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多色探针熔解技术有何潜力？

多色探针熔解曲线分析技术荧光PCR是应用最广的核酸检测平台。荧光PCR操作简单、闭管反应，可有效降低扩增产物污染，但一大缺点在于它所能检测的靶标数目有限。这也是荧光PCR在临床应用受到制约的重要因素，但随着多色探针熔解曲线分析技术的出现，却很好的解决了这个问题，即能够在保留荧光PCR优点的同时也能突破它检测靶标有限的瓶颈。探针熔解曲线分析指的是在PCR完成后，通过实时监测温度变化过程中探针荧光强度变化的情况，得到荧光强度或者荧光强度相对温度的负导数随温度变化的曲线，即探针熔解曲线 ,从探针熔解曲线上可以获得探针与靶序列杂交的熔点值（Tm值）。当荧光探针与不同的靶序列杂交时，由于碱基匹配程度不同，形成双链DNA的稳定性也各不相同，其Tm值也就存在差异。一条荧光探针可同多条序列相近的靶序列杂交产生不同的Tm值，因此根据Tm值的差异就可以实现不同靶的检测和区分，即Tm值的多重检测，若同时结合多色荧光检测就可以大大提高单个反应中检测的靶......阅读全文