GFP:荧光蛋白的起源

作者: 罗辑科学 绿色荧光蛋白(简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。GFP的荧光非常稳定,在激发光照射下,其抗光漂白能力比荧光素强很多。因此GFP及其变种被广泛地用作分子标记;此外,GFP还被用作砷和一些重金属的传感器。 1962年,下村脩和约翰逊在一篇纯化水母素的文章提到从水母中发现了荧光蛋白(GFP),正式开启了生物发光研究的大门。2008年10月8日,日本科学家下村修、美国科学家马丁·查尔菲和钱永健因为发现和改造绿色荧光蛋白而获得了当年的诺贝尔化学奖。而萤光蛋白的故事要从53年前讲起。 1955年Davenport和Nicol发现水母可以发绿光,但不知其因,未深入研究,错过了一次获得诺奖的机会。&nbs......阅读全文

关于荧光蛋白的简介

  荧光蛋白在某种定义下可以说是革新了生物学研究——运用荧光蛋白可以观测到细胞的活动,可以标记表达蛋白,可以进行深入的蛋白质组学实验等等。特别是在癌症研究的过程中,由于荧光蛋白的出现使得科学家们能够观测到肿瘤细胞的具体活动,比如肿瘤细胞的成长、入侵、转移和新生。

绿色荧光蛋白基因与红色荧光蛋白基因是同源的吗

绿色荧光蛋白基因与红色荧光蛋白基因是同源的(1)在该实验中,绿色荧光蛋白基因是目的基因.(2)③是将目的基因导入受体细胞的过程,当受体细胞是动物细胞时,采用最多也最有效的方法是显微注射技术.(3)GFP基因可以作为标记基因,标记基因的作用是鉴定受体细胞中是否含有目的基因.(4)动物细胞培养时,其培养

GFPTrap如何设计成功的IP实验?

借助Chromotek公司GFP-Trap如何设计成功的IP实验?How to plan an immunoprecipitation of your GFP-fusion protein when using the ChromoTek GFP-Trap®PreambleThis document

检测自噬的方法有哪些

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:(一)自噬诱导剂1)bredeldina/thapsigargin/tunicamycin:模拟内质网应激2)carbamazepine/l-690,330/lithiumchloride(氯化锂):imp

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自噬的自噬的研究方法

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:(一)自噬诱导剂1)Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模拟内质网应激2)Carbamazepine/ L-690,330/ Lithium Chloride

检测自噬的方法有哪些

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:(一)自噬诱导剂1)bredeldina/thapsigargin/tunicamycin:模拟内质网应激2)carbamazepine/l-690,330/lithiumchloride(氯化锂):imp

PCR-的起源

  聚合酶链式反应(英文:Polymerase chain reaction,缩写:PCR,又称多聚酶链式反应),是一项利用 DNA 双链复制的原理,在生物体外复制特定 DNA 片段的核酸合成技术。这项技术可在短时间内大量扩增目的基因,而不必依赖大肠杆菌或酵母菌等生物体。  诺贝尔化学奖得主凯利·穆

核膜的起源

  根据对核膜比较基因组学、进化、起源的研究,有科学家提出了原始真核生物“前核生物”(prekaryote)假说,认为其与古菌内共生最终触发了核膜产生。  对于核膜的研究则给出了几个核膜来源的观点,包括原核生物祖先的质膜内陷,或在原生宿主中建立原线粒体后形成真正的新膜系统。  至于核膜的适应性功能,

质谱仪的起源

分离和检测不同同位素的仪器。仪器的主要装置放在真空中。将物质气化、电离成离子束,经电压加速和聚焦,然后通过磁场电场区,不同质量的离子受到磁场电场的偏转不同,聚焦在不同的位置,从而获得不同同位素的质量谱。质谱方法最早于1913年由J.J.汤姆孙确定,以后经 F.W.阿斯顿等人改进完善。现代质谱仪经过不

X射线荧光光谱仪的理论基础X射线的起源

  1895年德国物理学家威廉·康拉德·伦琴研究阴极射线管时,发现阴极能放出一种有穿透力的、肉眼看不见的射线。由于它的本质在当时是一个“未知数”,故称之为X射线。  伦琴无条件地把X射线的发现奉献给人类,没有申请ZL。  X射线和可见光一样属于电磁辐射,但其波长比可见光短得多,在10-6~10nm。

关于绿色荧光蛋白的发展历史介绍

  1962年,已经有文献报道科学家从多管水母属的发光型水螅水母(luminous hydromedusan Aequorea)中提取到了具有生物发光性质的蛋白质也就是绿色荧光蛋白。到了上世纪70年代,对生物发光的现象才有了一些新的进展。有科学家研究了多管水母属生物发光系统的分子内能量转移。到了九十

绿色荧光蛋白分子标记的研究

  分子标记  作为一种新型的报告基因,GFP已在生物学的许多研究领域得到应用。利用绿色荧光蛋白独特的发光机制,可将GFP作为蛋白质标签(protein tagging),即利用DNA重组技术,将目的基因与GFP基因构成融合基因,转染合适的细胞进行表达,然后借助荧光显微镜便可对标记的蛋白质进行细胞内

图解光诱导荧光蛋白系统

GFP蛋白曾经为蛋白质定位等相关研究带来革命性的进展,而随着具有和GFP类似遗传学特征的光学指示剂蛋白的出现,蛋白质相关的动态研究也将获得更多的手段和技术,本文详细介绍了激光诱导荧光系统在蛋白质研究中的应用。 近年来随着蛋白质学研究的进展,研究人员相继发现和特异克隆了一些特殊蛋白质。这些蛋

亚细胞定位用荧光显微镜能看到吗

目前进行亚细胞定位研究,提取拟南芥(Arabidopsis thaliana)(Arabidopsis thaliana)叶肉原生质体进行PEG转化。研究目标采用GFP/YFP融合蛋白,但是在LSM710观察时,叶绿体有很明显的背景,尽管有些细胞是明显看到了GFP荧光,远远强于叶绿体背景,但是拍的照

绿色荧光蛋白在转质粒后在细胞可以发光多久

1. 绿色荧光蛋白GFP只要蛋白不降解,荧光不会萃灭.若做稳定表达,那就可以随时观察荧光,但做稳定表达时程很长;若做瞬时表达,在转染后48小时左右应该就有GFP表达,可以观察荧光.

肿瘤细胞的标记及活体荧光成像

摘要 以绿色荧光蛋白( GFP) 作为标记基因转入人类肺癌细胞系(ASTC2a21) , 经800 mg/ L G418 筛选, 获得5 株高表达细胞系. 利用流式细胞仪对GFP 表达的稳定性进行了初步研究, 结果表明本实验中有些细胞株间GFP 表达稳定性有显著差异( P < 0101) . 将稳定

荧光探针研究获进展-实现单一波长激发双色荧光成像

  近日,中国科学院深圳先进技术研究院副研究员储军主持研发的新型大斯托克斯位移荧光蛋白取得突破,实现了在小鼠脑内单一波长激发双色荧光成像和高灵敏的生物发光成像。该工作以A bright cyan-excitable orange fluorescent protein facilitatesdual

绿色荧光蛋白简介

绿色萤光蛋白(Green fluorescent protein;简称GFP),由下村脩等人于1962年在维多利亚多管发光水母中发现,其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光,整个发光的过程中还需要冷光蛋白质水母素的帮助,冷光蛋白质与钙离子(Ca2+)可产生交互作用。2008

生物发光技术研究及其应用进展

  摘要:   目的:了解生物发光种类、机理及其在医学、生物科学、食品、环保等领域的应用。   方法:对有关的文献中生物发光种类、机理及其在上述领域的具体应用进行综述。   结果:生物发光有两类,机理明确,应用广泛。   结论:生物发光在很多领域的应用日趋广泛,对其深入了解和研究至关重要。

生物发光技术研究及其应用进展

摘要:目的:了解生物发光种类、机理及其在医学、生物科学、食品、环保等领域的应用。方法:对有关的文献中生物发光种类、机理及其在上述领域的具体应用进行综述。结果:生物发光有两类,机理明确,应用广泛。结论:生物发光在很多领域的应用日趋广泛,对其深入了解和研究至关重要。生物发光是生物发光器在细胞或生物体内发

蛋白质的内源性荧光与荧光探针

  利用荧光光谱法研究蛋白质一般有两种方法。一是测定蛋白质分子的自身荧光(内源荧光),另一种是当蛋白质本身不能发射荧光时,通过非共价吸附或共价作用向蛋白质分子的特殊部位引入外源荧光(也称荧光探针),然后测定外源荧光物质的荧光。   蛋白质的内源荧光  含有芳香族氨基酸(色氨酸(tryptophan

绿色荧光蛋白药物筛选应用研究

  药物筛选  许多新发展的光学分析方法已经开始利用活体细胞来进行药物筛选,这一技术能从数量众多的化合物中快速筛选出我们所感兴趣的药物。基于细胞的荧光分析可分为三类:即根据荧光的密度变化、能量转移或荧光探针的分布来研究目标蛋白如受体、离子通道或酶的状态的变化。荧光探针分布是利用信号传导中信号分子的迁

细胞计数仪的选型指导(三)

2)K2型号—双荧光细胞分析仪 K2型号计数仪是即AUTO2000型号之后的另外一款双荧光细胞计数仪。这款型号除了细胞活力分析功能,还可以选配FCS EXPRESS流式软件,进行细胞凋亡、细胞周期、转染后GFP蛋白表达等的检测分析。 特点: a.电脑操控软件; b.双荧光和明场成像:用于AO/PI

载体构建中常用的选择标记基因和报告基因是什么

报告基因的主要作用是标记转化细胞,起报告和识别作用。常用的有Gus基因(β-葡萄糖苷酸酶基因),该基因来自大肠杆菌染色体上的uidA座位,编码β-葡萄糖苷酸酶。绝大多数植物不存在内源的Gus基因活性,因而Gus基因被广泛用作转基因植物的报告基因。常用的检测方法有组织化学染色定位法、荧光检测法和分光光

载体构建中常用的选择标记基因和报告基因是什么

报告基因的主要作用是标记转化细胞,起报告和识别作用。常用的有Gus基因(β-葡萄糖苷酸酶基因),该基因来自大肠杆菌染色体上的uidA座位,编码β-葡萄糖苷酸酶。绝大多数植物不存在内源的Gus基因活性,因而Gus基因被广泛用作转基因植物的报告基因。常用的检测方法有组织化学染色定位法、荧光检测法和分光光

免疫双扩散检测抗GFP血清抗体

实验概要本实验利用免疫双扩散检测了抗GFP血清抗体。实验原理在溶液中的可溶性多价抗原与血清抗体相遇,当两者的比例适当时可以形成一种网状的不溶性的大分子复合物,这叫作免疫沉淀反应。当这样的抗原和相应的抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相对扩散时,在抗原与抗体的比例适当处会形成可见的沉淀线,这叫免疫双扩散实验