PCR实验室最容易忽视的环节（二）
3.滤芯吸头测试吸头需使用经校准的移液器（1）准确性：将n个吸头分别吸取定量的纯水称重，重量与体积的关系按照1 g/mL换算。（2）气密性：取n个吸头，吸取最大量程的含有1％甘油的墨水，观察有色液体不出现在滤塞之上，液面相同为合格。（3）防气溶胶性能：取n个吸头，吸取阳性核酸，反复吹吸10次，换另一个新吸头在阴性纯水中反复吹吸10次，取阴性纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。（4）污染物质检：取n个吸头，吸取阴性纯水反复吹吸10次，取阴性纯水作为模板进行扩增，qPCR无扩增为合格。（5）抑制物质检：取n个吸头，吸取弱阳性质控物反复吹吸10次，然后进行提取;吸取RNA核酸和DNA核酸反复吹吸10次，作为模板进行扩增，qPCR扩增未被抑制为合格。4.采血管、采样管、采样拭子和一次性吸管等主要考察污染物和抑制物（1）污染物质检：将n个耗材加入一定量阴性纯水，盖好盖子涡旋1 min后静置30min，吸取纯水作为模板进行扩增，qP......阅读全文
PCR扩增仪的选择二
一、温度控制对普通PCR仪来说，温度控制指标主要是指温度的准确性、均匀性、以及升降温速度，对梯度PCR仪来说，除了温度的准确性和均匀性、升降温速度以外，还必须考虑仪器在梯度模式和标准模式下是否具有同样的温度特性。温度的准确性是指样品孔温度与设定温度的一致性，它直接关系到实验的成败。如果排除样品加入过
PCR检测的那点事儿（二）
对于PCR检测来说，必须有配套的实验室来进行操作，规范的实验室是实验成功的基础，那么PCR实验室如何装修设计？PCR实验室又有哪些管理要点呢？今天小编就为大家分享这方面的知识。快来看看你的实验室布局是否合理吧！ 一、PCR实验室装修知识 这里着重介绍PCR实验室装修的功能区划分，建
“韦神”又上热搜－数学家为何最容易满足公众对天才的想象
北京大学数学科学学院“韦神”韦东奕又上热搜了！他帮人“秒破”难题的消息刷爆全网。 有网友称，自己的科技公司要做一个数学模型来模拟产品的物理性能，但是模型越复杂，模拟就越失真。包括6名博士在内的团队耗时4个月都无法解决。求助韦东奕后，很快就破解了难题，并且韦东奕认为这事太简单所以拒收报酬。 这
计量校准实验室标准物质管理的8个环节
一 标准物质的选择 对于检定与校准实验室来讲，正确选择标准物质是其使用中至关重要的环节，正确的选择可提高检测结果的有效性和可靠性。因此在标准物质的选择时应注意以下两点:第一，形态选择。由于标准物质可以是单一的或混合的气体、液体或固体，因此根据测量方式和用途的不同，选择不同形态的标准物质；第二，
化学发光在磁性分离上不可忽视的问题（二）
给CLIA-IVD试剂盒生产商的建议：与其不断考虑更换磁珠，我们更应该更快捷、更经济地去挖掘出来源于磁性分离设备的问题和因素。当调整了磁性分离设备后，如果磁珠能正常悬浮，那么对磁珠的疑虑也就不攻自破了，同时也没有必要再重建包被的操作工艺。误区2：选用更大的磁铁来避免分离的损耗在上一部分我们讨论了为什
PCR实验室的建立
为了对以个特定序列进行PCR做重复检测,需要三个不同的区域,每一个区域的具体技术操作和试剂在下面详细列出. 1、样品准备区这个区域专门用作样品的准备，在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施：1）PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。2）组织培养物、组织标本和血清样品都带
PCR实验室的建立
为了对以个特定序列进行PCR做重复检测,需要三个不同的区域,每一个区域的具体技术操作和试剂在下面详细列出.1、样品准备区这个区域专门用作样品的准备，在制备和操作用于核酸提取的试剂时应该采取预防措施：1）PCR产物和带有要扩增序列的DNA克隆不能在这个房间操作。2）组织培养物、组织标本和血清样品都带进
PCR实验室的设计
1 PCR实验室平面布局 PCR扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域：试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。 各实验区
PCR实验室的简介
Pcr实验室又叫基因扩增实验室。PCR是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称。是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA复制。通过DNA基因追踪系统，能迅速掌握患者体内的病毒含量，其精确度高达纳米级别，精确检测乙肝病毒在患者体内存
PCR实验室的条件
1、必须拥有标准的的PCR荧光实验室;实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点，目前已得到广泛应用。本文试就其定量原理、方法及参照
实验室最实用的10个小贴士
1打开粘固的玻璃磨口 当玻璃仪器的磨口部位因粘固而打不开时，可采取以下几种方法进行处理。 (1)敲击用木器轻轻敲击磨口部位的一方，使其因受震动而逐渐松动脱离。对于粘固着的试剂瓶、分液漏斗的磨口塞等，可将仪器的塞子与瓶口卡在实验台或木桌的棱角处，再用木器沿与仪器轴线成约70°角的方向轻轻敲击，
实验室最危险的17种物质
慢性毒性，最易忽视,经常在实验室做实验的各位亲，是否接触过如下几种化学物质呢?今日，小编就来为大家科普科普吧! 1.DMSO： DMSO是二甲基亚砜，用途广泛。用作乙炔、芳烃、二氧化硫及其他气体的溶剂以及腈纶纤维纺丝溶剂。是一种即溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂。对
不可忽视的实验室有毒有害废液处理问题
在环境监测实验室有毒有害废液处理上是实验室需要解决的一大难题，大量的监测废液若是直接将有毒有害废液进行排放，其中的汞、铅、镉等有毒物质会对环境以及周围居民的健康产生危害。所以在环境监测实验室有毒有害废液处理上不可忽视。 实验室有毒有害废液一般有四个来源，一是分析剩余水样，主要为企业、医院等
PCR基因芯片上荧光PCR反应的研究（二）
1.3.2 PCR-SSCP方法分析按照我室常规进行。 1.3.3 Taqman荧光探针 以发现的ALAS2基因第五外显子点突变为中心设计，序列如下： 5’ （荧光集团）FAM-CAAGATCATAGAGAAGAAAC- TAMRA（淬灭集团） 3’，设计Taqman荧光PCR反应的上下
PCR注意事项（二）
3)如果没有回收到目的片段，还需要作什么对照实验？A）涂布未转化的感受态细胞。如有菌落，表明氨苄失效，或污染上带有氨苄抗型的质粒，或产生氨苄抗型的菌落。B）转化完整质粒，计算菌落生长数，测定转化效率。例如，将1ug/ul质粒1:100稀释,1ul用于100ul感受态细胞转化。用SOC稀释到1000u
PCR经验总结（二）
5. touchdown PCR 原理很简单,但的确是一个很有用的方法。举个例子就OK, ANNEALING TEMP. 55度94 5min 94 30s 60 30s 72 1min 2cycles 94 30s 59 30s 72 1min 2cycles 94
如何设计PCR引物(二)
上回说到如何寻找保守序列，经过隆地熊我一番罗嗦，七七八八也该知道了些。当然，要想做到炉火纯青，各位小白还得勤加练习。本回隆地熊我就要进入正题了，不然对不起这图文题目。在做PCR引物设计前，首先得了解引物设计的基本原则。根据网上资料汇总（主要来自生物谷、生物秀、小木虫、百度文库等，特此一并感谢，具体不
PCR假阴性问题总结
PCR的假阳性问题深受重视，但PCR假阴性问题相对于临床检测更为严重。其实PCR假阳性的问题是比较单纯的，一般仅涉及污染和引物的非特异性问题。而污染可以通过严格的实验室管理，合理的环境设置，以及加入UNG酶抗污染基本可以解决，而引物的非特异性问题基本属于厂家试剂质量问题。而PCR的假阴性却不同，它
PCR实验室装饰
1、几个区域的大小设置情况，试剂准备区、扩增区、扩增产物分析区，空间可以相对小一些，样品制备区要放置生物安全柜和低温冰箱，空间应大一些。 2、试剂准备区、样品制备区设紧急洗眼器，以保证操作人员的安全。 3、PCR实验室没有严格的净化要求，可以根据用户的使用情况和资金的投入选择。
PCR实验室介绍
基因扩增实验又称PCR实验，其特点是能将微量的DNA大幅增加，PCR是分子生物学研究和实验的常规方法，广泛应用于生物学各个领域，例如：艾滋病检测、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的检测和诊断，DNA指纹、个体识别、亲子鉴定及法医物证，动、植物检疫，动物及其衍生产品检测，动物饲料、化妆品、食品卫生检测，转基因
PCR实验室布局
PCR实验室原则上为试剂准备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域并设有专用走廊，各工作区域应设缓冲间，工作区与缓冲间宜安装连锁装置。不同功能的工作区应是分隔独立的，各工作区有明显的标志，不能直通，如果紧密相连，需安装物品传递窗。前两区为扩增前区，后两区为扩增后区，扩增前区与扩增
PCR实验室污染
在众多的生物实验室中，分子生物学检测方法如PCR因其检测灵敏度高、准确度好、操作方便、快速等优势已经被广泛应用。不过正是由于它的高灵敏性，实验室中极微量的污染源都有可能导致检测结果的假阳性，所以对环境中污染源的防控也极为重要。一旦出现实验室环境污染，比如样本之间交叉污染、试剂污染、仪器污染、阳性对照
PCR实验室分区
目前PCR实验室建设要求至少应该分为三个区域，即试剂准备区、核酸制备区和PCR扩增区，如果要对扩增产物进行开放性鉴定，如杂交、电泳等操作，原则需要增加第四个区。实验室分区的主要目的是避免纯化核酸和扩增产物逆向污染前一个区域，但多年的经验表明，无论是三区还是四区的设置，似乎都没有完全杜绝实验室污染的发
木耳中的二氧化硫不容忽视
吃点诸如黑木耳、香菇之类的菌藻食物有助于营养的均衡。但是黑木耳偶尔闻起来有股刺鼻发酸的味道。那这股刺鼻的酸味是这么回事呢？ 原来木耳中会用到二氧化硫，在食品行业，二氧化硫及其盐类因具有漂白、脱色、防腐、抗氧化等作用而被广泛使用。在木耳烘烤干制加工过程中，当用薰硫脱色或使用煤、油、柴为燃料时,产生的
普通PCR、实时荧光定量PCR和数字PCR对比分析（二）
模板 DNA 量越多，荧光达到域值的循环数越少，即 Ct 值越小。Log 起始模板浓度与 Ct 呈线性关系，通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，根据样品 Ct 值，就可以计算出样品中所含的模板量。目前常用荧光标记方法 方法 优点
接触邻苯二甲酸盐更容易早产
罗格斯大学的一名研究人员参与了美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)的一项研究，该研究发现，怀孕期间接触邻苯二甲酸酯类化合物的孕妇早产风险增加。邻苯二甲酸盐是用于个人护理产品的工业化学品，如化妆品、溶剂、洗涤剂和食品包装。在检查了美国6045名孕妇的数据后，
容易：长二F火箭－航天员专属“神箭”
把航天员们送到太空的长征二号F运载火箭，是专为载人航天工程研制的，30年间一共发射了17次，次次成功。它和其他火箭有什么不同呢？总台记者日前对长二F火箭的总设计师容易进行了专访。 总台央视记者 吴天白：长征二号F火箭作为我国第一型也是唯一一型载人火箭，有着“中国神箭”的美誉。30年间，长二F火
免疫忽视的定义
免疫忽视（immunological ignorance），指自身应答的T细胞克隆与相应组织特异性抗原并存，在正常情况下，不引起自身免疫疾病的发生。
免疫组化方法中关键环节及其原理（二）
二、免疫荧光方法中的重要环节 1、冰冻切片制备：建议用新鲜组织，否则组织细胞内部结构破坏，易使抗原弥散。选用干净锋利的刀片、组织一定要冷冻适度等，防止裂片和脱片严重。 2、组织切片固定：切好片风干后立即用冰丙酮等固定液进行固定5-10min,尤其要较长时间保存的白片，一定要及时固定和
PCR实验室的污染来源
1、样本间交叉污染：收集样本的容器被污染或样本密封不严外溢；不同样本移液时忘记更换枪尖或未使用带滤芯枪尖；移液器等实验器具及耗材未及时消毒灭菌；不同样本同时开盖或样本剧烈震荡、反复吹吸导致气溶胶形成扩散，相互交叉污染。2、实验试剂污染：主要是在 PCR 组分试剂加样过程中，由于移液器、容器、阴性对照