GFP：荧光蛋白的起源
作者： 罗辑科学 绿色荧光蛋白(简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。GFP的荧光非常稳定，在激发光照射下，其抗光漂白能力比荧光素强很多。因此GFP及其变种被广泛地用作分子标记；此外，GFP还被用作砷和一些重金属的传感器。 1962年，下村脩和约翰逊在一篇纯化水母素的文章提到从水母中发现了荧光蛋白（GFP），正式开启了生物发光研究的大门。2008年10月8日，日本科学家下村修、美国科学家马丁·查尔菲和钱永健因为发现和改造绿色荧光蛋白而获得了当年的诺贝尔化学奖。而萤光蛋白的故事要从53年前讲起。 1955年Davenport和Nicol发现水母可以发绿光，但不知其因，未深入研究，错过了一次获得诺奖的机会。&nbs......阅读全文
绿色荧光蛋白的结构特点
野生型绿色荧光蛋白，最开始是 238 个氨基酸的肽链，约 25KDa。然后按一定规则，11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏；圆柱中，α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心，能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团，致使荧光猝灭。荧光是荧光蛋白最特别的特点，而其中的
LSCM表达荧光蛋白的组织
表达荧光蛋白的组织经冷冻切片制样后，可直接封片，观察并扫描图像，也可配合使用其它荧光染料进行免疫荧光抗体标记和核染色。同时表达GFP 和 RFP 荧光蛋白的组织切片，如还需作免疫荧光抗体标记，应选择可以被 633 nm 和 405 nm 波长激光器激发的荧光染料，如 CY5、Alexa fluor
绿色荧光蛋白的基本结构
野生型绿色荧光蛋白，最开始是 238 个氨基酸的肽链，约 25KDa。然后按一定规则，11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏；圆柱中，α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心，能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团，致使荧光猝灭。荧光是荧光蛋白最特别的特点，而其中的
关于绿色荧光蛋白的简介
绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白，但传统上，绿色荧光蛋白（GFP）指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是
绿色荧光蛋白的功能介绍
绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白，但传统上，绿色荧光蛋白（GFP）指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下
绿色荧光蛋白的应用特点
由于荧光蛋白能稳定在后代遗传，并且能根据启动子特异性地表达，在需要定量或其他实验中慢慢取代了传统的化学染料。更多地，荧光蛋白被改造成了不同的新工具，既提供了解决问题的新思路，也可能带来更多有价值的新问题。GFP和它的衍生物的可用性已经彻底重新定义荧光显微镜，以及它被用来在细胞生物学和其他生物学科的方
报告基因分类及优缺点
报告基因（reporter gene）是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，其表达产物非常容易被鉴定。把它的编码序列和基因调节序列相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控。作为报告基因必须具备的条件：（1）全序列已测定（2）表达产物在手提细胞中不存在，即无背景，
绿色荧光蛋白的功能特点和作用
绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白，但传统上，绿色荧光蛋白（GFP）指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下
自噬流的检测方法
自噬是真核细胞降解长寿蛋白、错误折叠蛋白和受损细胞器的重要生物学过程。细胞自噬由多个步骤组成, 其中包括: ① 吞噬泡的形成； ② 自噬体的形成； ③ 自噬体与溶酶体融合形成自噬溶酶体； ④ 自噬溶酶体的降解。自噬流是这些步骤在细胞内连续出现的动态过程, 自噬流中的任一环节出现障碍自噬将无法完成
免疫双扩散检测抗GFP血清抗体
实验概要本实验利用免疫双扩散检测了抗GFP血清抗体。实验原理在溶液中的可溶性多价抗原与血清抗体相遇，当两者的比例适当时可以形成一种网状的不溶性的大分子复合物，这叫作免疫沉淀反应。当这样的抗原和相应的抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相对扩散时，在抗原与抗体的比例适当处会形成可见的沉淀线，这叫免疫双扩散实验
Nature子刊：首个电镜版GFP问世
绿色荧光蛋白GFP曾给分子生物学领域带来了一场革命，科学家们用GFP标记细胞内的特定蛋白，就能够通过荧光显微镜轻松的进行识别和定位。但GFP无法用于电镜，而电镜的分辨率可比荧光显微镜高多了。 日前，麻省理工的化学家们就开发出了类似GFP的电镜标记，利用这一新技术科学家们可以在电镜下观察标记的蛋白，
免疫双扩散检测抗GFP血清抗体
实验概要本实验利用免疫双扩散检测了抗GFP血清抗体。实验原理在溶液中的可溶性多价抗原与血清抗体相遇，当两者的比例适当时可以形成一种网状的不溶性的大分子复合物，这叫作免疫沉淀反应。当这样的抗原和相应的抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相对扩散时，在抗原与抗体的比例适当处会形成可见的沉淀线，这叫免疫双扩散实验
饶毅：美妙的生物荧光分子与好奇的生物化学家
下村修 做出应获诺贝尔奖工作的科学家，几十年默默无闻； 被广泛应用的分子，很少人知其发现者； 原始论文鲜为人知，后继论文倒很热门； 曾失明的人，发现了美丽的发光蛋白； 低调的父亲，出了高调的儿子。 这里简介一项生物化学研究，讲一个科学家的故事，还讨论一个问题：是否活着的科学
PNAS：生命起源于高盐环境下的可折叠蛋白
生命起源是无生命分子形成生命系统的过程。地球上的第一个生命应该是微观的，它必须能够进行自我复制，还要能适应当时的环境条件。那么在生命之初到底是先有蛋白还是先有RNA呢？ 目前科学家们普遍接受的理论是“RNA起源”假说，即RNA是第一个生命分子。但日前，佛罗里达州立大学医学院的一项最新研究为生命
绿色荧光蛋白的概念和发现
绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，简称GFP)，是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质，从蓝光到紫外线都能使其激发，发出绿色萤光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白，但传统上，绿色荧光蛋白（GFP）指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下
揭秘神奇荧光蛋白：让老鼠和猪也“发光”
据美国《连线》杂志报道，凭借在绿色荧光蛋白质(GFP)研究领域取得的重要成就，3名科学家上周最终问鼎诺贝尔化学奖，他们分别是马丁·查尔菲(Martin Chalfie)、钱永健(Roger Y. Tsien)和下村修(Osamu Shimomura)。绿色荧光蛋白质可以帮助科学家了解细胞机制如何工作
体视显微镜荧光适配器用于小鼠胚胎筛选
NIGHTSEA体视显微镜荧光适配器(SFA，Stereo Microscope Fluorescence Adapter)应用于筛选GFP阳性的小鼠胚胎并解剖脊髓 实验目的研究者为了研究运动和感觉神经元的生理属性，需要收集出生12-13天带有特殊特性小鼠胚胎的脊髓。然而，只有50%的小鼠胚胎带有特
植物多光谱荧光成像系统配置规格
1) 一体式：可进行叶绿素荧光成像分析及UV紫外光源激发4个波段的荧光成像分析，成像面积13 x 13cm，系统高度集成（整体配置于一个一体式暗适用操作箱内）、方便使用，具备7位滤波轮及多光谱荧光成像滤波器组、高分辨率CCD镜头、UV紫外光激发多光谱荧光成像功能模块及程序软件等；具体又有如下几种
真核表达载体pcDNA3.1GFP的构建
【原理】引物中设计入限制酶位点：由于PCR引物的5'末端可以增加一些非互补碱基，因此可以在两引物的5'末端设计单限制酶或双限制酶切位点。这样得到的PCR产物用限制酶消化产生粘性末端，即可与有互补粘端的载体DNA重组。这种克隆方法效率较高，且当两引物中设计不同酶切位点时，可有效地定向克
新型“化骨绵掌”——纳米级细胞蛋白质水平调控平台
莱斯大学的化学和生物分子工程师Laura Segatori师从双功能识别系统“NanoDeg”创始人Lara Pferdehirt博士（本科）和Wenting Zhao博士（研究生）。该系统允许操作者靶向细胞特定蛋白质，通过加速蛋白水解，控制靶蛋白翻译后的水平，严格调节它们的降解。 这种“即插
生物发光技术研究及其应用进展
摘要：目的：了解生物发光种类、机理及其在医学、生物科学、食品、环保等领域的应用。方法：对有关的文献中生物发光种类、机理及其在上述领域的具体应用进行综述。结果：生物发光有两类，机理明确，应用广泛。结论：生物发光在很多领域的应用日趋广泛，对其深入了解和研究至关重要。生物发光是生物发光器在细胞或生物体内发
生物发光技术研究及其应用进展
摘要： 目的：了解生物发光种类、机理及其在医学、生物科学、食品、环保等领域的应用。 方法：对有关的文献中生物发光种类、机理及其在上述领域的具体应用进行综述。 结果：生物发光有两类，机理明确，应用广泛。 结论：生物发光在很多领域的应用日趋广泛，对其深入了解和研究至关重要。
LUYOR3415RG荧光蛋白观测镜常见问题解答
LUYOR-3415RG荧光蛋白观测镜常见问题解答 荧光蛋白观察镜常见问题解答 1.为什么荧光显微镜能观察到，用荧光蛋白观测镜看不到？ 因为有些植入的荧光蛋白不是整体表达，只是局部表达，表达的面积太小，人的肉眼无法识别，而荧光显微镜是在放大几十倍甚至上百倍观察的效果。 2
高灵敏度的生物发光探针问世
近日，中国科学院深圳先进技术研究院副研究员储军主持研发的新型大斯托克斯位移荧光蛋白取得重要突破，实现了在小鼠脑内单一波长激发双色荧光成像和高灵敏的生物发光成像。 这里的斯托克斯位移指的是荧光物质的最大发射波长和最大激发波长之差，差值若大于100 nm，则认为该荧光蛋白具有大斯托克斯位移的特性
癌症耐药的起源
在过去几十年癌症治疗中，对肿瘤高特异性的靶向药物对癌症治疗起到了非常重要的作用。目前， EGFR突变肺癌是一种常见的家族遗传癌症（白血病和恶性黑色素瘤也是家族遗传癌症，这些癌症都基于在患者体内一些抑癌基因失活或突变而导致肿瘤的发生、发展）。所以，开发出有针对性的靶向药物可以有效地控制这些遗传癌症
分子进化的起源
在漫长的进化过程中生物的 DNA经历了各种各样的变化。包括基因突变、基因重组、染色体易位等。碱基置换突变常导致蛋白质中一个氨基酸的改变。例如正常血红蛋白第 6位的谷氨酸改变为缬氨酸便成为镰形细胞贫血症的血红蛋白 HbS，为赖氨酸替代则成为HbC，前者的碱基是从GAA（谷氨酸）→GUA（缬氨酸），后者
病毒的起源之谜
这特么到底是啥？研究不同生物之间关联的科学家每天都在问这个问题。其答案并不简单，但很重要。生物联系不仅用来制作生命的目录，还有助于理解生命演化为不同形式的进化历程。 病毒是一个极佳的例子。病毒没有细胞结构，因此无法被归类为三种生命域中的任何一种——细菌，古生菌（另一种形式的微生物）及真核生物（
冻干机的历史起源
起源 冻干机起源于19世纪20年代的真空冷冻干燥技术经历了几十年的起伏和徘徊后，在最后的20年中取得了长足进展。进入21世纪，真空冻干技术凭借其它干燥方法无法比拟的优点，越来越受到人们的青睐，除了在医药、生物制品、食品、血液制品、活性物质领域得到广泛应用外，其应用规模和领域还在不断扩大中。为此
肠道的进化起源
消化系统、皮肤、肌肉组织是如何进化的呢？这个问题困扰了科学家一个多世纪。维也纳大学的研究人员对海葵（一种非常古老的动物）胚胎发育的研究结果质疑了150年前提出的形成所有器官和组织的胚层具有同源性的假说。 该假说认为，身体中所有的器官和组织都来源于三个胚层之一，这些胚层在胚胎形成早期出现。这
单倍体基因的起源
人类基因组中的单倍型源于人类有性生殖的分子机制和我们作为一个物种的历史。除性细胞外，染色体在人类细胞中成对出现。其中一条染色体来自父方，另一条来自母方。但染色体在一代代的传递过程中并不是一成不变的。在精子和卵细胞形成的过程中，染色体对发生重组，即一对染色体中聚集到一起并交换片段。由此产生的杂合染色体