“一锅法”，Cy5合成策略
近红外菁染料Cy5因光谱峰宽小、光稳定性强、背景吸收低等优点在分子示踪、生物成像等领域应用广泛。然而，包括Cy5在内的绝大多数荧光染料分子，主要被用作外源性有机分子，在活细胞内的原位合成受到合成条件（如空气、水、pH、温度、浓度、催化剂）和生物安全性等因素的极大限制。国内外近年来有机光化学研究的迅速发展为解决细胞环境中外源性染料分子合成的问题提供了重要机会。 近日，南京大学的冯福德教授和中国科学院化学研究所的王树研究员合作，发现染料中间体1-(3-氨丙基) -2,3,3-三甲基-3-氢-吲哚（TMI）具有特殊的光敏性质，能够在加热和白光诱导下转化为Cy5染料，提出了“一锅法”的Cy5合成策略，并阐释了Cy5共轭骨架与TMI侧基之间的结构关联、氢原子转移和迈克尔加成反应等参与的化学机制。 非常有意义的是，Cy5的光控合成在活细胞胞内环境中也可以实现。光照时间依赖性以及在特定细胞器（溶酶体）的高定位性，表明Cy5原位合成......阅读全文
荧光共振能量转移FRET肽和寡核苷酸荧光标记的应用1
荧光染料标记的肽和寡核苷酸是生化和细胞研究中的重要工具，目前荧光肽和寡核苷酸已广泛用于所有主要类型的荧光成像中，包括荧光共振能量转移（FRET），这些标记的生物分子被广泛用于基于分子信标和其他技术的传染病诊断。FRET肽和寡核苷酸也已通过荧光相关细胞分选（FACS）用于细胞分析，用于体内或
基因芯片技术的标准操作规程
基因芯片的制备 以玻璃片或硅片为载体,采用原位合成和微矩阵的方法将寡核苷酸片段或cDNA作为探针按顺序排列在载体上。 荧光标记 在基因组DNA扩增过程中,将带有Cy3或Cy5荧光素的dUTP或dCTP加入到新合成的DNA链,使新合成的DNA链带有荧光标识。 杂交和洗涤 使带有荧光标记gDNA
抗体芯片——新一代的蛋白分析手段
蛋白质是一切生命活动的基础，受基因表达的调控，因而以检测样品中的mRNA为基础的cDNA芯片是当今研究中倍受关注的研究手段。但是，由于存在着转录后加工、翻译调控以及翻译后加工等多种调节机制，基因的表达，或者说mRNA的水平并不必然代表蛋白质产物的水平。因此，以微阵列技术对生物样品作整体蛋白质表达分析
如何选购适合的凝胶成像分析系统
根据产品应用范围来区分：1、普通凝胶成像分析系统：适用于对蛋白凝胶电泳 (考马斯染色，银染 ) 等可见光样品，以及 DNA/RNA （EB、TLC plates 、SYBR Green）等紫外；进行图象采集并进行定性和定量分析；2、化学发光成像分析系统：适用于化学发光 / 紫外光 / 可见光凝胶成像
荧光二抗如何选择Dylight荧光与传统荧光标记的比较
荧光二抗的选择——Dylight荧光与传统荧光标记的比较顾名思义，荧光二抗通常指代的就是带荧光团标记的二抗，这样的二抗可以通过观察其在不同波长下荧光的强度来确定其二抗的含量。常见的荧光团包括FITC、Rhodamine、Texas Red、PE、Cy系列等。比如FITC即异硫*酸荧光素，是目前应用最
Abbkine新型DyLight－488绿色荧光
顾名思义，荧光二抗通常指代的就是带荧光团标记的二抗，这样的二抗可以通过观察其在不同波长下荧光的强度来确定其二抗的含量。常见的荧光团包括FITC、Rhodamine、Texas Red、PE、Cy系列等。比如FITC即异硫氰酸荧光素，是目前应用最广泛的荧光素。最大吸收光波长为490～495nm，最
糖链分子工程：干细胞质量监控
人诱导的多能干细胞（hiPSC）和胚胎干细胞（hESC）作为再生医学的细胞来源获得了极大的关注。hiPSC和hESC具有永久生长（自我更新）和分化成包含人体（多能性）的任何类型的细胞的能力，甚至少数细胞可在受体内形成畸胎瘤。干细胞质量监控决定着干细胞研究的进展。为了解决这个问题，我们都集中在诱导的多
超分辨率显微镜市场概况和主要品牌
2019年，全球超高分辨率显微镜（super-resolution microscopes，SRM）市场规模为26亿美元，预计从2020年到2027年复合增长率（CAGR）为8.7％。在预测期内推动该市场增长的关键因素包括：在生命科学行业中的应用不断增加、技术进步以及对纳米技术的日益关注。共聚焦和荧
用荧光激活的细胞分类仪检测凋亡细胞
1）原位缺口翻译检测裂解的DNA片段：1、取106经促调亡物质处理的细胞，用1％ BSA-PBS洗涤细胞后加入0.1ml FITC标记的抗CD4或抗CD8单克隆抗体，4℃ 20分钟。用1％ BSA-PBS洗涤细胞。置冰上。2、加入0.1ml 1％多聚甲醛，置冰上5分钟，加入60％（v/v）甲醇溶液，
LSCM多重荧光标记
由于大部分实验都需同时观测两个或多个细胞内的组分，需要对细胞进行多重荧光标记。这时，研究者需要综合考虑实验目的、所使用的激光共聚焦显微镜配置和已有的实验材料。通常，激光共聚焦显微镜配备 4 个激光器(405nm 半导体固体激光器、氩离子激光器、543nm 氦/氖激光器或 561nm半导体固体激光器和
常见的荧光染料介绍
目前常见的荧光染料包括：异硫氰酸荧光素（FITC）四甲基异硫氰酸罗丹明四乙基罗丹明得克萨斯红藻红蛋白（PE）花青类染料(Cy3、Cy5)新型荧光素如量子点（半导体纳米晶体）。
StrataQuest定量分析方法：探索胞内原生生物与宿主细胞...1
StrataQuest定量分析方法：探索胞内原生生物与宿主细胞的关系探究宿主-病原体相互作用的特点是研究微生物与免疫学方向学科的重要方法。宿主细胞吞噬病原体后其表征将会改变。利用实时PCR仪或者ELISA的技术，测量与基因编码蛋白相关的行为是消除病原体还是免疫逃逸。多数研究都利用主要宿主细胞或者细胞
RNA抽提和标记实验
实验方法原理 实验材料 从组织培养收获的细胞 在组织培养中的细胞 冻存的整个组织
RNA抽提和标记实验
实验材料从组织培养收获的细胞在组织培养中的细胞冻存的整个组织试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液（PBS）TRIzol 试剂乙醇乙酸钠EDTANaOHTris-ClTE 缓冲液固定化的 oligo-dT 引物仪器、耗材组织匀浆器热循环仪荧光扫描仪实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1a.
RNA抽提和标记实验
实验方法原理 实验材料 从组织培养收获的细胞在组织培养中的细胞冻存的整个组织试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液（PBS）TRIzol 试剂乙醇乙酸钠EDTA NaOHTris-ClTE 缓冲液固定化的 oligo-dT 引物仪器、耗材 组织匀浆器热循环仪荧光扫描仪实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材
供应荧光体细胞计数仪
荧光体细胞计数仪MHD-608荧光体细胞计数仪 详细介绍采用免疫荧光染色标记体细胞，特异性强、灵敏度高、操作简单四通道玻片，连续完成4个样品计数提供两种计数模式 标准模式：40秒完成一个样品计数 精准模式：90秒完成一个样品计数 计数范围：0 ～ 5000万个/毫升自动图像识别和数
免疫荧光细胞化学技术3
四、荧光图像的记录方法 荧光显微镜所看到的荧光图像，一是具有形态学特征，二是具有荧光的颜色和亮度，在判断结果时，必须将二者结合起来综合判断。结果记录根据主观指标，即凭工作者目力观察。作为一般定性观察，基本上可靠的。随着技术科学的发展，在不同程度上采用客观指标记录判断结果，如用细胞分光光度计，图像
荧光激活细胞分选仪的功能
中文名称荧光激活细胞分选仪英文名称fluorescence-activated cell sorter;FACS定 义用结合有荧光染料的探针(如抗体)标记细胞进行流式细胞计数、分选的仪器。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
免疫荧光细胞化学染色方法
免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 （一）直接法 1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光 抗体或兔抗人 IgG 或 IgA 荧光抗体
荧光激活细胞分选仪的用途
中文名称荧光激活细胞分选仪英文名称fluorescence-activated cell sorter;FACS定 义用结合有荧光染料的探针(如抗体)标记细胞进行流式细胞计数、分选的仪器。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
免疫荧光细胞化学的原理
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色)，可以看
荧光碳点捕捉脑肿瘤细胞
前不久，中科院长春光学精密机械与物理研究所研究员孙再成的研究小组、中科院长春应用化学研究所研究员谢志刚和景遐斌的课题组，与四川大学高会乐副教授课题组合作，通过荧光活体成像系统，观察了碳点在荷瘤小鼠内的生物分布，为脑肿瘤的早期诊断和进一步构建智能化纳米药物奠定了坚实的基础。 利用柠檬酸和胺合成
免疫荧光细胞化学技术2
四、荧光抗体的保存 以0～4℃或-20℃低温保存，防止抗体活性降低和蛋白变性。最好加入浓度为1：5000～10000的硫柳汞或1：1000～5000的叠氮钠防腐，小量分装如0.1～1ml，真空干燥后更易长期保存。[NextPage] 第三节 免疫荧光细胞化学染色方法 一、标本制作 可制作涂片
荧光染色观察药物诱导细胞凋亡
【原理】 Hoechst 33258 为特异性 DNA 染料，与 A-T 键结合，这种染料对死细胞或经 70% 冷乙醇固定的细胞可立即染色。而活细胞的着色是渐进性的，在 10min 内可达饱和。在荧光显微镜下，活细胞核呈弥散均匀荧光，出现细胞凋亡时，细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒块状
免疫荧光细胞化学的原理
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素，制成荧光抗体(或抗原)，再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素，利用荧光显微镜观察标本，荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红
免疫荧光细胞化学染色方法
一、标本制作 可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 （一）直接法 1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等），在室温或37℃染色30
原代细胞免疫荧光鉴定步骤
为了更好的帮助客户提供真实的原代细胞，使用免疫荧光鉴定出提取的细胞类型，免疫荧光技术又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。该技术的主要特点是：特异性强、敏感性高、速度快。 一下是赛百慷技术人员提供的免疫荧光细胞鉴定的步骤，仅做
流式细胞术荧光那些事儿
自上世纪70年代问世以来，流式细胞术（FCM）在基础科研和临床诊断和治疗上得到了越来越广泛的应用。但是，做FCM往往会遇到荧光信号太弱的情况。好不容易搞了一管细胞去做流式，却做不出荧光信号。真的是急死个人。其实，毛博也是到米国做博士猴以后才开始做流式的。时间不算长。但是做得非常非常多。每天都要做好几
LSCM表达荧光蛋白的组织
表达荧光蛋白的组织经冷冻切片制样后，可直接封片，观察并扫描图像，也可配合使用其它荧光染料进行免疫荧光抗体标记和核染色。同时表达GFP 和 RFP 荧光蛋白的组织切片，如还需作免疫荧光抗体标记，应选择可以被 633 nm 和 405 nm 波长激光器激发的荧光染料，如 CY5、Alexa fluor
多肽荧光标记——FITC修饰和AMC修饰（二）
（2）在整条肽中的某个Lys侧链接入FITC，Lys侧链为末端为-NH2的四碳直链烷基，直接起到了降低空间位阻的作用。这种修饰方式能够灵活的在整条肽中任何位置进行FITC修饰，而不仅仅局限于末端。我们所采用的FITC修饰多肽的两种形式，都具有操作简便，成功率高，容易分离纯化等优点。2.AMC修饰7-