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六孔板细胞长至80%-90%confluence,一孔约为5-8x105细胞,按1：6传，三天长满。如果想快点，就1：3传吧。要想达到你想要的生长时间和状态，建议根据一定范围分几个密度摸一下，再确定。在传代时，一般一个孔接种密度为1-2x10000每平方厘米。12孔的底面积为4.5平方厘米。不知道这个细胞的大小多大。但你可以通过经验来增加细胞密度。比如你接5万，3天长满。你接10万时，第一天或第二天，观察下，看是否可以传代......阅读全文
3.2 免 疫 B 细胞的制备血清效价有意义(>1 : 1000)的免疫后动物可以提供抗原反应性B 细胞用于融合。这些细胞可以从脾脏或淋巴结中获得。动物用吸人CO2 处死，在无菌操作下取组织，放 在 4°C无血清培养基中，最多可放lh 。用慑子或针头轻轻打开组织脾脏或淋巴结的外包膜获得
一、细胞： 1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样
一、细胞： 1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。
前言自然杀伤细胞(Nature Killer Cells, NK)是骨髓衍化的淋巴细胞，其最初通过巨大的颗粒性状被识别。NK细胞能自发杀灭多种肿瘤细胞，同时还可保护正常的细胞，从而被认为是癌症的克星。最重要的是，不管是在胞内还是胞外，NK细胞不需要免疫接种或提前激活，就能够自发溶解特定的肿瘤靶细胞，
细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具，形状、规格、用途多样。 你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫？ 你是否正为如何方便、正确使用培养板而苦恼？ 你对如何处理培养板是否也有困惑？ 对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会？ 细胞
人类多能干细胞(hPSCs)因其拥有分化为机体所有类型细胞的能力，使得hPSCs成为研究发育机制以及疾病机理最常用的工具，同时在再生医学以及疾病治疗领域也有非常广泛应用。人类多能干细胞因其来源不同又可分为胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESCs）和诱导多能干细胞（induce
人类多能干细胞(hPSCs)因其拥有分化为机体所有类型细胞的能力，使得hPSCs成为研究发育机制以及疾病机理最常用的工具，同时在再生医学以及疾病治疗领域也有非常广泛应用。人类多能干细胞因其来源不同又可分为胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESCs）和诱导多能干细胞（induced
1、流式所需细胞数问：我目前准备做流式，要做10 个标本，但是细胞总数不多了，我能不能把原来在100ml培养瓶培养的细胞转移到25ml里培养，这样把细胞重悬后，1个100ml的可以分到4个25ml里。请问这样可以嘛？细胞数够嘛？据说做流式至少要105次方个细胞以上才行。丁香网友漂泊认为：细胞数是够的
一、细胞：1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，
细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具，形状、规格、用途多样。 你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫？ 你是否正为如何方便、正确使用培养板而苦恼？ 你对如何处理培养板是否也有困惑？ 对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会？ 细胞培养板的选择 1）细胞培养板依底部形状的不同可分为
栏主要分为基因操作工具、细胞实验部分、动物模型部分、组织水平部分、分子机制部分和实验方案范例六大专题。接下来将为大家分享细胞生物学的细胞增殖相关研究方法。 MTT分析法 MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetraz
(4)细胞分布不均及解决办法问：我的细胞接种培养板，细胞总是聚集在周边部分，该如何处理啊？我看园子里有的战友的细胞却是聚集在中间，是不是板子的质量问题啊？答：请问你的细胞是如何混匀的？是滴管吹打还是振荡培养板？如果是后者，而且是转圈摇匀的话，很有可能由于离心力的作用使细胞甩到周边部分，导致细胞中间少
细胞铺板是细胞实验中最常见又必须掌握的一门技术，看似简单，我们却经常遇到：如细胞居中或者中间稀疏等不均匀分布的现象，导致我们只能扔掉，重新铺板。既耽搁时间又浪费了细胞及培养板等资源。历经多次失败后，才发现原来细胞铺板是有规律可循的，今天我们就聊一聊：细胞铺板的技巧。 如下图为：细胞铺板时，
一、制作标准曲线（测定细胞具体数量时）1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。2、按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，
乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒产品编号产品名称包装C0017乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒500次产品简介：一基的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit)，也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Relea
我做了稳定转染，从G418浓度确定到最后的单克隆化鉴定。有自己的体会也有其他战友遇到的情况, 和大家分享. 没有总结好的地方，大家补充。筛选之前确定G418浓度：1，由于每种细胞对G418的敏感性不同，而且不同的厂家生产的G418有效成分的比重不同，一般1g的粉剂中有效的G418含量大约为0.722
一、制作标准曲线（测定细胞具体数量时）1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。2、按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，
在过去的五年中，荧光蛋白在监测体内生物学研究中，起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是zui早被我们应 用的荧光蛋白，但是随着时间的推移，现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富，包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋 白。它们都可以
细胞铺板是细胞实验中最常见又必须掌握的一门技术，看似简单，我们却经常遇到：如细胞居中或者中间稀疏等不均匀分布的现象，导致我们只能扔掉，重新铺板。既耽搁时间又浪费了细胞及培养板等资源。历经多次失败后，才发现原来细胞铺板是有规律可循的，今天我们就聊一聊：细胞铺板的技巧。 如下图为：细胞铺板时
1．细胞培养与MTT问:做MTT时，96孔培养板细胞浓度该是多少？答:我觉得细胞的浓度并不需要那么精确，关键是接种于每孔的细胞数就大致处于同一水平。比如我做MTT，起初用的细胞浓度为5000/ml，每孔100ul，培养3天观察，发现细胞数太少，各孔OD值反面难于比较。后来我换用 10000/ml，结
结晶紫法活性测定1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞，用0.25%胰酶（以无钙镁离子PBS溶液配制，pH7.4）消化后，加入RPMI-1640培养基（10%新生牛血清，100U/ml青霉素，100U/ml链霉素，pH7.2）吹打细胞，使形成细胞悬液。进行细胞计数，使细胞数为2~2.5×105个
实验方法原理 MTT法是Mosmann 1983年报道的，以后此方法得到了迅速发展并广泛应用于临床与科研研究。其原理是活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物（formazan)，并沉淀在细胞中，而死细胞没有这种功能。二甲亚砜（DMSO）能溶解沉积在细胞中蓝紫色结晶物，溶液颜色深浅
实验方法原理红景天苷不仅具有抗衰老、抗抑郁、抗癌、抗缺氧、保护肝脏、改善心脑血管功能和提高中枢神经系统功能等多种药理作用，还可以起到抗疲劳、抗缺氧、抗肿瘤、抗病毒和增强免疫功能的药理作用。巨噬细胞是机体免疫系统的重要递呈细胞，在特异性和非特异性免疫过程中均发挥着重要的作用。实验材料小鼠试剂、试剂盒S
MTT比色法 实验方法原理 活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物（formazan)，并沉淀在细胞中，而
四唑盐（MTT）比色法可应用于：（1）检测细胞存活和生长；（2）大规模的抗肿瘤药物筛选；（3）细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定；（4）生物活性因子的活性检测。 实验方法原理活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物（formazan)，并沉淀在细胞中，而死细胞没有这种
Cell Counting Kit-8（简称CCK8）试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。相信做细胞的童鞋们对他都很熟悉，然鹅，你确定你使用CCK-8试剂的方式是完全正确的吗？我们还是来仔细了解下吧： 一、CCK8检测细胞增殖/毒性的原理 WST-8【化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基
结晶紫法活性测定1、取对数生长期的人胰腺癌SW1990细胞，用0.25%胰酶（以无钙镁离子PBS溶液配制，pH7.4）消化后，加入RPMI-1640培养基（10%新生牛血清，100U/ml青霉素，100U/ml链霉素，pH7.2）吹打细胞，使形成细胞悬液。进行细胞计数，使细胞数为2~2.5x105个
实验原理 将细胞小室（Transwell小室）放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、
使用说明：1.Calcein AM/PI检测工作液的配制:按照96孔板每孔100μl Calcein AM/PI检测工作液的体系，参考下表配制适量的Calcein AM/PI检测工作液，并充分混匀。10个样品100个样品1000个样品Calcein AM (1000X)1μl10μl100μlPI&
实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒，其基因组含有一段外源核酸序列，通常为编码目标蛋白质的dDNA，在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成