深加工产品DNA提取方法及GMO食品的转基因PCR检测(二)
2 . 大豆色拉油DNA提取操作程序 取 20ml 精炼大豆色拉油加入 20ml Buffer Ⅰ,磁力搅拌器充分混匀, 2 小时; 加入 40ml Buffer Ⅱ,磁力搅拌器充分混匀, 2-3 小时; 4 ℃, 12,000rpm 离心 20 分钟,小心移去油相; 加入等体积 Buffer Ⅲ与 4 μl Buffer Ⅳ,混匀,常温放置 10 分钟后, 12,000rpm 离心 20 分钟,弃上清,保留沉淀; 加入 1 ml Elution Buffer 溶解沉淀,加入 1ml 异丙醇,混匀,常温放置 10 分钟后, 12,000rpm 离心 20 分钟,弃上清,保留沉淀; 在沉淀中加入 100 μl Elution Buffer, 于 37 ℃充分溶解沉淀, 5 分钟后加 300 μl Buffer Ⅴ,上下颠倒 10 次,充分混匀;&nb......阅读全文
深加工产品-DNA提取方法及GMO食品的转基因PCR检测(二)
2 . 大豆色拉油DNA提取操作程序 取 20ml 精炼大豆色拉油加入 20ml Buffer Ⅰ,磁力搅拌器充分混匀, 2 小时; 加入 40ml Buffer Ⅱ,磁力搅拌器充分混匀, 2-3 小时; 4 ℃, 12,000rpm 离心 20 分钟,小心移去油相; 加入等体积 Buffe
深加工产品-DNA提取方法及GMO食品的转基因PCR检测(一)
作为现代科技飞速发展的产物,转基因食品几乎涉及国际食品贸易的各个方面,不仅使得各国对食品安全问题倍加关注,而且其引起的贸易争端更是对世贸组织争端解决机制的严峻挑战。在我国,由于检测技术和设备落后,国外大量转基因产品在我们毫不知情的情况下涌入国内。如 2000 年我国进口大豆 1
一纸测出转基因
据百度《3·15质量大数据报告》显示,今年网民最关注的消费问题中,食品安全居首。而这其中,“转基因食品安全吗?”“转基因食品可检测出来吗?”等一系列有关转基因的话题关注度高达60.24%。 而去年4月,湖北省武汉市一家大型超市检测出含有转基因成分的“Bt汕优63”大米曾引起轩然大波。虽然这种水
使用定量PCR方法检测转基因产品
转基因产品的检测可以从核酸和蛋白质水平上进行检测。定量检测主要是基于核酸水平的检测,由于目前转基因技术中使用的基因构件主要来源于花椰菜花叶病毒(CaMV)的 35S 启动子和脓杆菌的 Nos 终止子,绝大部分转基因产品含有这两个基因片段,所以检测 35S 启动子和 Nos 终止子基本可达到检测转基因
如何鉴定转基因成分?
转基因生物(Genetically Modified Organism,简称 GMO),是利用现代分子生物学技术改变基因组构成的生物,而非传统的选择育种,一般包括转基因植物、 动物和微生物。转基因食品就是利用上述的转基因生物(包括植物、动物和微生物)加工而成的食品或食品添加剂。目前最受关注的绝大
转基因食品检验分析技术方法介绍
根据检验技术所依据的原理,可以将目前的技术大致分为以下几种。1、依赖于GMO中DNA成分的PCR技术PCR 是聚合酶链式反应(polymerase chain reaction)的简称。它模拟 DNA 聚合酶在生物体内的催化作用,在体外进行特异 DNA 序列的聚合及扩增。PCR 简便、快速,可以在一
多反应监测进行含量测定有哪些局限性
目前对转基因食品的检测按原理主要分为针对外源蛋白质和针对外源DNA两种鉴定技术。外源蛋白质的测定即从蛋白质水平对转基因食品进行检测,实际应用中主要采用的是免疫学检测法,即Western杂交、酶联免疫吸附法(ELISA)和试纸条法。免疫学检测法可以检测具有抗原性的蛋白质类表达产物的存在,它是通过抗原抗
转基因食品的检测(二)
(1) 定性PCR法定性PCR可直接检测启动子、终止子、标记基因片断、目的基因片断。为使目的基因很好的进行表达,在构建基因表达载体时常在目的基因的5’和3’端分别加上启动子和终止子。当前大约75%的转基因植物中使用Ca MV( Cauliflower mosaicvirus) 3 5 S启动
农业农村部发转基因植物产品检测标准-涉DNA、PCR定性方法
分析测试百科网讯 近日,中华人民共和国农业农村部发布《转基因植物及其产品成分检测 基因组DNA标准物质制备技术规范》的标准公告。据悉,此次公告17项标准业经专家审定通过,涉及转基因植物及其产品成分检测,基因组DNA标准物质制备技术规范、PCR定性方法等。现批准发布为中国人民共和国国家标准,自20
转基因筛查试剂盒在转基因食品监管中的应用
为提高产品质量、 农艺性状和发展对害虫抗药性,农业作物遗传改良已成为农业产业研究部门的一项主要活动。由于正在进行的辩论围绕食品含有转基因生物和消费者要求明确标记基因转基因食品,各个国家都建立了或当前正在建立专用于转基因产品的监管框架。为了执行这样的规例,需要筛选转基因食品的可靠方法。 作为一种常
转基因植物产品数字PCR检测方法
转基因植物产品数字PCR检测方法 前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口 。本标准主要起草单位 : 中国检验检疫科学研究院、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国农业大学 、中国农业科学院油菜作物研究所。本
转基因植物产品数字PCR检测方法
前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口 。 本标准主要起草单位 : 中国检验检疫科学研究院、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国农业大学 、中国农业科学院油菜作物研
转基因植物产品数字PCR检测方法
转基因植物产品数字PCR检测方法 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口 。 本标准主要起草单位 : 中国检验检疫科学研究院、广西出入境检验检疫局检验检疫技术中心 、中国农
荧光定量PCR技术检测食品转基因
当前,国际社会对转基因食品检测技术路线主要有两条:一是对外源基因表达产物蛋白质进行检测;二是直接检测外源基因DNA。随检测手段不断提高,对食品转基因检测已从定性提高到定量水平 。对外源基因表达产物蛋白质检测常用方法有酶联免疫法(ELISA)、蛋白质印迹法(Westernblot)等,这些检测方法大多
转基因产品核酸水平检测流程
转基因食品问题,一直以来都是充满争议的话题;如何科学正确地检测转基因产品,成了政府检测机构及相关工作者高度关心的问题。转基因农产品的检测,就是检测农产品中是否含有外源基因,即检测启动子、终止子、标记基因、目的基因、外源基因转录产物的丰度等。就方法而言,又分为基因水平的检测和蛋白水平的检测。转基因产品
数字PCR实现更精确的GMO分析
根据《PLoS One》上发表的一项最新成果,微滴式数字PCR(ddPCR)能精确定量转基因生物中的转基因拷贝数,且成本比定量PCR(qPCR)更低。 这篇文章的通讯作者是斯洛文尼亚国立生物学研究所的Dany Morisset。他认为,这项新研究是一个重要的案例研究,说明了微滴式数
数字PCR实现更精确的GMO分析
根据《PLoS One》上发表的一项最新成果,微滴式数字PCR(ddPCR)能精确定量转基因生物中的转基因拷贝数,且成本比定量PCR(qPCR)更低。 这篇文章的通讯作者是斯洛文尼亚国立生物学研究所的Dany Morisset。他认为,这项新研究是一个重要的案例研究,说明了微滴式数字PCR可用
转基因标准物质在检测实验室中的作用
转基因检测标准物质是在转基因产品检测中用于校准测量装置、评价测量方法或给检测样品赋值的一种物质,其特性值足够均匀且稳定。转基因检测标准物质在转基因产品安全监管、转基因产品定性与定量检测、检测方法研究与标准化过程中是不可缺少的物质基础,可提高转基因产品检测结果可比性、有效性和溯源性,为其提供生物计
转基因食品检测技术
转基因食品是指利用生物技术,将外源基因转移到动物、植物或微生物等其他物种中,从而改造生物的遗传特性,使其在性状、营养品质等方面向人类所需的目标转变,由这些转基因生物为直接食品或原料加工生产的食品就是转基因食品。自1983年世界第一例转基因作物马铃薯问世以来,目前各国已经试种的转基因植物超过4500种
韩国发布《转基因食品标示标准》部分修改征集意见稿
关于韩国《转基因食品标示标准》部分修改告示(案)行政预告(2016.4.21~6.20),多数人持反对意见,对此,6月24日,韩国食品和药品安全部(MFDS)就该告示案追加了以下修改内容,意见征集时间延长至7月20日。 主要修改内容如下: a.扩大转基因食品的标示对象及字号。 1)标
PCR检测方法(二)
3.实验操作注意事项:尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因,样品间的交叉污染也是原因之一。因此,不仅要在进行扩增反应是谨慎认真,在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意:(1)戴一次性手套,若不小心溅上反应液,立即更换手套。(2)使用一次性吸头,严禁与PCR产物分析室的吸头混用,吸头不
数字PCR的原理
数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性)。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多。 在扩增期间,TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时,没有信
数字PCR的原理
数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性)。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多。 在扩增期间,TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时,没有信
食品检测方面生物技术的应用
摘要:随着食品工业持续、快速地发展,传统的方法已经不能够 满足当前对食品检测的更高要求了,人们要求更为简便快捷、灵活 性强、特异性高的先进的检测方法,而现代的生物技术的快速发展 使食品的检测方法更加多样、准确、迅速及安全,也就是说生物技 术的应用满足了现代食品检测的更高要求。 关键词:食品检测;生物
转基因食品的检测
摘要:本文论述了转基因农产品、食品的安全性问题以及对转基因食品从基因、基因转录、基因翻译表达三个层面的检测技术做了概述。 关键词:转基因食品 转基因农产品 食品安全 生物技术 检测技术 Abstract: discuss on the question Gen
转基因食品检验分析技术的应用现状
对转基因产品的安全性,特别是转基因食品对人及动物的健康,以及对生态环境的影响,自转基因技术出现以来,就一直是世界各国及联合国等国际组织关心的焦点问题,转基因产品的潜在生态风险及对人体健康影响的争论也日趋尖锐。目前人们所担忧的转基因的风险主要集中在三个方面:一是人体健康风险,转基因产品是否对人类无毒、
DNA的不同提取方法及比较
DNA的不同提取方法及比较传统的DNA提取方法传统的DNA 提取与纯化,如 CTAB 法、SDS 法是在裂解细胞的基础上,多次苯酚氯仿等有机溶剂抽提使蛋白质变性沉淀于有机相,而核酸保留在水相,达到分离核酸的目的;加入RNA 酶除去核酸中的RNA; 然后加入异丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70
用于PCR的模板DNA制备实验——改进的石蜡切片-DNA-提取方法
实验步骤1. 5 μm 厚的石蜡切片 5 至 10 张贴在干净的载玻片上,常规烘片,脱蜡,水化,蒸馏水清洗,无菌蒸馏水浸泡,取出晾至半干。2. 无菌尖头刀片刮下,放入 300~900 μl 组织裂解液中,并加入 20 mg/ml 蛋白酶 K(PK)10~15 μl,封口膜封口,置 55℃ 3 h 以
从不同动物组织中提取总DNA的方法及步骤(二)
3. 从培养的动物细胞中抽提总DNAa.收集最多不超过500万的细胞,离心沉淀后重悬于200微升PBS中。PBS需自备。如果使用冻存的细胞沉淀,先把细胞沉淀解冻,并轻轻弹散,然后再加入PBS。对于基因组DNA含量较高的细胞,例如Hela细胞,应使用较少的细胞,例如100-200万Hela细胞。b.清
丙二醛传统方法检测及产品
丙二醛传统方法检测及产品针对MDA的水平检测,以硫代巴比妥酸(TBA)方法测得的所谓丙二醛(MDA)水平已被广泛用作诊断组织伤害和脂过氧化程度的指标。但TBA方法对MDA的特异性很有争议,MDA只是氧化伤害和脂质过氧化产生的诸多不饱和醛酮产物中主要产物的一种。而硫代巴比妥酸反应产物(Thiobarb