绿色荧光蛋白的结构特点

野生型绿色荧光蛋白,最开始是 238 个氨基酸的肽链,约 25KDa。然后按一定规则,11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏;圆柱中,α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心,能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团,致使荧光猝灭。荧光是荧光蛋白最特别的特点,而其中的发色团起着主要的作用。在 α-螺旋上的 65、66、67位氨基酸——丝氨酸、酪氨酸、甘氨酸经过环化、脱氢等作用后形成发色团。有意思的是,发色团形成过程是由外周栅栏上的残基催化,底物只需要氧气。这暗示绿色荧光蛋白被广泛用于不同物种的潜力:在不同物种中能独立表达成有功能的蛋白,而不需要额外的因子。不过,现在依然在讨论准确的过程。发色团上的共轭 π键能吸收激发光能量,在很短的时间后,以波长更长的发射光释放能量,形成荧光。......阅读全文

绿色荧光蛋白的结构特点

野生型绿色荧光蛋白,最开始是 238 个氨基酸的肽链,约 25KDa。然后按一定规则,11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏;圆柱中,α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心,能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团,致使荧光猝灭。荧光是荧光蛋白最特别的特点,而其中的

绿色荧光蛋白的基本结构

野生型绿色荧光蛋白,最开始是 238 个氨基酸的肽链,约 25KDa。然后按一定规则,11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏;圆柱中,α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心,能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团,致使荧光猝灭。荧光是荧光蛋白最特别的特点,而其中的

绿色荧光蛋白的结构介绍

野生型绿色荧光蛋白,最开始是 238 个氨基酸的肽链,约 25KDa。然后按一定规则,11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏;圆柱中,α-螺旋把发色团固定在几乎正中心处。发色图被围在中心,能避免偶极化的水分子、顺磁化的氧分子或者顺反异构作用与发色团,致使荧光猝灭。荧光是荧光蛋白最特别的特点,而其中的

绿色荧光蛋白的应用特点

由于荧光蛋白能稳定在后代遗传,并且能根据启动子特异性地表达,在需要定量或其他实验中慢慢取代了传统的化学染料。更多地,荧光蛋白被改造成了不同的新工具,既提供了解决问题的新思路,也可能带来更多有价值的新问题。GFP和它的衍生物的可用性已经彻底重新定义荧光显微镜,以及它被用来在细胞生物学和其他生物学科的方

绿色荧光蛋白的功能特点和作用

绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但传统上,绿色荧光蛋白(GFP)指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下

绿色荧光蛋白简介

绿色萤光蛋白(Green fluorescent protein;简称GFP),由下村脩等人于1962年在维多利亚多管发光水母中发现,其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光,整个发光的过程中还需要冷光蛋白质水母素的帮助,冷光蛋白质与钙离子(Ca2+)可产生交互作用。2008

绿色荧光蛋白的应用

由于荧光蛋白能稳定在后代遗传,并且能根据启动子特异性地表达,在需要定量或其他实验中慢慢取代了传统的化学染料。更多地,荧光蛋白被改造成了不同的新工具,既提供了解决问题的新思路,也可能带来更多有价值的新问题。

绿色荧光蛋白的发现过程

1994年,华裔美国科学家钱永健(Roger Yonchien Tsien)开始改造GFP,有多项发现。世界上用的大多数是钱永健实验室改造后的变种,有的荧光更强,有的黄色、蓝色,有的可激活、可变色。到一些不常用做研究模式的生物体内找有颜色的蛋白成为一些人的爱好,现象正如当年在嗜热生物中找到以后应用广

绿色荧光蛋白的发现过程

1994年,华裔美国科学家钱永健(Roger Yonchien Tsien)开始改造GFP,有多项发现。世界上用的大多数是钱永健实验室改造后的变种,有的荧光更强,有的黄色、蓝色,有的可激活、可变色。到一些不常用做研究模式的生物体内找有颜色的蛋白成为一些人的爱好,现象正如当年在嗜热生物中找到以后应用广

绿色荧光蛋白的功能介绍

绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但传统上,绿色荧光蛋白(GFP)指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下

绿色荧光蛋白(GFP)的应用

  骨架和细胞分裂  Kevin Sullivan's 实验室  酵母菌内SPB 和微管动力学  酵母菌中肌动蛋白的动力  果蝇中MEI-S332蛋白  果蝇有丝分裂和mRNA运输  网丙菌属细胞骨架  RNA剪切因子的核内运输  网丙菌属的趋化作用  网丙菌属中细胞骨架动力和细胞运动  核

绿色荧光蛋白的发现过程

1994年,华裔美国科学家钱永健(Roger Yonchien Tsien)开始改造GFP,有多项发现。世界上用的大多数是钱永健实验室改造后的变种,有的荧光更强,有的黄色、蓝色,有的可激活、可变色。到一些不常用做研究模式的生物体内找有颜色的蛋白成为一些人的爱好,现象正如当年在嗜热生物中找到以后应用广

什么是绿色荧光蛋白

绿色荧光蛋白分子的形状呈圆柱形,就像一个桶,负责发光的基团位于桶中央,因此,绿色荧光蛋白可形象地比喻成一个装有色素的“油漆桶”。装在“桶”中的发光基团对蓝色光照特别敏感。当它受到蓝光照射时,会吸收蓝光的部分能量,然后发射出绿色的荧光。利用这一性质,生物学家们可以用绿色荧光蛋白来标记几乎任何生物分子或

什么是绿色荧光蛋白?

  绿色荧光蛋白分子的形状呈圆柱形,就像一个桶,负责发光的基团位于桶中央,因此,绿色荧光蛋白可形象地比喻成一个装有色素的“油漆桶”。装在“桶”中的发光基团对蓝色光照特别敏感。当它受到蓝光照射时,会吸收蓝光的部分能量,然后发射出绿色的荧光。利用这一性质,生物学家们可以用绿色荧光蛋白来标记几乎任何生物分

绿色荧光蛋白GFP性质

  GFP荧光极其稳定,在激发光照射下,GFP抗光漂白(Photobleaching)能力比荧光素(fluorescein)强,特别在450~490nm蓝光波长下更稳定。  GFP需要在氧化状态下产生荧光,强还原剂能使GFP转变为非荧光形式,但一旦重新暴露在空气或氧气中,GFP荧光便立即得到恢复。而

黄色荧光蛋白的结构和功能特点

黄色荧光蛋白(Yellow Fluorescent Protein ,YFP)可以看做绿色荧光蛋白的一种突变体,最初来源于维多利亚多管水母( Aequorea victoria)。相对于绿色荧光蛋白,其荧光向红色光谱偏移,而这主要是由于蛋白203位苏氨酸变为酪氨酸。其最大激发波长为514 nm,最大

绿色荧光蛋白的研究与应用

1962年,已经有文献报道科学家从多管水母属的发光型水螅水母(luminous hydromedusan Aequorea)中提取到了具有生物发光性质的蛋白质。到了上世纪70年代,对生物发光的现象才有了一些新的进展。有科学家研究了多管水母属生物发光系统的分子内能量转移。到了九十年代初,科学家才克隆到

绿色荧光蛋白的概念和发现

绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,简称GFP),是一个由约238个氨基酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色萤光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但传统上,绿色荧光蛋白(GFP)指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质。这种蛋白质最早是由下

绿色荧光蛋白分子标记的研究

  分子标记  作为一种新型的报告基因,GFP已在生物学的许多研究领域得到应用。利用绿色荧光蛋白独特的发光机制,可将GFP作为蛋白质标签(protein tagging),即利用DNA重组技术,将目的基因与GFP基因构成融合基因,转染合适的细胞进行表达,然后借助荧光显微镜便可对标记的蛋白质进行细胞内

绿色荧光蛋白融合抗体研究

  融合抗体  近二十年来,抗体生成技术有了飞速发展,已经从细胞工程抗体(杂交瘤技术一单克隆抗体)发展到了第三代抗体:基因工程抗体,尤其是噬菌体抗体库技术的出现,解决了人源抗体的研制问题,促进了各种性能优良抗体以及具有多种功能的抗体融合蛋白的开发。单链抗体(Single-chain variable

绿色荧光蛋白离心菌体能看到绿色吗

本人亲身体验证明,真的可以看见,颜色类似于抹茶沙拉酱,破菌后可以看到明显的亮绿色。当然跟表达量也有关系,本人表达量为4mg/L菌液。

绿色荧光蛋白的研究与使用历史

1962年,已经有文献报道科学家从多管水母属的发光型水螅水母(luminous hydromedusan Aequorea)中提取到了具有生物发光性质的蛋白质。到了上世纪70年代,对生物发光的现象才有了一些新的进展。有科学家研究了多管水母属生物发光系统的分子内能量转移。到了九十年代初,科学家才克隆到

绿色荧光蛋白肿瘤发病机制的应用

  GFP是一个分子量较小的蛋白,易与其他一些目的基因形成融合蛋白且不影响自身的目的基因产物的空间构象和功能。GFP 与目的基因融合,将目的基因标记为绿色,即可定量分析目的基因的表达水平,显示其在肿瘤细胞内的表达位置和量的变化,为探讨该基因在肿瘤发生、发展中的作用及其分子机制提供便利条件。  在肿瘤

LSCM绿色荧光融合蛋白表达载体的构建

绿色荧光融合蛋白表达载体的构建 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP) 及其突变体能在各种不同的生物系统中表达,这对细胞生物学的研究具有重要意义。而荧光蛋白的折叠能力及其同细胞内蛋白的融合能力,使研究 者能直接在细胞体内观察到蛋白质的特性。研究者不需要把蛋白质经过

绿色荧光蛋白基因与红色荧光蛋白基因是同源的吗

绿色荧光蛋白基因与红色荧光蛋白基因是同源的(1)在该实验中,绿色荧光蛋白基因是目的基因.(2)③是将目的基因导入受体细胞的过程,当受体细胞是动物细胞时,采用最多也最有效的方法是显微注射技术.(3)GFP基因可以作为标记基因,标记基因的作用是鉴定受体细胞中是否含有目的基因.(4)动物细胞培养时,其培养

GFP绿色荧光蛋白的检测方法有哪些?

检测方法:1、实验准备 Modulus单管型多功能检测仪 Blue荧光模块(P/N 9200-040) 微量适配器(P/N 9200-928) 纯化的rAcGFP1蛋白(Clontech,NO.632502) 200ul加样器与20ul加样器 TE Buffer (10 mM Tris-

GFP绿色荧光蛋白的检测方法有哪些

检测方法:1、实验准备 Modulus单管型多功能检测仪 Blue荧光模块(P/N 9200-040) 微量适配器(P/N 9200-928) 纯化的rAcGFP1蛋白(Clontech,NO.632502) 200ul加样器与20ul加样器 TE Buffer (10 mM Tris-

GFP绿色荧光蛋白的检测方法有哪些

检测方法:1、实验准备 Modulus单管型多功能检测仪 Blue荧光模块(P/N 9200-040) 微量适配器(P/N 9200-928) 纯化的rAcGFP1蛋白(Clontech,NO.632502) 200ul加样器与20ul加样器 TE Buffer (10 mM Tris-

绿色荧光蛋白在胞外环境能激发荧光吗

绿色荧光蛋白在胞外环境能激发荧光吗绿色荧光蛋的发光机理比荧光素/荧光素酶要简单得多。一种荧光素酶只能与相对应的一种荧光素合作来发光,而绿色荧光蛋白并不需要与其他物质合作,只需要用蓝光照射,就能自己发光。在生物学研究中,科学家们常常利用这种能自己发光的荧光分子来作为生物体的标记。将这种荧光分子通过化学

T克隆绿色荧光蛋白(GFP)基因实验

【原理】经TaqDNA聚合酶扩增后的PCR产物末端都带有单个A。正是基于这一原理,pGEM-T质粒经EcoRV切成平端后,在开口端加上一个T制成T载体,一方面避免了自身环化,另一方面由于T-A互补,从而提高了T载体与PCR产物之间的连接效率。由于T-A克隆只需纯化PCR产物,因而操作较为简便。pGE