smFRET检测GPCR调控下游蛋白arrestin的构象分布研究获进展
G蛋白偶联受体(GPCR)是目前已知的人类基因组中最大的膜蛋白家族,约30%的临床处方药的直接靶点是GPCR,负责80%左右的跨膜信号转导,参与调控人体中多数病理与生理过程。GPCR主要通过G蛋白及arrestin将细胞外的刺激转变为细胞内信号。近年来,结构生物学研究方法的进步为研究GPCR及其下游蛋白arrestin和G蛋白的功能奠定了良好的基础。目前,研究GPCR及下游蛋白结构的常用方法主要有晶体学、NMR、冷冻电镜。然而,通过晶体或电镜结构获得的信息,对于GPCR结构和功能的理解往往只能从静态水平出发,较难捕获GPCR构象动态转换的动力学过程以及与下游蛋白相互作用时的瞬时调节过程。NMR 光谱可捕获GPCR及其下游蛋白的动态过程,却不能检测其构象状态分布。 前期工作中,山东大学教授孙金鹏与中国科学院生物物理研究所教授王江云研究团队,针对受体与arrestin相互作用的磷酸化编码机制展开了研究工作,发现了GPCR磷酸化......阅读全文
G蛋白偶联受体的功能简介
这类受体的共同点是其立体结构中都有七个跨膜α螺旋,且其肽链的C端和连接(从肽链N端数起)第5和第6个跨膜螺旋的胞内环(第三个胞内环)上都有G蛋白(鸟苷酸结合蛋白)的结合位点。目前为止,研究显示G蛋白偶联受体只见于真核生物之中,而且参与了很多细胞信号转导过程。在这些过程中,G蛋白偶联受体能结合细胞
G蛋白偶联受体的主要分类
根据对人的基因组进行序列分析所得的结果,人们预测出了近千种G蛋白耦联受体的基因。这些G蛋白偶联受体可以被划分为六个类型,分属其中的G蛋白耦联受体的基因序列之间没有同源关系。A类(或第一类,视紫红质样受体)B类(或第二类,分泌素受体家族)C类(或第三类,代谢型谷氨酸受体)D类(或第四类,真菌交配信息素
G蛋白偶联受体的结构特点
G蛋白偶联受体均是膜内在蛋白(Integral membrane protein),每个受体内包含七个α螺旋组成的跨膜结构域,这些结构域将受体分割为膜外N端(N-terminus),膜内C端(C-terminus),3个膜外环(Loop)和3个膜内环。受体的膜外部分经常带有糖基化修饰。膜外环上包含有
G蛋白偶联受体的分类介绍
根据对人的基因组进行序列分析所得的结果,人们预测出了近千种G蛋白耦联受体的基因。这些G蛋白偶联受体可以被划分为六个类型,分属其中的G蛋白耦联受体的基因序列之间没有同源关系。 A类(或第一类,视紫红质样受体) B类(或第二类,分泌素受体家族) C类(或第三类,代谢型谷氨酸受体) D类(或第
G蛋白偶联受体的功能特点
G蛋白偶联受体参与众多生理过程。包括但不限于以下例子:感光:视紫红质是一大类可以感光的G蛋白偶联受体。它们可以将电磁辐射信号转化成细胞内的化学信号,引导这一过程的反应称为光致异构化(Photoisomerization)。具体细节为:由视蛋白(Opsin)和辅因子视黄醛共价连接所构成的视紫红质在光源
G蛋白偶联受体的激活方式
胞内部分有G蛋白结合区。G蛋白α,β,γ三种亚单位组成的三聚体,静息状态时与GDP结合.当受体激活时GDP-αβγ复合物在Mg2+参与下,结合的GDP与胞质中GTP交换,GTP-α与βγ分离并激活效应器蛋白,同时配体与受体分离。α亚单位本身具有GTP酶活性,促使GTP水解为GDP,在与βγ亚单位形成
小G蛋白的特点和作用
小G蛋白(Small G Protein)因分子量只有20~30KD而得名,同样具有GTP酶活性,在多种细胞反应中具有开关作用。第一个被发现的小G蛋白是Ras,它是ras基因[5]的产物。其它的还有Rho,SEC4,YPT1等,微管蛋白β亚基也是一种小G蛋白。小G蛋白的共同特点是,当结合了GTP时即
蛋白共沉淀检测实验_用蛋白A/G琼脂糖
实验材料全细胞抽提物试剂、试剂盒抗体免疫共沉淀缓冲液氯化钠蛋白 A G-琼脂糖浆2 × 样品缓冲液(用于 SDS-PAGE 胶)仪器、耗材20 ml 注射器和 18-G 针头汉密尔顿注射器实验步骤1. 在冰上将以下组分加入离心管,双份:0.5~1 mg 全细胞抽提物1 μg 抗体5 mol/L Na
抗体蛋白A或蛋白G微珠层析柱的制备
蛋白A或蛋白G微珠-抗体层析柱是免疫亲和层析技术中最常用的微珠基质之一。此类层析柱容易制备,由于抗体分子是通过Fc段与微珠基质结合,抗原结合片段(Fab)可与抗原最大限度地发生作用。以下介绍的方法可用于蛋白质抗原的纯化,但类似的方案也适用于任何其他抗原。 抗体可直接与蛋白A或蛋白G结合。根据抗
Cell:构建出RGS蛋白调节G蛋白信号的全面图谱
在一项新的研究中,来自美国斯克里普斯研究所的研究人员全面绘制了细胞内的一类关键蛋白如何调节从细胞表面受体传入的信号。此外,他们揭示了人们通常在这类蛋白中存在的变异导致他们的细胞在相同的细胞受体受到刺激时做出不同的反应,这为为什么不同人对相同的药物作出的反应存在有很大的不同提供了一个合理的解释。相
免疫球蛋白G(IgG)的纯化—蛋白G交联琼脂糖凝胶亲和层析
实验步骤 蛋 白 G 和蛋白A 在 不 同PH 下结合抗体的能力不同:蛋 白 G 在 低 pH 下与抗体结合力强,在 高 pH下与抗体结合力弱。但 一 些 抗 体(小 鼠 IgG1 和兔、人抗体)在 高 pH(8〜 1 0 ) 下仍与蛋白G 结合 。 一 般 推 荐 最 好 在 pH5 时结合抗体,
科学家攻克G蛋白偶联受体信号转导重大科学难题
中科院上海药物研究所研究员徐华强领衔的交叉团队,利用冷冻电镜技术成功解析视紫红质与抑制型G蛋白(Gi)复合物的近原子分辨率结构,攻克了细胞信号转导领域的重大科学难题。6月14日,相关研究成果在线发表于《自然》。 GPCR是最大的一类细胞跨膜信号转导受体家族和最重要的药物靶标,其通过偶联下游G蛋白
科学家攻克G蛋白偶联受体信号转导重大科学难题
中科院上海药物研究所研究员徐华强领衔的交叉团队,利用冷冻电镜技术成功解析视紫红质与抑制型G蛋白(Gi)复合物的近原子分辨率结构,攻克了细胞信号转导领域的重大科学难题。6月14日,相关研究成果在线发表于《自然》。 GPCR是最大的一类细胞跨膜信号转导受体家族和最重要的药物靶标,其通过偶联下游G蛋
山东大学孕酮膜受体研究获进展
孕酮通过GPR126促进了乳腺癌的发展 山东大学供图 近日,山东大学基础医学院教授孙金鹏、于晓团队在孕酮膜受体领域取得新进展。相关研究成果发表在美国《国家科学院院刊》。 类固醇激素孕酮除了通过核受体PR发挥经典的基因组作用之外,还存在快速的非基因组作用方式,但是
我国成功解析视紫红质与抑制型G蛋白复合物的结构
中国科学院上海药物研究所徐华强研究员领衔的交叉团队,联合攻关,利用冷冻电镜技术成功解析视紫红质(Rhodopsin)与抑制型G蛋白(Gi)复合物的近原子分辨率结构,攻克了细胞信号转导领域的重大科学难题。该项突破性成果于北京时间2018年6月14日以长文形式在线发表于国际顶级学术期刊《自然》(Na
中科院受体结构与功能重点实验室开放课题申请
中国科学院受体结构与功能重点实验室正式成立于2013年4月,其依托单位为中国科学院上海药物研究所。实验室以解决重大科学问题为导向,开展与重大疾病相关受体的结构与功能的基础研究,解析G蛋白偶联受体(GPCR)、离子通道及核受体等受体蛋白的三维结构;阐明其生理、病理功能及其参与的信号转导网络,确证
用BRET方法研究活细胞中GPCR蛋白相互作用的基本注意事项2
BRET融合结构的生产构成编码BRET融合蛋白包括以下内容:1. 表达Rluc-EYFP融合蛋白的BRET融合结构的阳性对照(见注2)。2. BRET结构的阴性对照:如:单独表达Rluc和EYFP的pRluc, pEYFP,GPCRs对照(非感兴趣的GPCR)和其他融合了Rluc或者EYFP的蛋白,
解析人源二型大麻素受体CB2在激活形态下的信号机制
大麻作为药用植物被用于致幻、镇痛的历史可以追溯至几千年之前的世界各大文明之中。大麻的药用价值比较复杂,内含包括四氢大麻酚(THC)、大麻二酚(CBD)等在内的几十种大麻素。植物来源大麻素和合成大麻素通过人体内的内源大麻系统(ECS)发挥多种生理功能。ECS包括两种被称为大麻素受体的G蛋白偶联受体
用BRET方法研究活细胞中GPCR蛋白相互作用的基本注意事项1
简介: BRET已经成功的应用于研究哺乳动物细胞中GPCR同源和异源二聚体以及涉及到受体脱敏作用和交易的受体/β-arrestin相互作用(综述,1)。BRET的显著优势是可以在活细胞中,正确的的位置实时的监测蛋白质和蛋白质之间的相互作用。由于GPCR高度的疏水性和细胞本地化,测量蛋白质之间相互作用
Nature:诺奖得主时隔25年再联手
罗伯特•莱夫科维茨(Robert Lefkowitz)和布莱恩•科比尔卡(Brian Kobilka)本身都是医生,是细胞信号传导将他们吸引到基础生物学的研究中来,而医学界也因此获益匪浅。G蛋白偶联受体GPCR是细胞通讯的核心蛋白,罗伯特•莱夫科维茨和布莱恩•科比尔卡在GPCR研究领域所取得
血清白蛋白与球蛋白比值(a/g)的临床意义
异常结果 1、降低 见于慢性活动性肝炎、肝硬化、慢性肾炎、肾病综合征、类脂性肾病、低蛋白血症、巨球蛋白血症、多发性骨髓瘤、黑热病、结缔组织病如系统性红斑狼疮、亚急性感染性心内膜炎。 肝病患者的A/G几乎都可降低,尤以有黄疸的肝硬变为甚。肝外胆道阻塞者,A/G比值降低与急性肝炎者大致相似。重
生化检测项目血清白蛋白与球蛋白比值(A/G)介绍
血清白蛋白与球蛋白比值(A/G)介绍: 白/球比值为血清白蛋白的测定值除以血清球蛋白的值,该项检查结果有助于肝脏疾病的诊断。血清白蛋白与球蛋白比值(A/G)正常值: 1.5:1-2.5∶1 (正常比值应>1)。血清白蛋白与球蛋白比值(A/G)临床意义: 异常结果: (1) 降低: 见于慢性
Nature长文:GPCR药物大盘点
G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCRs)家族是人类中最庞大的膜蛋白家族,也是很多药物的重要靶点。这个家族中有800多个成员,其中包括400个左右嗅觉受体。据统计,靶向GPCR的药物销量占全球市场的27%。GPCRs一直是药物研发的重要靶点之一,因为它们
我国科学家揭示强效镇痛药芬太尼和吗啡作用机理
为何芬太尼的镇痛效果比吗啡高近百倍?如何减少成瘾和呼吸抑制致死等毒副作用?近日,中国科学院上海药物研究所团队通过分子结构解析,揭示了其背后的分子机制,为推动新型高效低毒的阿片类镇痛药物开发指明方向。11月10日,该论文以长文形式在线发表于国际顶级期刊《Cell》。 该研究由徐华强/庄友文团
G蛋白偶联受体信号通路相关SNCAIP
该基因编码一种含有多个蛋白质相互作用域的蛋白质,包括锚蛋白样重复序列、卷曲螺旋结构域和atp/gtp结合基序。编码蛋白与神经元组织中的α-突触核蛋白相互作用,可能在胞浆内含物的形成和神经变性中起作用。这个基因的突变与帕金森氏症有关。选择性剪接导致多个转录变体。[由RefSeq提供,2015年4月]T
关于免疫球蛋白G的简介
B淋巴细胞在抗原刺激下转化为浆细胞,产生能与相应抗原发生特异性结合的抗体,称为免疫球蛋白。免疫球蛋白G(IgG)是血清中免疫球蛋白的主成分,约占血清中免疫球蛋白总含量的75%。IgG有4个亚型,即IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。IgG是体内最主要的抗体,具有抗病毒、中和病毒、抗菌及免疫调
关于G蛋白的读取信息介绍
一般情况下,信号分子与细胞表面的受体结合,然后,由以G蛋白为核心的信号传递系统把信息从胞外传递到胞内。G蛋白系统是细胞中最常见的信号传递方式。细胞中存在数以千计的特异性G蛋白偶联受体:有些识别激素,改变新陈代谢的水平;有些在神经系统中传递神经信号。我们的视觉依赖于一种光敏G蛋白系统;而我们的嗅觉
G蛋白偶联受体的基本概念
G蛋白偶联受体(G Protein-Coupled Receptors,GPCRs)是一大类膜蛋白受体的统称。
免疫球蛋白G的功能特性
IgG是生物体液内主要的Ig,约占血液中Ig总量的70~75%。由于IgG能通过胎盘,所以新生儿从母体获得的 IgG在抵抗感染方面起重要作用。婴儿出生后2~4周开始合成IgG,8岁以后血清中IgG可达到成人水平。由于IgG较其他类Ig更易扩散到血管外的间隙内,因而在结合补体、增强免疫细胞吞噬病原
G蛋白偶联受体信号通路相关TSHR
该基因编码的蛋白是一种膜蛋白,是甲状腺细胞代谢的主要调控因子。编码蛋白是甲状腺素和甲状腺素的受体,其活性由腺苷酸环化酶介导。这个基因的缺陷是几种甲状腺机能亢进症的原因。已经发现了三个编码不同亚型的转录变体。[由RefSeq提供,2008年12月]The protein encoded by this