DTT作用
DTT作用如下：1、DTT的作用之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体，特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验（如DNA在生物感应器中的固定）的效率；而在DNA溶液中加入DTT，反应一段时间后除去，就可以降低DNA的二聚化。2、DTT也常常被用于蛋白质中二硫键的还原，可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部（溶剂不可及）的二硫键，这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性（高温加热或加入变性剂，如6M盐酸胍、8M尿素或1%SDS）。反之，根据DTT存在情况下，二硫键还原速度的不同，可以判断其包埋程度的深浅。DTT即DL-Dithiothreitol，中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2，分子量为154.25，纯度>99%。常用还原剂，有抗氧化作用，进口分装。DTT和巯基乙醇相比......阅读全文
34招教你学会实验室常用贮存液的配制（二）
11 1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液 『配制方法』 用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃. 〖注意〗 DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理. 12 脱氧核苷三磷酸(
Steady－State－ATPase－Assays－Coupled－Enzyme－System
MaterialsTubulin (>5 mg/mL)100 mM Mg·GTP4 mM Taxol in DMSOPM =100 mM PIPES pH 6.82 mM EGTA1 mM Mg2SO4Motor protein (>95% purity; 15-20 µM)Cuvettes (20
T4－RNA连接酶的基本信息介绍
T4 RNA Ligase主要用于RNA和RNA之间的连接，连接时需要5'磷酸基团和3'羟基的存在。不仅可以进行RNA分子间的连接，也可以进行RNA分子(最短8个碱基)的环化连接。 T4 RNA Ligase可以用于RNA和单核苷酸之间的连接，单核苷酸必须为5'和3&#
细胞和亚细胞提取物的制备实验5
方案5 细菌中重组蛋白的小量提取实验实验方法原理利用细菌获得用于纯化的重组蛋白是非常方便的。为了检测诱导和重组蛋白的表达水平，评估方法的快速简单是很重要的。本方案使用 0.5% TritonX-1OO 裂解细胞，小量制备细菌提取物。实验材料表达目标重组蛋白的细菌细胞试剂、试剂盒二硫苏糖醇（DTT)样
二硫键错配怎么还原
用还原剂可以将其打开还原，比如二硫苏糖醇DTT、2-巯-乙醇等。
Flow－Cell－Assays－with－Microtubules:－Motility/Dynamics－in－Fluorescence
Flow cell assays are very useful for studying microtubule motility, microtubule dynamics, kinetochore-microtubule interactions and action of severing/
菌体/细胞裂解的常用方法和配方
、反复冻融法：1. 将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。2. 至少3次以上冻溶。3. IFCC推荐法：收集细胞悬液，4℃低温离心（3000rpm，5min），弃上清，加入一定量PBS（200ul），轻轻吹打混匀，-2
菌体/细胞裂解法汇总
一、反复冻融法：1、将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。2、至少3次以上冻溶。3、IFCC推荐法：收集细胞悬液，4℃低温离心（3000rpm，5min），弃上清，加入一定量PBS（200ul），轻轻吹打混匀，-200C 冷
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2－Dimensional－Gel－Electrophoretic－Analysis－for－Chicken－Egg
Overview This protocol is a detail description of the procedure in performing 2D gel electrophoresis for illustrating the protein profile of the w
Two－Dimensional－Gel－Electrophoretic－Analysis－for－the－Human－Plasma－Proteome
OverviewThis protocol is a detail description of the laboratory procedure in performing 2D gel electrophoresis for illustrating the protein profile of
间接原位PCR（原位杂交PCR）
间接原位PCR（原位杂交PCR） 实验材料 组织或细胞样品 试剂、试剂盒
用随机寡核苷酸延伸法进行扣除cDNA探针的放射性标记
此方案中 cDNA 的合成是在 4 种饱和浓度的 dNTP 及一种痕量的放射性标记的 dNTP 中进行的。扣除杂交后，在大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ的 Klenow 片段作用下，富集的单链 cDNA 通过随机寡核苷酸引物延伸的二次合成反应，标记成高比活性的探针。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培
磁珠法核酸获取裂解液常见实验试剂及功效基本原理
磁珠法核酸获取要以纳米技术微生物磁珠为质粒载体的这种新式核酸获取技术性，核酸分子结构可与磁珠表层的硅羟基产生非特异鉴别与融合，在外界电磁场的功效下产生集聚或分散化，完全解决传统式核酸获取全过程中抽滤、提取上清液等手工制作步骤，逐步实现核酸的自动化技术获取。运用于临床医学疾患诊断、静脉注射安全性、
肌肉肌球蛋白和肌动蛋白纯化实验_DEAE纯化肌肉肌球蛋白
实验材料肌肉肌球蛋白试剂、试剂盒焦磷酸钠柱平衡缓冲液柱缓冲液高盐缓冲液肌球蛋白-DEAE 透析缓冲液仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤一、准备 DEAE 柱和材料1. 准备贮存液和材料200 mmol/L 焦磷酸钠（NaPPi )，pH 7.0用 HCl 和 H3PO4 调 NaPPi 溶液的 pH
Crystallization－of－Kinesin－Family－Motor－Proteins
Motor proteins of several kinesin family groups have now been crystallized: monomeric Kinesin-1 motor domains from human, rat andNeurospora (Kull et a
银染实验
试剂、试剂盒 甲醇（50% 和5%v v)二硫苏糖醇 AgNO3柠檬酸（固态)显影液实验步骤 试剂甲醇（50% 和5%v/v)10umol/L二硫苏糖醇（DTT)AgNO3(0.1%w/v)柠檬酸（固态)显影液操作程序此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下，凝胶在旋转平台上缓
蛋白质电泳技术2
Decrease toxicity of destain even more!The destain procedure can be made even less toxic by replacing the destaining solution completely with MilliQ w
抗坏血酸含量的测定
抗坏血酸含量的测定可以用于：（1）检测植物中抗坏血酸的含量；（2）检测食品、药品中抗坏血酸的含量。实验方法原理还原型抗坏血酸（AsA）可以把铁离子还原成亚铁离子，亚铁离子与红菲咯啉（4,7-二苯基-1,10-菲咯啉，BP）反应形成红色螯合物。在534nm 波长的吸收值与AsA含量正相关，故可用比色法
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Protein－extraction－from－whole－tissues－for－IEF
Modified from that of Jay Thelen - University of Missouri-ColumbiaPhenol extraction followed by methanolic ammonium acetate precipitation - an effecti
银染实验
试剂、试剂盒甲醇（50% 和5%v v)二硫苏糖醇AgNO3柠檬酸（固态)显影液实验步骤试剂甲醇（50% 和5%v/v)10umol/L二硫苏糖醇（DTT)AgNO3(0.1%w/v)柠檬酸（固态)显影液操作程序此操作程序是根据Merril(1987)的方法修改而成。室温下，凝胶在旋转平台上缓慢摇动
银染实验
银染实验 试剂、试剂盒 甲醇（50% 和5%v v) 二硫苏糖醇 AgNO3
Small－Scale－Yeast－Whole－Cell－Extract－for－IP
Grow 100 ml yeast cells in desired media overnight to an A600 of ~1.0 (0.6 to 1.2 works well). For growth in minimal media, 1 ml of a saturated overni
酶法检测磷酸化实验2
基本方案2 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶消化磷酸蛋白质实验方法原理蛋白质磷酸酶和上面讨论的普通磷酸酶不同，它可在磷酸蛋白质底物的不同位点选择性脱磷酸化，因而可用于研究与蛋白质键合的特定磷酸基的功能性作用。实验材料含 100 μg 总蛋白的样品试剂、试剂盒 50 mmol／L Tris • Cl缓冲液 ／
超声波裂解细胞会不会破坏蛋白质相互作用
不会 因为能量还达不到破坏共价键的程度 但是要注意在破碎过程中蛋白不要降解和被氧化 所以一般要加入蛋白酶抑制剂 低温操作 而且要加入还原剂如DTT
MAPK激酶活性检测
实验概要本实验提供了一个MAPK激酶活性的检测方法。主要试剂1uM f1g22，10uM flg220.02% Silwet L-77液氮蛋白提取缓冲液(100 mM Hepes, pH 7.5,5 mM EDTA, 5 mM EGTA, 10mM DTT, 10 mM Na3VO4, 10 mM
ATPase－Assays－with－32PATP
MaterialsPurified Motor Protein, 20-80 µMNucleotide Mix =50 mM Mg·ATP gamma-32P-ATP to give 5 000 - 10 000 cpm/nmol 10 mM HEPES, pH 7.2 1 mM EGTA 1 mM
用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——酪氨酸激酶
试剂、试剂盒烯醇化酶酪氨酸激酶分析缓冲液实验步骤1. 制备酸变性的烯醇化酶从兔肌肉中纯化的烯醇化酶通常以硫酸铵沉淀或者悬液的形式存在。(1) 含 100 μg 的烯醇化酶，于 4℃ 全速离心 5 分钟。(2) 去上清，加入含有 1 mmol/L DTT 的 10 μl 50 mmol/L HEPES
免疫亲和层析实验
试剂、试剂盒 免疫亲和介质 溴化氰（CNBr) 活化的 Sepharose 4B HCl 55% 饱和 AMS 沉淀物 偶联缓冲液