RTqPCR需要注意的那些事
rt-qpcr需要注意的那些事，你都了解吗？在rt-qpcr实验中不论是实验小白还是老司机，都会遇到各种不同的实验问题。解决问题不仅要浪费额外的样品和试剂，还要占用大量的时间一遍遍的重复和分析，真是被实验折磨得焦头烂额。那实验过程中应该注意哪些细节呢？小翊精心为大家总结了rt-qpcr实验的注意事项，希望助小伙伴们一臂之力。rt-qpcr实验包括rna提取与质量评估，逆转录和qpcr三大步骤，每个步骤都有很多注意事项，才能做出可靠的数据。下面由小翊给您详细介绍。rna质量评估在rt-qpcr实验中，rna提取完成后，需要对rna的质量进行评估，合格后才可进行后续实验。评估方法有分光光度计，琼脂糖凝胶电泳，agilent 2100分析等，其中最常用的有分光光度计和琼脂糖凝胶电泳法检测。我们需要注意的是这两种方法需要搭配使用，才能完成对rna浓度、纯度和完整度的检测分析，以保证rna的质量。分光光度计检测法分光光度计主要用于测定rn......阅读全文
罗氏FFPET组织样本抽提RNA试剂盒实验结果分析
High Pure FFPET RNA Isolation Kit基于离心柱法的抽提原理，在柱上直接进行高效DNase消化，在整合的实验流程中方便地去除残留DNA。图1：抽提获得宽泛的RNA片段范围，FFPET RNA抽提物片段长度范围在100-4000bp 使用3中不同的方法从乳腺癌组织的5um
免疫治疗新靶点TNFR2（一）
在这个草长莺飞的春天，是否记得那句“要想富，多栽树”的宣传标语？今天的植树节，百奥赛图知识拓展课堂携智慧树如期而至，与您携手探寻TNFR2。 基本信息 基因功能简介 TNFRSF1B（TNF receptor superfamily member 1b） 为TNF受体超家族成员, 也称为TN
遗传发育所玉米籽粒发育机制研究获进展
RNA编辑广泛存在于植物的线粒体和叶绿体中。RNA编辑作为一种RNA转录后加工机制，对于调控基因表达具有重要意义。RNA C-U的编辑是胞嘧啶(C)经过脱氨转变为尿嘧啶(U)的过程。在此过程中，PPR （pentatricopeptide repeat）结构域通常负责识别编辑位点，而DYW结构域
BioTechniques：新平台10分钟定量miRNA
循环microRNA（miRNA）的发现让科学界兴奋，因其表达随疾病而异，有望作为疾病诊断和预防的生物标志物。然而，miRNA检测的限速因素之一在于实时定量PCR扩增。为此，英国的研究人员采用一种新的热循环仪，在不到10分钟的时间内完成了这一步。这项成果发表在《BioTechniques》5月刊
LncRNA发生m5C异常修饰或成肝癌诊断新靶点的应用
前言：近年来，异常RNA修饰与肿瘤发生的关系引起了广泛关注。作为一种广泛存在的修饰，DNA和RNA中的5-甲基胞嘧啶(m5C)已被发现数十年。DNA m5C修饰在肿瘤发生中的作用已被广泛研究。然而，关于RNA m5C修饰在肿瘤发生中的作用知之甚少。NSUN2是哺乳动物中主要的m5C修饰甲基转
金黄色葡萄球菌一氧化氮合成酶NOS调控万古霉素耐药性
金黄色葡萄球菌是人类重要机会性致病细菌，由甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌（MRSA）引发的感染正严重威胁公共健康安全。万古霉素被认为是临床上治疗严重MRSA感染的最后一道防线，其中度耐药性菌（VISA）的频繁出现，为MRSA的感染治疗带来了巨大挑战。 一氧化氮（NO）可由一氧化氮合成酶（NOS）
生物材料的骨诱导机制
四川大学生物材料工程研究中心的研究团队在Acta Biomaterialia杂志上发表了题为“Correlations between macrophage polarization and osteoinduction of porous calcium phosphate ceramics”的文
提高水稻和玉米的遗传转化效率研究获进展
华南农业大学生命科学学院刘耀光院士团队的研究揭示了在水稻和玉米的愈伤组织中过表达玉米GOLDEN2基因可促进愈伤的分化，从而提高遗传转化效率。相关论文近日在线发表于SCIENCE CHINA Life Sciences。硕士研究生罗婉妮和博士后谭健韬为该论文共同第一作者，郭晶心研究员和祝钦泷研究员为
南京地理所湖泊沉积物中氨氧化微生物类群研究获进展
氮素是影响湖泊营养状态的关键元素之一，氮素的生物地球化学循环在湖泊营养盐循环中占有重要地位。硝化作用（NH3→NO2-→NO3-）是氮循环过程的关键步骤，而氨氧化（NH3→NO2-）是硝化作用的限速步骤。氨氧化微生物是氮循环过程的重要驱动者，其群落结构、丰度和活性等会受到温度和营养负荷等环境因子
科学家为非小细胞肺癌治疗提供新靶点
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/4/499496.shtm肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。基因突变是非小细胞肺癌发生发展和转移的重要因素。KRAS突变是非小细胞肺癌中最主要的基因突变之一，近年来针对KRAS G12C抑制剂的开发取得了突破性
BioRad推出ddPCR突变筛查试剂盒
癌症标志物的检测让我们能够对肿瘤的存在、发展及预后作出判断。然而，在野生型DNA的背景下，癌症相关突变往往因为浓度低，而逃过检测。这时，你需要灵敏而特异的检测技术，比如数字PCR。 Bio-Rad也了解到这一需求，于近日推出了五种突变筛查试剂盒 – Droplet Digital™
天津工生所在微生物代谢调控技术研究中取得进展
代谢调控技术是构建微生物细胞工厂的重要技术手段，构建高效平衡的代谢途径能够抑制副产物或者中间产物的积累，提高目标化合物产量。代谢途径的优化一般是在转录水平和翻译水平上进行代谢途径基因的优化，包括启动子工程、RBSs工程、DNA拷贝数、细胞器的划分和动态启动子调控等。 中国科学院天津工业生物技术
RealTime－PCR－(qPCR)常见问题及解决方案
Real Time PCR(qPCR)，即实时荧光定量核酸扩增检测系统，是一种利用荧光染剂检测每次PCR循环后产物总量的方法技术，是常规PCR的衍生反应。主要是通过荧光信号的变化实时监测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化，通过ct值和标准曲线的关系对起始模板进行定量分析。因其具有灵敏、特异、
新洞察！野生型RRAS2过表达发生慢性淋巴细胞白血病
慢性淋巴细胞白血病(CLL)是西方世界最常见且仍无法治愈的白血病。人们普遍认为，癌症是一种进化过程的结果，这种进化过程是由获得驱动突变所塑造的，这些突变赋予了携带它们的细胞选择性的生长优势。 明显的例子是经典RAS基因（一种致癌基因）的错义突变，它是大约13%的人类癌症发生的基础。尽管许多抑癌
Cas9脂质纳米粒可以作为一种高效的神经原代培养载体－一
作者：Nadia Tagnaouti1 , Anitha Thomas1 , Rebecca De Souza1 , Ian Backstorm1 , Andrew Brown1 , Eric Ouellet1 , Shyam Garg1 , Grace Tharmarajah1 , Kea
新冠病毒核酸检测PCR技术知识点梳理（一）
近日，由于全国复工复产复学的大量需求，阿里健康、美团App 等线上平台联合各大第三方检测机构，陆续开放了线上预约新冠病毒核酸检测服务。 开通服务的地区，人们可以拿起手机即可便捷的预约核酸检测，最快24小时即可拿到结果。如此便捷的服务，让广大民众欢欣鼓舞，科技的发展又一次为人们的生活带来翻天覆地的变化
生物标志物研究与早期药物研发基因表达分析功...（二）
材料与方法 细胞培养于标准条件下进行肿瘤细胞系（ACHN、Caki、SJSA、PANC-1、MDA-MB231、AsPC-1、SK-MES、NCI-H322M、22RV1）培养。使用TWEAK或 Anti-TWEAK（RO5458640）分别对细胞进行处理。于不同时间点收集肿瘤细胞系（0、6、2
铁皮石斛多糖生物合成调控研究中获进展
铁皮石斛（Dendrobium officinale）是我国传统名贵的中药材，有长期的药用实践史，具有“益胃生津、滋阴清热”的功效，常用于治疗热病津伤、口干烦渴、胃阴不足、食少干呕、病后虚热不退、阴虚火旺、目暗不明。以甘露糖和葡萄糖为主要成分组成的水溶性多糖被认为是铁皮石斛最主要的药效成分之一，
研究发现aTF与缺刻DNA的结合位点并建立小分子检测平台
中国科学院微生物研究所微生物资源前期开发国家重点实验室微生物生理代谢研究组首次发现原核生物別构转录因子（allosteric transcription factor，aTF）在体外能够结合缺刻的DNA结合序列，并利用这一发现建立全新的小分子检测方法平台。相关工作以长文（Research Art
多形性胶质母细胞瘤患者抗血管生成治疗新机制
多形性胶质母细胞瘤（GBM）由于其不良的临床结果和未经治疗的中位总生存期（OS）短（约为7个月），构成了一个难以克服的挑战。GBM在生物学和病理学上具有侵袭性浸润生长、微环境免疫抑制和广泛的新生血管形成的特征，所有这些都有助于GBM细胞逃避免疫清除，在恶劣的微环境中提高生存率，预后不良，复发率高
B7H3和CCR4在免疫中的作用对比（一）
B-hB7-H3小鼠 1、基本信息 2、B7-H3基因功能简介 图1 B7-H3介导的肿瘤免疫[1]CD276 (Cluster of Differentiation 276)是人类CD276基因编码的I型跨膜蛋白，属于免疫球蛋白超家族，也称为B7-H3。B7-H3的转录本在正常组织和实
高质量RNA的标准
real time RT-qPCR 是检测样本中特定基因表达量的有效方法，包含逆转录步骤和定量PCR步骤。好的开始是成功的一半，获得高质量的、能正确反应样品中转录情况的RNA，对于其后的定量结果，自然是非常重要的。Mikael Kubista，教授, R&D TATAA Biocenter主任：RN
MDx－2021：新冠快检/HBV/结核等病原检测技术平台的升级
分析测试百科网讯 2021年5月20-21日，MDx 2021第七届中国先进分子诊断技术与应用论坛在上海新发展亚太JW万豪酒店开幕。本次论坛深度探讨分子诊断技术升级及产品申报与临床落地等前沿走向、基于测序的mNGS临床落地方案、纳米孔/单分子/固态纳米孔技术平台进展、PCR/RAA/dPCR等技
如何使用KeyPro污染净化仪防止RNA的降解和保证PCR的结果...
如何使用KeyPro污染净化仪防止RNA的降解和保证PCR的结果准确性在此次的新型冠状病毒疫情中，核酸检测作为确诊的金标准发挥着重要的作用。众所周知，本次新冠病毒的核酸检测流程为采样（咽拭子、肺泡灌洗液），提取病毒RNA，再经过RT-qPCR或者一步法RT-数字PCR检测样本。但近期关于核酸检测准确
有了新一代测序，瘟疫不再是可怕的疾病
过去，瘟疫是一场可怕的疾病，往往持续多年。如今，通过新一代测序（NGS），研究人员正在梳理病毒的起源，并追踪其扩散，希望将来可防止疫情爆发。在美国微生物学会的年会上，研究人员表示，NGS在诊断、监控和疫情调查上表现出巨大潜力。 纽约医学院的Victoria Gilrane和华盛顿大学的Alex
硝基芳香污染物微生物降解新机制
硝基芳香化合物是一类重要的化工原料，广泛应用于医药、农药、染料、杀虫剂等化工产品的生产。该类化合物大多具有较高的毒性，在食物链中具有富积和放大效应，对人体具有致畸、致癌、致突变等性质，严重威胁人类健康。2,6-二溴-4-硝基酚（2,6-dibromo-4-nitrophenol，2,6-DBNP
华大智造ATOPlex技术+DNBSEQ平台革新废水流行病学研究方法
超强新冠病毒变异株Omicron（B.1.1.529）于近期在全球快速蔓延，为疫情防控与监测带来了巨大挑战。华大智造ATOPlex技术和DNBSEQ测序平台为南非、沙特阿拉伯、瑞典等国Omicron变异毒株的溯源和监测提供了强有力的工具支撑。 华大智造ATOPlex技术和DNBSEQ平台助力南
柑橘溃疡病菌III型抑制剂研究取得新进展
近日，华南农业大学群体微生物研究中心教授崔紫宁团队与贵州大学精细化工研究开发中心教授吴志兵合作，在柑橘溃疡病菌III型抑制剂研究取得新进展。相关成果在线发表于《农业与食物化学期刊》（Journal of Agricultural and Food Chemistry）。柑橘溃疡病是由黄单胞杆菌柑橘致
巨匠生物数千万A轮融资,深耕分子诊断核心酶及蛋白原料
2023年5月，巨匠生物完成了数千万人民币的A轮融资，本轮融资由中信资本旗下中信创投独家投资。所募集资金将主要用于研发实验室和高级别生产车间建设、核心技术团队及管理人员招募、全国性的营销团队组建，以提升公司在生命科学、体外诊断、生物医药领域的竞争力，同时实现业务规模扩展和提升。巨匠生物企业环境分子诊
定量PCR
实验方法原理 定量PCR（即时聚合酶链锁反应，Real-time Polymerase Chain Reaction，简称 Real-time PCR、即时PCR），又称定量即时聚合酶链锁反应（Quantitative real time