧光定量PCR方法比较 SYBR Green I 检测模式 SYBR Green I 是一种能与双链 D
qRTPCR
实验概要实时定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。目前，实时定量PCR所使用的荧光化学组分一般可分为两种：荧光探针和荧光染料。1）TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的
qRTPCR
实验概要实时定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。目前，实时定量PCR所使用的荧光化学组分一般可分为两种：荧光探针和荧光染料。1）TaqMan荧光探针：PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的
荧光定量PCR试剂盒
荧光定量PCR试剂盒 荧光定量PCR又可以分为TaqMan探针和SYBR Green I荧光染料两种方法。比较而言，探针杂交技术在原理上更为严格，所得数据更为精确；荧光染料技术则成本更为低廉，实验设计更为简便。在选择实验方案时要根据实验目的和对数据精度的要求来决定。1. TaqMan探针法是高度特异
PCR、qPCR、dPCR你需要知道的事儿
上世纪八十年代Cetus Corporation公司的化学家Kary Mullis发明了PCR，如今DNA扩增俨然已经成为了生物学研究的基础。三十多年以来，人们为了解决研究中出现的新问题新需求，不断对这一经典技术进行改良。从经典PCR、实时定量PCR再到现在的数字PCR，PCR技术在不断
PCR、qPCR、dPCR你需要知道的事儿
上世纪八十年代Cetus Corporation公司的化学家Kary Mullis发明了PCR，如今DNA扩增俨然已经成为了生物学研究的基础。三十多年以来，人们为了解决研究中出现的新问题新需求，不断对这一经典技术进行改良。从经典PCR、实时定量PCR再到现在的数字PCR，PCR技术在不断蜕变却从
PCR－Array－简单实用的检测基因表达的高通量方法（三）
PCR 芯片实验体系 完整的PCR芯片实验体系包括RT2ProfilerTM PCR芯片，RT2 Real-TimeTM SYBR Green PCR反应体系和cDNA合成试剂盒。所有这些组分均为基于SYBR Green的实时定量PCR反应优化。精心设计的引物和优化的PCR反应体系一起，为
如何进行兽医检测荧光定量PCR实验？
实时荧光定量PCR技术（real-time fluorescent quantitative PCR，后文简称qPCR）作为目前核酸检测和定量中最主要的分子生物学工具之一，以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、自动化程度高、速度快等多个优点在疾病快速检测、食品安全检测、靶向用药基因检测等多种应