免疫组织化学染色方法(SP法)
免疫细胞化学(immunocytochemistry)是根据免疫学原理,利用抗体同特定抗原专一结合,对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子;抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于组织中的部位。常用的标记物有荧光素和酶。荧光素标记的称为免疫荧光法(immunofluorescent technique),常用的萤光素有异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate)、罗丹明(rhodamine)等。酶标记的称为酶标免疫法(enzyme-labeled antibody method),常用的酶有辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase),酶与底物发生反应后形成不透明的沉积物,从而显示出抗原存在的部位。抗体与抗原的结合方法可分为直接法和间接法两种,直接法是将带有标记的抗体......阅读全文
免疫组织化学染色方法(SP法)
免疫细胞化学(immunocytochemistry)是根据免疫学原理,利用抗体同特定抗原专一结合,对抗原进行定位测定的技术。抗原主要为大分子或与大分子相结合的小分子;抗体则是由浆细胞针对特定的抗原分泌的γ球蛋白。如果将抗体结合上标记物,再与组织中的抗原发生反应,即可在光镜或电镜下显示出该抗原存在于
免疫碱性磷酸酶组织化学实验——间接免疫碱性磷酸酶法
免疫碱性磷酸酶组织化学技术是以碱性磷酸酶(AKP 或 AP)取代 HRP 来显示结果的免疫酶组织化学技术。最早出现的是间接免疫碱性磷酸酶法(IAP),1983 年 Mason 及 Moir 等建立了碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)复合物法。随后,人们建立了更为敏感的生物素-亲和素-碱性磷酸酶复合
亲和免疫组织化学实验——LSAB-法
实验方法原理LSAB 法或称 S-P 法、SABC 法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有 HRP 或 AKP 酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量 60000,不含糖链,等电点 pI 为 6.0~6.5
巨细胞包涵体病的病理学检查
1、组织病理学检查活检或尸解组织病理切片,用苏术精-伊红或姬姆萨染色后镜检,在光镜下检查受染细胞,可发现细胞及细胞核的巨大化且有包涵体,核内包涵体周围与核膜间有一清晰的透明圈隔开,似猫头鹰眼睛,有诊断价值。但阴性结果不能除外。有报道采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白,过氧化酶连结法(s-P法)检测组
巨细胞包涵体病的诊断及病理学检查
诊断 确诊CID包括临床表现及实验室确诊的证据,仅有实验室检测证据无临床表现称为CMV感染.不能诊断为CID。以下情况提示有CID的可能性:新生儿有黄疸、肝脾肿大、皮肤粘膜有出血点、周围血异常淋巴细胞增多,但血清嗜异性凝集反应阴性。 病理学检查 1、组织病理学检查活检或尸解组织病理切片,用
SABC法亲和素与生物素系统的操作流程
实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含
水解酶的基本分类
水解酶在EC编号中分类为EC3,并以它分解的键再细分为几个子类:EC3.1:酯键(酯酶)EC3.2:糖(糖基酶)EC3.3:醚键EC3.4:肽键(肽酶)EC3.5:C-N键,但不包括肽键EC3.6:酸酐EC3.7:C-C键EC3.8:卤键EC3.9:P-N键EC3.10:S-N键EC3.11:S-P
水解酶的分类介绍
水解酶在EC编号中分类为EC3,并以它分解的键再细分为几个子类:EC3.1:酯键(酯酶)EC3.2:糖(糖基酶)EC3.3:醚键EC3.4:肽键(肽酶)EC3.5:C-N键,但不包括肽键EC3.6:酸酐EC3.7:C-C键EC3.8:卤键EC3.9:P-N键EC3.10:S-N键EC3.11:S-P
水解酶如何分类?
水解酶在EC编号中分类为EC3,并以它分解的键再细分为几个子类:EC3.1:酯键(酯酶)EC3.2:糖(糖基酶)EC3.3:醚键EC3.4:肽键(肽酶)EC3.5:C-N键,但不包括肽键EC3.6:酸酐EC3.7:C-C键EC3.8:卤键EC3.9:P-N键EC3.10:S-N键EC3.11:S-P
SABC法亲和素与生物素系统的操作流程
实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法,它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质,相对分子质量60000,不含
学者们利用地震噪声互相关发现下地幔散射体的反射波
下地幔占地球体积近60%,在各种尺度上都表现出强烈的不均匀性。对下地幔不均匀体特别是小尺度散射体的分布、形态和性质的研究,可以为认识地球深部物质组成及相变、地幔流变性、地幔对流尺度、地幔混合效率等提供重要制约。 传统研究方法主要有S-P转换波法和反射前驱波法。其中,利用震源下方的S-P转换波法
亲和免疫组织化学实验——改进-CSA法
实验方法原理已有的研究结果证实,CSA 法较 LSAB 法敏感 500~1000 倍,较 EnVision 法敏感 20~100 倍。其对细胞周期素等核内抗原的定位,有独特的优点,定位准确性、敏感性、稳定性要较标准的 CSA 法好,其敏感性和穿透性要好于 EnVision 法。最近,Hasui K
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。 bradford法,也称考马斯蓝染色法(coomassie blue staining)。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在
bradford法和lowry法是什么法
bradford和lowry两者都是生物检验的化学试剂。 bradford法,也称考马斯蓝染色法(coomassie blue staining)。考马斯亮蓝G-250测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250在游离态下呈红色,当它与蛋白质的疏水区结合后变为青色,前者最大光吸收在
沉淀法、过滤法、蒸馏法的区别
一沉淀法:固液分离。有时为了加速沉淀,可以加入一些凝聚剂,如明矾、活性炭等。二过滤法:固液分离。但是固体必须是不溶于水的才行。三蒸馏法:液液分离。利用沸点不同,沸点低的先蒸馏出来,沸点高的后蒸馏出来。
Folin—酚试剂法(Lowry法)
实验概要本文介绍了Folin—酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Fol
外标法与内标法
一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质
内标法与外标法
一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时,加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响,以提高分析结果的准确度。 内标法在气相色谱定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时,在样品中加入一定量的标准物质,它可被
气相法液相法固相法优缺点
气相法液相法固相法优点:分离效率高,分析速度快,样品用量少和检测灵敏度高。选择性好,可分离、分析恒沸混合物,沸点相近的物质,某些同位素,顺式与反式异构体邻、间、对位异构体,旋光异构体等。气相法液相法固相法缺点:分析成本高,液相色谱仪价格及日常维护费用贵,分析时间一般比气相长。检测器气相色谱法中可以使
色谱定量方法:标准加入法内标法外标法
色谱分析的重要作用之一是对样品定量。而色谱法定量的依据是:组分的重量或在载气中的浓度与检测器的响应信号成正比。常见定量分析方法分为面积归一化法、内标法、外标法等。大家常常容易傻傻分不清楚的莫过于内标法、外标法了。 以内标法为例,选一与欲测组分相近但能完全分离的组分做内标物(当然是样品中没有的组
可见异物检查法第一法(灯检法)
取规定量供试品,除去容器标签,擦净容器外壁,必要时将药液转移至洁净透明的适宜容器内,将供试品置遮光板边缘处,在明视距离(指供试品至人眼的清晰观测距离,通常为25cm),手持容器颈部,轻轻旋转和翻转容器(但应避免产生气泡),使药液中可能存在的可见异物悬浮,分别在黑色和白色背景下目视检查,重复观察,总检
峰面积归一法、内标法、外标法区别
色谱定量分析方法可以分为外标法、内标法、归一化法三大类。当能够精确进样量的时候,通常采用外标法进行定量。这种方法标准物质单独进样分析,从而确定待测组分的校正因子;实际样品进样分析后依据此校正因子对待测组分色谱峰进行计算得出含量。其特点是标准物质和未知样品分开进样,虽然看上去是二次进样,但实际上未知样
各显神通!浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法
面积归一法、内标法、外标法、标准加入法。这么多定量法,用哪一种呢?每一种的适用范围是什么呢?其优缺点又是什么?其标准物又有什么要求呢?看完你就都知道了。 1、归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法,各成分校正因子一致时可用该法。 归一化法的优点: 该法简便
TGFf3/Smad信号通路相关蛋白表达
TGF-f3/Smad信号通路相关蛋白表达 实验方法原理 TGF-13/Smads信号传导通路中任一元件的异常都可以引起TGF-13/Smads信号传导紊乱,
TGFf3/Smad信号通路相关蛋白表达
TGF-f3/Smad信号通路相关蛋白表达 实验方法原理 TGF-13/Smads信号传导通路中任一元件的异常都可以引起TGF-13/Smads信号传导紊乱,
亲和免疫组织化学实验——-CSA法
实验方法原理催化信号放大系统(catalyzed signal amplification system,CSA),也称酿胺信号放大(tyramine signal amplification system,TSA)或称 CARD(catalyzed repoter deposition)。该方法的
浅谈归一化法、内标法、外标法及标准加入法区别很重要!
1.归一化法 把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法,称为归一化法。 各成分校正因子一致时可用该法,该法简便、准确,特别是进样量不容易准确控制时,进样浓度及进样量的变化的影响很小。 其他操作条件,如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。
同核双原子分子的分子轨道能级图
将分子轨道按能量由低到髙排列,可得到分子轨道能级图。第二周期同核双原子分子轨道能级图(图1)有两种情况。图1(a)适用于 和 分子。氧原子的2p 轨道与2S轨道的能级差 = J,F原子的2P轨道与2s 轨道的能级差 = J,它们的 2s 和 2p 原子轨道能量相差较大。它们的分子轨道排列中, 高于
同核双原子分子的分子轨道能级图
将分子轨道按能量由低到髙排列,可得到分子轨道能级图。第二周期同核双原子分子轨道能级图(图1)有两种情况。图1(a)适用于 和 分子。氧原子的2p 轨道与2S轨道的能级差 = J,F原子的2P轨道与2s 轨道的能级差 = J,它们的 2s 和 2p 原子轨道能量相差较大。它们的分子轨道排列中, 高于
消化道接种法、鼻腔接种法及角膜接种法
实验材料实验动物试剂、试剂盒病毒试剂仪器、耗材注射器实验步骤消化道接种。在分离腹泻病毒或经由消化道病毒感染的研究中,可采用灌胃接种法将所接种的临床标本或病毒用灌胃器灌到动物胃内。抓取固定小鼠,用灌胃器吸取接种物,将灌胃针从鼠的口腔插入,使口腔与食道成一条直线,再将灌胃针沿咽后壁慢慢插入食道,可感到轻