细胞化学染色方法

实验原理1. 细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后,其中的 DNA 和 RNA 出现不同的呈色反应,一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力,且这两种染料的作用有选择性,甲基绿染高聚分子的 DNA 呈蓝绿色,呱咯宁染低聚分子的 RNA 呈红色。由此对细胞中的 DNA 和 RNA 进行定位、定性、和定量分析。2. 由于不同的蛋白质分子所带的碱性和酸性基团的数目不同,在 pH 值不同的溶液中,蛋白质分子所带的净电荷多少不同。如在生理条件下,整个蛋白质所带负电荷多,则为酸性蛋白质;带正电荷多,则为碱性蛋白质。据此,可将标本经三氯醋酸处理提出核酸后,用不同 pH 值的固绿染液分别染色,细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。3. 过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物,用联苯胺处理标本,细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝,进而变为棕色产物,因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有......阅读全文

临床化学检查方法介绍免疫组织化学染色法介绍

免疫组织化学染色法介绍:  免疫组织化学染色法是指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质,利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在,此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质,也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法方法的原理

原理:苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。

组织培养细胞染色体制备方法

组织细胞用于遗传学分析最常见的是体外培养的细胞株,多为恶性肿瘤细胞株,且呈贴壁生长,仅小数细胞株为悬浮生长。培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和染色体标本制出清晰度高等优点。组织细胞染色体制备的关键是掌握好体外细胞的生长动态,只有处在对数生长期的细胞才能出现较高的分裂相,所以积水仙素处理的时机及量是染

羊水细胞染色体制备方法(原位法)

细胞培养1. 将羊水(约20ml)转移到无菌的离心管中,1000rpm离心10分钟;2. 去除上清液,用于其它分析,保留细胞悬液约0.5~1ml,用培养基混匀到2~2.5ml左右;3. 将细胞悬液平分到3只Chromslide培养皿中;4. 培养24/48小时后,向每只Chromslide培养皿中加

细胞生长检测方法:染料染色法测定细胞数

一、结晶紫检测法1、在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104 ~104 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2 的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。2、用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3~5倍递

白细胞五分类法—激光散射和细胞化学染色技术分类

  激光散射和细胞化学染色技术:采用这项技术的为Technicon H1 、H2、H3 型,该类型仪器的最新型号为Bayer 公司的Advia120型和新近推出的Advia 2120 型。  仪器在白细胞分类上采用了白细胞过氧化酶测定通道和嗜碱粒细胞测定通道。根据细胞化学染色的特性进行白细胞分类。各

DNA的化学检测项目介绍羊水细胞性染色质检查

羊水细胞性染色质检查介绍:  羊水细胞性染色质检查可以用于预测胎儿性别,以及估计某些遗传性疾病的可能发生概率。羊水细胞性染色质检查正常值:  X染色质:>0.06为女性胎儿,0.05为男性胎儿,

免疫细胞化学染色和免疫荧光有什么区别

同志这不是化学范畴的immunofluorescence technic又名免疫荧光种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称

免疫细胞化学染色和免疫荧光有什么区别

同志这不是化学范畴的immunofluorescence technic又名免疫荧光种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称

关于细胞组织化学染色的检查过程介绍

  1、检查过程   PAP法抗原、抗体反应及酶标原理与APAAP法完全相同,都属于免疫组织化学反应,只是所标记的酶不同。PAP法酶化学反应原理与ABC-AP法完全相同,但ABC-AP法为亲合免疫组织化学反应。在染色步骤及方法上PAP法和ABC-AP法完全相同。  2、相关疾病  混合性厌氧菌感染,

关于细胞组织化学染色的注意事项介绍

  不合宜人群:无特殊要求。  检查前注意事项:一般是早晨空腹抽取血清,禁忌饮食后和剧烈运动都检查。  检查时要求:注意血清不被污染,和在进行染色过程中要做好固定的操作。

临床化学检查方法球形红细胞

球形红细胞介绍:  球形红细胞(spherocyte)常见于遗传性球形红细胞增多症和伴有球形红细胞增多的其他溶血性贫血,如自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血病及红细胞酶缺陷所致的溶血性贫血。球形红细胞正常值:  2.5%-3.0%。球形红细胞临床意义:  增多:遗传性球形红细胞增多症(>30%,重者1

临床化学检查方法介绍线索细胞

线索细胞介绍:  线索细胞是指阴道脱落上皮细胞上粘附大量加特纳杆菌等厌氧菌的一种形态表现。于细胞边缘贴附大量颗粒状物即加德纳尔菌。细菌边缘不清。线索细胞正常值:  检查结果呈阴性。线索细胞临床意义:  异常结果:  检查结果呈阳性,即阴道分泌物中出现大量线索细胞,一般预示患了细菌性阴道病,还要结合其

临床化学检查方法皱缩红细胞

皱缩红细胞介绍:  皱缩红细胞是因外界条件改变而引起的一种红细胞形态变化,如红细胞用生理盐水洗涤时pH值偏高引起形态的改变,或血片玻璃上沾有少量油脂,最严重的皱缩细胞形似球红细胞、轻度皱缩细胞可恢复固有盘状形态。血液在20℃放置过夜红细胞也会形成皱缩,尿毒症患者常见此种异常。皱缩红细胞正常值:  偶

临床化学检查方法红细胞比容

红细胞比容介绍:  指红细胞占全血容积的百分比。它反映红细胞和血浆的比例。红细胞比容正常值:  血细胞自动分析仪:  男 性:0.40-0.50 (40-50vol%)。  女 性:0.37-0.48 (37-48vol%)。  新生儿:0.49-0.60 (49-60vol%)。红细胞比容临床意义

细胞化学基础鸟嘌呤制备方法

方法一:5-氨基-4-咪唑酰胺与异硫氰酸苯甲酯进行酯化成酯,再与碘甲烷、氨水依次反应制得。 方法二:在四口烧瓶中按比例投入制得的N5-甲酰基-2,4,5-三氨基-6-羟基嘧啶、88%甲酸,加热到110℃,回流反应10小时,然后,常压蒸除甲酸至黏稠,冷却至50℃,加水200mL,抽干、水洗、抽干、烘干

原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法配制试剂

配制试剂:1.苏丹红Ⅲ染色液:将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用;2.甲醛钙固定液:将10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml;3.甘油明胶:将12g明胶加入120ml蒸馏水中水浴加热使其完全溶解,再加入60ml甘油和1g苯酚,充分混匀后即得。于4℃储存备用;

姐妹染色单体分化染色方法

姐妹染色单体差别染色可使中期染色体显示深浅不同的两条单体,能借以观察姐妹染色单体互换(SCE)现象。SCE是两条染色单体在DNA合成中核苷酸序列发生互换而表现出来一种现象。即是细胞分裂是DNA同源重组的结果。SCE既是一种无害的变化(有生理波动),也可受射线、致突和致癌物三因素等作用而升高。SCE一

临床化学检查方法介绍醋酸AS茶酚酯酶染色

醋酸AS-茶酚酯酶染色介绍:  酯酶染色的方法较多,常根据其作用液的PH和底物的不同将常用的酯酶染色分为二类:特异性酯酶染色法和非特异性酯酶染色法。醋酸AS-茶酚酯酶染色正常值:  阳性:粒细胞系统(或弱阳性)、单核细胞系统(或强阳性)。醋酸AS-茶酚酯酶染色临床意义:  阳性:急性粒细胞白血病、急

临床化学检查方法介绍碱性磷酸酶染色介绍

碱性磷酸酶染色介绍:  碱性磷酸酶较多存在于成熟中性粒细胞中。在碱性条件下,碱性磷酸酶经镁离子激活后能将磷酸酯水解为磷酸钠和甘油,磷酸钠再与氯化钙、硝酸钴、硫化铵发生一系列化学反应,生成棕色的硫化钴定位于胞质内。碱性磷酸酶染色正常值:  成熟中性粒细胞呈阳性,其他细胞均呈阴性。  阳性积分正常参考值

亲和组织化学染色方法之凝集素法

  ①直接法:将标志物直接结合在凝集素上,使其与组织细胞相应的糖蛋白或糖脂相结合;  ②间接法:先将凝集素与组织细胞膜糖基结合,然后再用标记的抗凝集素抗体(即用凝集素免疫动物制备抗凝集素抗体)与结合在细胞上的凝集素反应。间接法还有糖-凝集素-糖法,该方法是利用生物细胞膜的特殊糖基与凝集素结合后,再用

临床化学检查方法介绍变性球蛋白(Heinz)小体染色试验

变性球蛋白(Heinz)小体染色试验介绍:         葡萄糖-6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G-6-PD)缺乏可致红细胞内还原型谷胱甘肽含量减少,随之出现高铁血红蛋白增高,最后形成变性珠蛋白小体,这是附在细胞膜上的一种变性血红蛋白颗粒,又称血红蛋白包涵体,能补某些碱性染料染成紫色或蓝黑色小点。变性球蛋

免疫组织化学染色方法(SP法)

免疫细胞化学(immunocytochemistry)是根据免疫学原理,利用抗体同特定抗原专一结合,对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子;抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于

酵母活细胞染色

实验步骤展

细胞铁染色实验

实验方法原理 骨髓内的铁蛋白及含铁血黄素(细胞外铁)和幼稚红细胞的铁粒(细胞内铁)在盐酸环境下与亚铁氰化钾作用生成亚铁氰化铁,即普鲁士蓝反应.试剂、试剂盒 盐酸溶液亚铁氰化钾溶液碱性复红贮存液复染应用液甲醛实验步骤 一、 实验试剂:1. 4%盐酸溶液,小心取浓盐酸(38%)40ml慢慢滴加至冷蒸

细胞铁染色实验

实验方法原理骨髓内的铁蛋白及含铁血黄素(细胞外铁)和幼稚红细胞的铁粒(细胞内铁)在盐酸环境下与亚铁氰化钾作用生成亚铁氰化铁,即普鲁士蓝反应.试剂、试剂盒盐酸溶液亚铁氰化钾溶液碱性复红贮存液复染应用液甲醛实验步骤一、 实验试剂:1. 4%盐酸溶液,小心取浓盐酸(38%)40ml慢慢滴加至冷蒸馏水340

铁染色时正常血细胞染色反应

1)细胞外铁:观察骨髓小粒中的铁,呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状。根据骨髓小粒中铁的存在方式及量将细胞外铁分为(-)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。2)细胞内铁:观察100个中幼红细胞和晚幼红细胞计算出铁粒幼红细胞的百分比。铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞,根据蓝色铁颗

铁染色正常血细胞的染色反应

1)细胞外铁:观察骨髓小粒中的铁,呈弥散蓝色、颗粒状、小珠状或块状。根据骨髓小粒中铁的存在方式及量将细胞外铁分为(-)、(+)、(++)、(+++)、(++++)。2)细胞内铁:观察100个中幼红细胞和晚幼红细胞计算出铁粒幼红细胞的百分比。铁粒幼红细胞是指胞质中出现蓝色铁颗粒的幼红细胞,根据蓝色铁颗

血细胞染色—吉姆萨染色法

吉姆萨(Giemsa)染色法吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为

细胞表面抗原染色的组织样本制备方法

该方法适用于新鲜和冷冻标本1.将组织(10-20mm)切成1-2mm的碎片,用缓冲液或培养液浸湿。2.用1ml缓冲液或培养液预洗Medicon 二遍。3.将组织和1ml缓冲液或培养液放入到Medicon中,盖上盖子,将Medicon 插入到Medimachine中。4.降解组织。降解组织的时间长短依